Клинико - морфологическая характеристика и терапия ран крупного рогатого скота с использованием биопаг-д
На правах рукописи
ЮСУПОВ ИЛЬНУР ЗАКИЕВИЧ
КЛИНИКО - МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ТЕРАПИЯ РАН КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОПАГ-Д
06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Уфа – 2013
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный аграрный университет»
| Научный руководитель: | доктор ветеринарных наук, профессор Гимранов Валиян Валиуллович |
| Официальные оппоненты: | Иванов Александр Ильич, доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, профессор кафедры инфекционных болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы |
| Сидорова Клавдия Александровна доктор биологических наук, профессор, директор института Биотехнологии и ветеринарной медицины, зав. кафедры анатомии физиологии ФГБОУ ВПО «Государственный аграрный университет Северного Зауралья», г. Тюмень |
Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Оренбургский государственный аграрный университет»
Защита состоится « 31 » мая 2013г. в 930 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.02 при ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ по адресу: 450001, г.Уфа, ул. 50-летия Октября, 34.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ.
Автореферат разослан «___» апреля 2013 г.
Ученый секретарь диссертационного совета,
доктор ветеринарных наук, профессор Каримов Ф.А.
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Повышение продуктивности и сохранность поголовья крупного рогатого скота является одной из актуальных проблем животноводства. Однако, значительный ущерб хозяйствам наносят болезни незаразной этиологии, на которые по данным Веремей Э.И. и Тимофеева С.В. (2003), приходится 84-93% от всех заболеваний крупного рогатого скота, хирургическая патология из их числа составляет около 40%, из них от 25 до 54%, по данным Ермолаева В.А. и Никулина Е.Н. (2010), приходится на гнойно-воспалительные или гнойно-некротические процессы мягких тканей. Основную массу этих болезней составляют раны, язвы, свищи, а также осложнения связанные с поражениями костно-суставной патологии, сухожильно-связочного аппарата. Значительный экономический ущерб связанный с этими заболеваниями складывается из потерь продуктивности, преждевременной выбраковки животных, затрат на лечение, дополнительное содержание, необходимого на восстановление здоровья животного и продуктивности (Плахотин М.В., 1977; Лукъяновский В.А. 1999).
Вопросы, связанные с изучением проблемы заживления ран, несмотря на многовековую историю, относятся к одной из актуальнейших в гуманитарной и ветеринарной медицине, научный уровень и практическое состояние этой проблемы, во многом определяют уровень развития всей хирургической науки. Внедрение современных методов исследования течения раневого процесса, дало возможность по-новому оценить патогенез заживления, раскрыть механизмы метаболических процессов в клетках и соединительной ткани, протекающие при заживлении ран (Камаев М.Ф. 1970; Плахотин М.В., 1981; Тимофеев С.В., 2007; Шакуров М.Ш., 2011). Это позволило обоснованно ввести в практику новые эффективные препараты для лечения ран. В связи с этим перспективным направлением являются биоцидные препараты на основе полиалкиленгуанидинов (ПАГи). Полиалкиленгуанидины обладают низкой токсичностью для человека и животных. Спектр биоцидного действия ПАГов весьма широк: уже в небольших концентрациях эффективны против большинства патогенных микроорганизмов, вызывающих гнойные, респираторные, кишечные и другие заболевания, и оказывают воздействие на аэробную и анаэробную микрофлору (Козак С.С. и соавт., 2007; Баскаков Е.В., 2007).
Цели и задачи исследований. Цель исследований - изучить влияние Биопаг-Д на заживление ран и гнойно-некротических процессов у крупного рогатого скота.
Для достижения этой цели необходимо решить следующие задачи:
- изучить характер и распространенность гнойно-воспалительных процессов мягких тканей крупного рогатого скота;
- изучить влияние Биопаг-Д на заживление экспериментальных ран у крупного рогатого скота;
- изучить клинико-морфологические и биохимические показатели у крупного рогатого скота при раневом процессе;
- определить показатели иммунного статуса у крупного рогатого скота при раневом процессе;
- изучить влияние Биопаг-Д на клинические и микробиологические показатели кастрационных ран у бычков.
Научная новизна. Впервые изучено влияние Биопаг-Д на гистологические и гистохимические показатели заживления экспериментальных ран у крупного рогатого скота. Впервые установлено, что применение Биопаг-Д ускоряет заживление ран у крупного рогатого скота на 7 дней.
Проведенными комплексными исследованиями выявлены клинико-морфологические, биохимические, иммунобиологические показатели и состояние обмена макро и микроэлементов при кастрационных ранах у крупного рогатого скота.
Впервые изучено влияние Биопаг-Д на клинические и микробиологические показатели кастрационных ран у бычков. Выявлено выраженное пролонгированное бактерицидное действие Биопаг-Д, по сравнению с традиционной обработкой операционного поля и послекастрационных ран растворами иода, в отношении стафилококков, стрептококков, E.coli, P. Vulgaris.
Теоретическая и практическая значимость работы. Изучено влияние Биопаг-Д на заживление экспериментальных, кастрационных ран у бычков и спонтанных гнойно-воспалительных процессов у крупного рогатого скота. Определена возможность применения Биопаг-Д в разведении 1:1 с 0,5% раствором новокаина при спонтанных гнойно-некротических процессах у крупного рогатого скота в условиях промышленных комплексов. Выявлена высокая эффективность Биопаг-Д в разведении 1:1 с 0,5% раствором новокаина, как антисептика при обработке операционного поля при кастрации бычков.
Результаты исследований дополняют сведения о патогенезе раневого процесса у крупного рогатого скота, раскрывают механизмы морфологических и биохимических показателей, иммунно-биологических процессов, состояние обмена микро и макроэлементов при кастрационных ранах у бычков.
Связь работы с плановыми исследованиями и научными программами.
Диссертационная работа выполнялась в рамках плановых научно-исследовательских работ кафедры анатомии, патанатомии, акушерства и хирургии ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ «Обоснование и разработка комплексных методов диагностики, лечения и профилактики болезней в области конечностей у крупного рогатого скота» (номер госрегистрации 01201058601), в рамках задания ГНТП Академии наук Республики Башкортостан «Развитие научной и инновационной деятельности в сельском хозяйстве, биологии и медицине. Развитие научной и инновационной деятельности в агропромышленном производстве РБ» (2008-2012гг.).
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: Всероссийской научно-практической конференции в рамках ХХ юбилейной специализированной выставки «Агрокомплекс-2010» (Уфа, 2010); Международной научно-практической конференции «Состояние, проблемы и перспективы развития АПК», посвященная 80-летию ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ (Уфа, 2010); Всероссийской научно-практической конференции в рамках XXI международной специализированной выставки «Агрокомплекс – 2011» (Уфа, 2011); Международной научно-практической конференции «Современные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии», посвященную 250-летию ветеринарии (Белоруссия, Витебск, 2011); Международной научно-практической конференции «Инновационные методы диагностики, профилактики и лечения незаразных болезней животных» (Оренбург, 2011); Международной научно-практической конференции «Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения» посвященной Всемирному году ветеринарии в ознаменование 250-летия профессии ветеринарного врача (Ульяновск, 2011); Международной научной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной хирургии» (Ульяновск, 2011).
Реализация результатов исследований. Результаты исследований внедрены на молочных комплексах Кугарчинского и Уфимского районов РБ, используются в учебном процессе и при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсу общей и частной хирургии факультета ветеринарной медицины, а также на ФПК ДПО послевузовского образования ФГБОУ ВПО Башкирского ГАУ. Изданы рекомендации «По диагностике, лечению и профилактике болезней в области пальцев у крупного рогатого скота». Авторы: Гимранов В.В., Утеев Р.А., Гилязов А.Ф., Юсупов И.З. с грифом НТС Минсельхоза РБ, протокол №1, от 03 ноября 2010.
Публикация результатов исследований. Основные научные результаты по теме диссертации опубликованы 10 научных работах, в том числе 2 из них - в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Основные положения, выносимые на защиту:
1. Результаты диспансеризации коров.
2. Влияние Биопаг-Д на клинико-морфологические показатели заживления экспериментальных ран у крупного рогатого скота.
3. Состояние клинико-морфологических и биохимических показателей и иммунного статуса у бычков при кастрационных ранах.
4. Влияние Биопаг-Д на клинические и микробиологические показатели кастрационных ран у бычков.
Структура диссертации. Диссертация изложена на 145 страницах компьютерного текста и состоит из: введения, обзора литературы, материала и методов исследований, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы. Работа иллюстрирована 13 таблицами и 76 рисунками. Библиографический список включает в себя 204 источника, в том числе 40 зарубежных авторов.
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы исследований
Научно-исследовательская работа проводилась с 2009 по 2012 г. на кафедре анатомии, патанатомии, акушерства и хирургии и коллекционном дворе УНЦ ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», СПК «Тавакан» Кугарчинского района Республики Башкортостан, Башкирской научно-производственной лаборатории, в иммунологической лаборатории ГКБ №21, в соответствии с кафедральной тематикой (номер госрегистрации 01201058601).
Таблица 1 Схема опытов
| Серии опытов | Исследования | Количество животных | |
| Коровы | Бычки | ||
| 1 | Диспансеризация коров молочного комплекса ГУСП «Тавакан» РБ, применение Биопаг-Д при лечении спонтанных гнойно-некротических процессов | 186 | |
| 2 | Изучение влияния Биопаг-Д на клинические и гистоструктурные показатели раневого процесса экспериментальных ран | 4 | |
| 3 | Исследования крови при кастрационных ранах- морфология, биохимия, иммунология, обмен макро- и микроэлементов | 10 | |
| 4 | Влияние Биопаг-Д на клинические и микробиологические показатели при кастрационных ранах | 6 | |
| Итого | 186 | 20 | |
Было проведено четыре серии опытов (таблица 1).
В первой серии изучали распространенность гнойно-некротических процессов у коров молочного комплекса СПК «Тавакан» Кугарчинского района Республики Башкортостан, была проведена хирургическая диспансеризация коров в количестве 186 голов и лечение больных животных с гнойно-некротическими процессами.
Во второй серии исследования проводили в условиях клиники ФГБОУ ВПО Башкирского ГАУ, определяли влияние Биопаг-Д на заживление экспериментальных ран. Исследования провели на 4 бычках черно-пестрой породы в возрасте 5-6 месяцев, подобранных по принципу аналогов с ранами нанесенными в области спины. Операцию по нанесению ран проводили под наркозом препаратами Ксила-Золетил в дозе 0,3 мл. внутримышечно, местно, подкожно, для обезболивания вводили 0,5% раствор новокаина. Каждому животному наносили по 2 раны в области спины, справа и слева в 10-ом межреберье, отступя от остистых отростков на 10см, по трафарету площадью 8 см. кв., при этом рассекали кожу, обнажали рыхлую клетчатку, незначительное кровотечение останавливали тампонадой.
Рану с правой стороны обрабатывали методом аппликации марлевой салфеткой пропитанной раствором Биопаг-Д в разведении 1:1 с 0,5%-ным раствором новокаина (опытная), с левой стороны рану тем же способом обрабатывали 0,5%-ным раствором новокаина (контрольная). В последующем обработку ран проводили на 3-й, 7-ой, 14 день после их нанесения. Гистологические и клинические исследования общего состояния животных, проводили через 1,3,7,14,21,28 суток после нанесения ран. Материал для гистологических исследований получали методом биопсии. Фиксацию проводили в жидкости Карнуа и нейтральном формалине, срезы получали с парафиновых блоков и окрашивали гематокселином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, содержание ДНК определяли по методу Фёльгена, РНК по Браше, гликоген по Шабадашу. Площадь раны определяли по методу Т.Д. Зырянова, С.С. Сергеева, Н.Н. Цуканова (1977). Местную температуру определяли электротермометром в четырех точках отступя от края раны на 1 см.
В третьей серии опытов исследования проводилась в коллекционном дворе УНЦ Башкирского ГАУ на 10 бычках черно-пестрой породы в возрасте 5-6 мес. Моделью экспериментальных ран служили кастрационные раны. Кастрации проводились с соблюдением правил асептики и антисептики, на лигатуру открытым способом, кровь для исследований брали за три дня до кастрации, через 3, 7, 14, 21 сутки после кастрации.
Взятие и исследование крови проводили по общепринятым методикам.
Содержание гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов определяли с помощью гематологического анализатора Sysmex- KX21.
Биохимические исследования крови проводили с использованием биохимического анализатора Stat Fax 3300, которые включали определение содержания белка, глюкозы, мочевины, билирубина, холестерина, Y-ГГТ, АЛТ, АSТ, витаминов А и Е, макро и микро элементов Са, Р, Zn, К, Na, Fe, Cu, Co, Mg, Mn.
Т лимфоциты определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) по Wybran et al. (1972), фагоцитарную активность (ФА) лейкоцитов в сыворотке крови устанавливали путем реакции фагоцитоза с латексом (Назаренко Г.И. и др., 2000).
Количество циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) – по методу Ю.А. Гриневича, И.И.Алферова (1981), количество иммуноглобулинов - по G. Manchini et al. (1981).
В четвертой серии проводились исследования влияния Биопаг–Д на клинические и микробиологические показатели кастрационных ран.
Исследования проводились в коллекционном дворе УНЦ Башкирского ГАУ на 6 бычках черно-пестрой породы в возрасте 5-6 мес., подвергнутых кастрации открытым способом на лигатуру. Первая группа из 3 бычков служила контролем, операционное поле перед кастрацией, подготовленное обычным методом обрабатывали 10% спиртовым раствором иода. Вторая группа из 3 бычков опытная, кожу операционного поля перед кастрацией обрабатывали раствором Биопаг–Д, приготовленном на 0,5% растворе новокаина в разведении 1:1.
Пробы для микробиологических исследований получали с поверхности кожи на месте предполагаемых кастрационных ран после обработки указанными растворами, затем пробы брали с поверхности ран сразу после кастрации, в последующем пробы для микробиологических исследований получали на 3, 7, 14, 21 день после кастрации. С этого материала готовили смывы. В лаборатории полученный материал разводили стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:10, далее производился ряд серийных разведений каждого смыва до 10. Из каждого разведения делались высевы на следующие питательные среды: мясопептонный агар, агар Эндо, агар Плоскирева, в этих средах подсчитывались число КОЕ (колоний образующих единиц).
На мясопептонном агаре (МПА) проводилось обнаружение и дифференциация выросших колоний стафилококков и стрептококков.
На агаре Эндо – обнаружение и дифференциация микроорганизмов семейства Enterobacteria, в частности E.coli.
На агаре Плоскирева проводилось обнаружение и индентификация микроорганизмов семейства Proteus, в частности P. Vulgaris.
Число КОЕ – колоний образующих единиц подсчитывалось по формуле:
КОЕ=( А х 10 + Б х 100 + С х 1000) = кол.микробов х 10,
3
где, А х 10, количество колоний одного типа при разведении 1:10,
Б х 100, количество колоний одного типа при разведении 1:100,
С х 1000, количество колоний одного типа при разведении 1:1000.
Если подсчет колоний в чашках не возможен, то в протоколе отмечают «сплошной рост».
Дифференциация микроорганизмов проводилась путем микроскопии, исследованием биохимических и культуральных их свойств.
Расчет экономического ущерба от болезней конечностей различного генеза проводили по методике Департамента ветеринарии МСХ РФ по формуле:
У= б х ( Пз - Пб) х Т х Ц – где
У – сумма ущерба в рублях
б- число больных коров
Пз- средняя продуктивность здоровых коров (л)
Пб- средняя продуктивность больных коров (л)
Т- продолжительность переболевания животных (дни)
Ц – цена 1 л молока (средняя закупочная цена молока по РБ в момент проведения исследований составляла 12 руб/л).
Данные по продуктивности коров получали из единой базы компьютерных данных по молочному комплексу, где проводились производственные опыты.
Все полученные данные обрабатывали методом вариационной статистики на персональном компьютере с использованием программы: Microsoft Excel 2003, «БИОСТАТ». Для оценки достоверности полученных данных использовали тест Стьюдента, различия между полученными данными считали достоверными при р<0,05.
2. 2 Результаты собственных исследований
2. 2.1 Результаты диспансеризации коров молочного комплекса.
На молочно-товарной ферме «Тавакан» Кугарчинского района провели диспансерное обследование 186 коров, при этом выявлено 46 коров с гнойно-некротическими процессами в области пальцев, 10 коров с гнойно-воспалительными процессами других областей тела, 9 голов с деформацией копытец.
Таблица 2 Результаты диспансеризации коров
| Всего исследовано 186 голов крупного рогатого скота | |||
| Процессы | Область локализации процессов | Итого | |
| Гнойно-некротические процессы в области пальцев | Гнойно-воспали- тельные процессы мягких тканей других областей тела | ||
| Раны | 3 | 3 | 6 |
| Язвы | 27 | 3 | 30 |
| Дерматиты | 1 | 2 | 3 |
| Пододерматиты | 6 | 6 | |
| Абсцессы | 3 | 2 | 5 |
| Артриты | 6 | 6 | |
| Итого: | 46 | 10 | 56 |
Результаты диспансеризации показали (таблица 2), что наибольшую распространенность в данном хозяйстве имеет ортопедическая патология 46 голов (24,74%), из них 27 голов язвенные процессы в области пальцев (41,3%). Пододерматиты и артриты суставов пальцев по 6 голов (13,04%), как правило, эти заболевания чаще всего носят характер хронических процессов и являются осложнениями первичных поражений мягких тканей в области пальцев. Первичными поражениями могут быть раны, язвы, дерматиты, которые выявлены у 31 голов, что составляет 67% от общего числа выявленной патологии в области пальцев. Таким образом, общее количество животных с гнойно-некротическими процессами выявленных диспансерными исследованиями составляет 56 голов или 30,1% от общего числа исследованных животных. Гнойно-воспалительные процессы мягких тканей с учетом поражений в области пальцев составляют 44 головы (23,65%). Воспаления основы кожи и суставов 12 голов (6,45%).
Проведенными исследованиями установлено, что заживление гнойно-некротических процессов у контрольной группы животных по дням составляло 22,2 ± 0,57суток, в опытной группе, где для лечения применяли Биопаг-Д, составляло 16,04 ± 0,53. Таким образом, применение Биопаг-Д способствует ускорению заживления гнойно-некротических процессов, по сравнению с контрольной группой, на 6,16 дней (таблица 3).
Таблица 3 Результаты лечения коров с гнойно-некротическими процессами в области пальцев
| № группы ( n = 15) | Способ лечения | Сроки лечения, дней М ± м |
| 1 | Порошок по прописи Плахотина М.В., ватно-марлевая повязка. | 22,2 ± 0,57 |
| 2 | Биопаг -Д порошок по прописи Плахотина М.В., ватно-марлевая повязка. | 16,04 ± 0,53 |
2.2.2 Влияние Биопаг-Д на заживление экспериментальных ран у крупного рогатого скота
Проведенные исследования в данной серии опытов, показали, что аппликации экспериментальных ран крупного рогатого скота Биопаг–Д, ускоряет очищение ран от мёртвых тканей, на фоне клинически выраженной воспалительной реакции, при умеренной фибринозно-серозной экссудации. На третьи сутки клинически, гистологически и гистохимически выявляется формирование грануляционной ткани. Полное очищение ран и формирование полноценного грануляционного барьера на фоне применения Биопаг–Д, завершается на седьмые сутки.
В контрольных ранах апплицированных 0,5% раствором новокаина бледно-розовые крупнозернистые грануляции появляются на 5-7 сутки. Гистологическая и гистохимическая структура их на 14 сутки приблизительно аналогична таковой на 7 сутки при применении Биопаг–Д. В последующие сроки, начиная с 7-го дня обработка ран раствором Биопаг–Д, ускоряет заполнение ран грануляционной тканью и процесс эпидермизации.
Последняя обработка ран Биопаг–Д проводилась на 14 сутки, в последующие сроки раны заживали под струпом, полная эпителизация ран завершалась у контрольных ран на 35-37 сутки, опытных на 28-30-е сутки.
Таким образом, проведенные исследования показали, что применение Биопаг-Д благоприятно, по данным клинических, гистологических и гистохимических исследований влияет на очищение ран и регенеративно-восстановительные процессы. Полная эпителизация ран завершалась у контрольных ран на 35-37 сутки, опытных на 28-30-е сутки. Использование Биопаг-Д при заживлении экспериментальных ран у крупного рогатого скота сокращает сроки заживления в среднем на 7 дней.
2.2.3 Гематологические показатели у бычков при раневом процессе. Проведенные исследования в данной серии опытов позволяют сделать следующее заключение, что гематологические показатели претерпевают значительные изменения по ходу заживления ран. Так количество эритроцитов, с 3-х суток по 21-е сутки имеет тенденцию к снижению, колебаниями в сторону нижнего уровня снижения на 7-е и некоторого повышения и 14-е сутки. Показатели гемоглобина за весь период исследований имеют стабильную тенденцию к снижению, самый низкий показатель отмечается на седьмые сутки, на 14 сутки отмечается некоторое повышение и к 21 суткам повторное снижение. Цветной показатель по сравнению с исходными данными имеет тенденцию к повышению, самый высокий показатель отмечается на 7 сутки, затем понижение к 14 суткам и некоторое повышение к 21 суткам. Колебания количества лейкоцитов также значительные, отмечается их увеличение на 3-и сутки, а затем тенденция к снижению к сроку завершения исследований. Количество эозинофилов по сравнению с исходными данными, значительно снижается, пик которого приходится на 14-е сутки, затем повышение к 21-м суткам. Отмечаются значительные колебания количества палочкоядерных нейтрофилов, резкое увеличение их к 3-м суткам, резкое их уменьшение вплоть до 14 суток, и некоторый рост к 21 суткам. Наблюдается общая тенденция к снижению количества сегментоядерных нейтрофилов от исходных показателей до окончания этой серии опытов. Что касается исследования лимфоцитов, наблюдается определенная направленность их повышения от исходных показателей до завершающего дня исследований к 21 суткам. Определенная закономерность наблюдается и при исследовании количества моноцитов, так их количество по сравнению с исходными данными неуклонно увеличивается до 14-х суток и уменьшение к концу опытов. Закономерность наблюдается и при исследовании показателя реакции оседания эритроцитов, этот показатель по сравнению с исходными данными, к концу опытов значительно выше, но отмечался его некоторый спад в сторону уменьшения к 14 суткам.
2.2.4 Биохимические показатели крови у бычков при раневом процессе. Проведенные биохимические исследования крови позволили установить, что после кастрации у бычков происходят значительные изменения этих показателей, так содержание общего белка в крови резко повышается на третий день после кастрации, затем отмечается его некоторое снижение на 7 и 14 дни и повторное повышение на 21 сутки. Концентрация глюкозы имеет постоянную тенденцию к повышению от исходного показателя вплоть до 21дня. Содержание витаминов А и Е имеют тенденцию к повышению в сравнении с исходными показателями, при некотором снижении их уровня на 7 сутки, а затем их дальнейшее увеличение до 21 суток. Содержание мочевины по сравнению с исходным показателем равномерно снижается до 14 суток,
Таблица 4 Морфологические показатели крови у бычков при раневом процессе
| Показатели: | Результаты исследований: | |||||||||||||||||||
| До кастрации | 3 сутки | 7 сутки | 14 сутки | 21 сутки | ||||||||||||||||
| M | m | M | m | M | m | M | m | M | m | |||||||||||
| Эритроциты, 10/л | 7,50 | ± | 0,76 | 7,49 | ± | 0,93 | 4,76 | ± | 0,23 | * | 6,56 | ± | 0,24 | * | 5,74 | ± | 0,37 | * | ||
| Гемоглобин, г/л | 123,00 | ± | 1,41 | 120,20 | ± | 3,32 | * | 112,60 | ± | 2,28 | * | 115,20 | ± | 5,32 | * | 113,20 | ± | 5,02 | * | |
| Цветной показатель, | 4,52 | ± | 0,68 | 4,94 | ± | 0,44 | * | 7,04 | ± | 0,30 | * | 5,20 | ± | 0,13 | * | 5,84 | ± | 0,37 | ||
| Лейкоциты 109 /л | 20,48 | ± | 2,96 | 23,44 | ± | 6,29 | * | 9,62 | ± | 0,51 | ** | 11,52 | ± | 2,03 | * | 9,16 | ± | 0,69 | * | |
| Эозинофилы, % | 2,40 | ± | 0,57 | 0,60 | ± | 0,67 | * | 0,60 | ± | 0,67 | 0,20 | ± | 0,22 | 1,40 | ± | 0,57 | * | |||
| Нейтрофилы палоч, % | 3,20 | ± | 0,96 | 8,40 | ± | 7,49 | * | 1,60 | ± | 1,10 | * | 0,20 | ± | 0,22 | 0,80 | ± | 0,42 | |||
| Нейтрофилы сегмент, % | 49,40 | ± | 6,48 | 37,00 | ± | 6,43 | * | 41,80 | ± | 5,41 | * | 23,40 | ± | 4,67 | ** | 21,80 | ± | 2,43 | * | |
| Лимфоциты, % | 42,00 | ± | 5,04 | 48,20 | ± | 11,98 | * | 47,00 | ± | 5,40 | 66,20 | ± | 5,78 | * | 69,20 | ± | 3,90 | * | ||
| Моноциты, % | 3,00 | ± | 1,12 | 5,80 | ± | 2,27 | 9,00 | ± | 3,28 | * | 10,00 | ± | 3,34 | * | 6,80 | ± | 2,16 | ** | ||
| Оседание эритроцитов, мм/ч (РОЭ) | 4,00 | ± | 1,06 | 4,80 | ± | 0,96 | * | 6,40 | ± | 1,79 | * | 4,40 | ± | 1,04 | * | 9,00 | ± | 2,29 | ** | |
При Примечание * * p<0,01;
* p<0,05.
Таблица 5 Показатели биохимического анализа крови у бычков при раневом процессе
| Показатели: | Результаты исследований | ||||||||||||||||||||||
| До кастрации | 3 сутки | 7 сутки | 14 сутки | 21 сутки | |||||||||||||||||||
| M | m | M | m | M | m | M | m | M | m | ||||||||||||||
| Общий белок, г% | 6,10 | ± | 0,11 | 6,86 | ± | 0,21 | * | 6,72 | ± | 0,15 | 6,70 | ± | 0,28 | 6,78 | ± | 0,19 | |||||||
| Глюкоза, ммоль/л | 1,76 | ± | 0,51 | 1,86 | ± | 0,18 | 1,92 | ± | 0,14 | 1,96 | ± | 0,06 | 1,98 | ± | 0,07 | ||||||||
| Витамин А, мг% | 32,36 | ± | 22,73 | 39,20 | ± | 5,61 | * | 24,20 | ± | 2,41 | ** | 44,60 | ± | 6,52 | ** | 57,40 | ± | 8,19 | * | ||||
| Витамин Е, мг% | 0,02 | ± | 0,02 | 0,33 | ± | 0,07 | ** | 0,23 | ± | 0,12 | 0,46 | ± | 0,12 | 0,74 | ± | 0,10 | * | ||||||
| Мочевина, ммоль/л | 4,83 | ± | 0,17 | 3,74 | ± | 0,34 | * | 3,30 | ± | 0,29 | * | 2,75 | ± | 0,06 | * | 3,39 | ± | 0,36 | * | ||||
| Креатинин, мкмоль/л | 67,85 | ± | 8,65 | 77,30 | ± | 4,56 | * | 74,04 | ± | 3,36 | 50,48 | ± | 1,50 | * | 88,22 | ± | 3,41 | * | |||||
| Билирубин, общиймг% | 10,36 | ± | 0,74 | 12,54 | ± | 0,35 | * | 11,26 | ± | 0,25 | * | 9,18 | ± | 0,26 | * | 11,72 | ± | 0,72 | * | ||||
| Холестерин, моль/л | 4,31 | ± | 0,38 | 3,92 | ± | 0,41 | * | 3,71 | ± | 0,31 | 4,19 | ± | 0,25 | * | 2,75 | ± | 0,38 | * | |||||
| Y-ГГТ, нкат/л | 15,68 | ± | 0,92 | 13,28 | ± | 0,63 | * | 10,72 | ± | 1,88 | * | 15,60 | ± | 4,43 | * | 14,50 | ± | 0,97 | * | ||||
| АЛТ, нкат/л | 28,50 | ± | 2,62 | 15,60 | ± | 5,75 | 13,98 | ± | 5,15 | 19,42 | ± | 6,34 | * | 31,12 | ± | 1,67 | * | ||||||
| AST нкат/л | 43,72 | ± | 5,13 | 31,80 | ± | 8,28 | * | 29,76 | ± | 7,56 | * | 18,96 | ± | 5,56 | * | 39,76 | ± | 8,30 | ** | ||||
| Щелочная фосфатаза, нкат/л | 247,70 | ± | 32,07 | 216,92 | ± | 10,48 | 213,52 | ± | 9,79 | 87,84 | ± | 19,96 | ** | 263,70 | ± | 49,62 | ** | ||||||
| -амилаза, ед,л | 45,70 | ± | 5,21 | 29,64 | ± | 2,71 | * | 83,30 | ± | 61,19 | * | 45,74 | ± | 4,79 | * | 22,66 | ± | 1,97 | * | ||||
| Триглицериды, моль/л | 0,00 | ± | 0,00 | 1,73 | ± | 0,88 | 1,70 | ± | 0,87 | 0,28 | ± | 0,21 | * | 0,24 | ± | 0,08 | |||||||
Прим Примечание * * p<0,01;
* p<0,05.
затем к 21 суткам отмечается его некоторое повышение. Уровень креатинина и билирубина, определяется некоторой цикличностью, повышение показателей к третьим суткам, некоторый спад на 7 сутки, на 14 сутки понижение ниже уровня исходных показателей и повышение к 21 дню.
Концентрация холестерина после кастрации имеет определённую цикличность, отмечается его снижения ниже уровня исходного показателя до 7 суток, затем увеличение к 14 суткам, и спад к 21 дню до самого нижнего уровня. Содержание Y-ГГТ после кастрации проявляется цикличностью показателей, вначале спад ниже уровня исходных показателей к 7 суткам, затем увеличение к 14 суткам, и новое снижение уровня к 21 суткам.
Количество АЛТ после кастрации, характеризуется неизменным снижением, по сравнению с исходными данными до седьмых суток, затем неуклонным ростом до 21дня. Что касается уровня АСТ, отмечается его равномерное снижение по сравнению с исходными показателями до 14 суток, затем резкое увеличение к 21 суткам после кастрации. Уровень щелочной фосфатазы после кастрации проявляется его значительным снижением ниже исходного показателя до 14 дня, затем его резким повышением к 21 суткам, превышающим даже показатели до кастрации.
Содержание - амизалы на третий день после кастрации проявляется снижением его уровня, по сравнению с исходными данным, затем резким повышением на 7 сутки и постепенным уменьшением на 14 и 21 сутки.
Триглицериды до кастрации у бычков не выявляются, на третий день после кастрации отмечается высокий их уровень, который сохраняется до 7 суток, к 14 суткам отмечается резкое снижение их уровня, которое сохраняется до 21 суток.
2.2.5 Показатели иммунного статуса у крупного рогатого скота при раневом процессе. После кастрации и развития на его фоне раневого процесса, у животных на 3-сутки отмечается резкое снижение иммунологических показателей, по сравнению с исходными данными до кастрации: лимфоцитов на 69,9%; Т-лимфоцитов на 15,4%; Т-активных лимфоцитов на 7%; фагоцитоза с латексом на 12,7%; содержание иммуноглобулина А понизилось в 3,3 раза; содержание иммуноглобуллина М снизилось в 4,2 раза; понижение иммуноглобулина G составило 2,54%. Такой же низкий уровень этих показателей сохранялся и на седьмые сутки, к 14 суткам наметилось повышение уровня этих показателей. К 21 суткам развития раневого процесса у крупного рогатого скота, показатели иммунного статуса во многом соответствуют исходным, или близки к ним.
2.2.6 Состояние обмена макро и микроэлементов при раневом процессе у крупного рогатого скота. Проведенные биохимические исследования крови по содержанию макро и микроэлементов показали, что при раневом процессе у крупного рогатого скота, происходит увеличение содержания в крови только общего кальция, к 3-им суткам это увеличение составило 28,4%, такой же высокий уровень его содержания сохранялся на 14 и 21 сутки. В то время как содержание других макро и микроэлементов только
Таблица 6 Показатели иммунограммы у крупного рогатого скота при раневом процессе
| Показатели: | Результаты исследований | ||||
| До кастрации | 3 сутки | 7 сутки | 14 сутки | 21 сутки | |
| M ± m | M ± m | M ± m | M ± m | M ± m | |
| Лейкоциты, х109/л | 7.30 ± 0,25 | 7,22 ± 0,23 | 7,34 ± 0,39 | 6,48 ± 0,49* | 8,02 ± 0,23** |
| Лимфоциты, % | 46,20 ± 1,88 | 17,60 ± 0,76** | 17,46 ± 0,75 | 30,60 ± 5,79** | 43,2 ± 5,80* |
| Т-лимфоциты (Е-РОК), % | 71,60 ± 2,28 | 60,60 ± 2,17* | 60,40 ± 1,20 | 60,20 ± 3,07 | 69,2 ± 3,21* |
| Т-активные лимфоциты, % | 31,40 ± 1,44 | 29,20 ± 1,47* | 27,20 ± 1,85* | 28,80 ± 1,60* | 21,4 ± 1,99* |
| Фагоцитоз с латексом | 69,20 ± 1,29 | 60,40 ± 2,28* | 60,20 ± 1,48 | 61,40 ± 4,22 | 66,6 ± 1,26* |
| Иммуноглобин А, г/л | 4,22 ± 0,11 | 1,260 ± 0,07*** | 1,21 ± 0,06 | 2,28 ± 0,53** | 2,76 ± 0,36* |
| Иммуноглобин М, г/л | 8,06 ± 6,14 | 1,90 ± 0,12*** | 1,84 ± 0,19 | 1,80 ± 0,14 | 1,90 ± 0,094 |
| Иммуноглобин G, г/л | 18,08 ± 0,29 | 17,62 ± 0,39 | 17,30 ± 0,49 | 17,30 ± 0,89 | 18,2 ± 0,42* |
| Иммуноглобулин Е общий, МЕ/мл | 49,20 ± 2,56 | 50,00 ± 6,37* | 54,00 ± 3,30* | 46,80 ± 6,35* | 46,4 ± 4,18 |
| Циркулирующие иммунные комплексы, Ед. | 44,00 ± 2,37 | 44,00 ± 6,04 | 49,80 ± 1,48* | 39,80 ± 12,24* | 54,0 ± 2,03** |
| С-реактивный белок (СРБ), мг/л | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. |
| Антистрептолизин – О (АСЛО), МЕ/мл | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. |
| Ревмотоидный фактор (РФ), отриц. | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. | отриц. |
Примечание: * p<0,05
** p<0,01
***р<0,01
лишь снижалось, резкое снижение этих показателей приходилось на третьи сутки после кастрации (для всех показателей р <0,05), при этом низкий уровень
этих показателей с небольшими колебаниями сохранялся до 21 суток после кастрации.
2.2.7 Влияние Биопаг–Д на клинические и микробиологические показатели кастрационных ран.
Поведенные клинические исследования, по местному применению раствора Биопаг-Д, приготовленного на 0,5% -ном растворе новокаина, в качестве антисептического раствора, для обработки операционного поля при кастрационных ранах, в сравнении с традиционно используемым 10%-ным спиртовым раствором йода, показали его более выраженные противовоспалительные свойства и более благоприятное влияние на течение раневого процесса кастрационных ран у крупного рогатого скота, и сокращения сроков их заживления. При применении Биопаг-Д нормализация воспалительной реакции происходит к седьмым суткам, что проявляется уменьшением припухлости, болезненности, снижения местной температуры. В контрольных ранах, где в качестве антисептика применяли 10%-ный спиртовой раствор йода нормализация воспалительной реакции проявляется только к 14 суткам. В опытных ранах полное заживление, происходит на 28 сутки, в контрольных ранах заживление ран завершается на 35 сутки. Таким образом, местное применение Биопаг–Д в качестве антисептика, сокращает сроки заживления кастрационных ран на 7 дней.
Микробиологические исследования на обсеменность E.coli, на агаре Эндо, показали, что у контрольных бычков, раны которых обрабатывались 10%-ным спиртовым раствором иода, отмечалась высокая обсеменность E.coli, число КОЕ их составляло от 68% до 100%. При этом у опытных телят, раны которых обрабатывались раствором Биопаг-Д, приготовленном на 0,5% растворе новокаина показатель КОЕ, был значительно ниже чем у контрольных ран и составляли от 12% до 52%, такое соотношение сохранялось с небольшими колебаниями на 3, 7, 14 дни после кастрации.
При исследовании ран на наличие стрептококков и стафилококков, на МПА, всех трех контрольных бычков, раны которых обрабатывались 10% спиртовым раствором иода, отмечалось наличие в ранах сразу после обработки стрептококков и стафилококков, у двух бычков она была очень высокой, число КОЕ у одного бычка составляло 100%, у второго 80% и третьего 5%.
У опытных бычков сразу же после обработки ран раствором Биопаг-Д, приготовленном на 0,5% растворе новокаина, из трех телят только у одного бычка обнаруживалось обсеменение стрептококками и стафилококками, при этом число КОЕ составляло 45%. Сразу после кастрации в ранах обработанных Биопаг-Д, стафилококки и стрептококки не обнаруживались. В последующие дни на 3, 7, 14, 21 дни после кастрации по показателям числа КОЕ, обсемененность опытных ран была значительно ниже (от 5% до 60%, колебания по дням исследований), чем контрольных от 60% до 100%), обработанных традиционно – спиртовым раствором иода.
Исследование на агаре Плоскирева выявляющее наличие P. Vulgaris в ранах, так же показало более выраженное бактерицидное действие Биопаг-Д. При этом максимальное число КОЭ у контрольных ран 100% по P. Vulgaris выявляется на седьмой день после кастрации, эти показатели у опытных ран составляют от 5 до 50% на этот день. Высокая обсемененность контрольных ран сохраняется и на 14 день после кастрации, число КОЕ составляет от 68 до 100%, в то время в опытных ранах оно составляет от 16% до 50%.
Таким образом, приведенные микробиологические исследования показали более выраженное пролонгированное бактерицидное действие
Биопаг -Д, по сравнению с традиционной обработкой послекастрационных ран растворами иода, в отношении стафилококков, стрептококков, E.coli, P. Vulgaris, что уменьшает риск послекастрационных воспалительных осложнений, создает благоприятные условия течения раневого процесса и сокращает сроки заживления кастрационных ран на 7 дней.
Экономический ущерб
Суточный удой здоровых коров в исследованном хозяйстве составляет 14,31±0,40 литров, суточный удой больных коров составляет 6,23±0,35 литров, таким образом, ежедневные потери молока больных коров составляют 8,08 литров молока.
Расчеты ущерба по потерям молока по контрольной группе показывают, что в этой группе сроки выздоровления наступили на 22, 2 день лечения.
У= 15 х (14,31- 6,23) х 22,2 х 12 =32288 руб.
Ущерб только от потерь молока в контрольной группе составил 32288 руб.
Расчеты ущерба по потерям молока по опытной группе показывают, что в этой группе сроки выздоровления наступили на 16,6 день лечения.
У= 15 х (14,31- 6,23) х 16,6 х 12 =24143 руб.
Таким образом, предотвращенный ущерб, только от сокращений сроков выздоровления за счет применения Биопаг-Д в опытной группе составил 8145 руб.
ВЫВОДЫ
1. Распространенность гнойно-некротических процессов в исследуемом хозяйстве составила 30,1% от общего числа исследованного поголовья. Среди гнойно-некротических процессов 24,74%, составила ортопедическая патология, 5,37% гнойно-воспалительные процессы мягких тканей других областей тела животных.
2. Суточный удой здоровых коров в исследованном хозяйстве составляет 14,31±0,40 литров, суточный удой больных коров составляет 6,23±0,35 литров, ежедневные потери молока больных коров составляют 8,08 литров молока.
3. Клиническими, гистологическими и гистохимическими исследованиями установлено, что местное применение Биопаг–Д, сокращает сроки заживления экспериментальных ран в среднем на 7 дней.
4. Биохимические изменения в крови при заживлении кастрационных ран характеризуются тремя видами трансформаций показателей: а) увеличения содержания по ходу заживления по сравнению с исходными данными общего белка, глюкозы, витаминов А, Е, креатинина; б) снижения содержания по сравнению с исходными показателями в течение всего периода заживления ран – мочевины, холестерина; в) колебаниями содержания в сторону уменьшения или увеличения по сравнению с исходными показателями АЛТ, АСТ, щелочной фосфатазы.
5. После кастрации у животных на 3-сутки отмечается резкое снижение иммунологических показателей, по сравнению с исходными данными до кастрации: лимфоцитов на 69,9%; Т-лимфоцитов на 15,4%; Т-активных лимфоцитов на 7%; фагоцитоза с латексом на 12,7%; содержание иммуноглобулина А понизилось в 3,3 раза; содержание иммуноглобуллина М снизилось в 4,2 раза; понижение иммуноглобулина G составило 2,54%, снижение уровня этих показателей сохраняется и к седьмым суткам. К 21 суткам развития раневого процесса у крупного рогатого скота, показатели иммунного статуса во многом соответствуют исходным, или близки к ним.
6. Исследования содержания макро и микроэлементов при раневом процессе у крупного рогатого скота показали, что происходит увеличение содержания в крови только общего кальция, к 3-им суткам это увеличение составило 28,4%, такой же высокий уровень его содержания сохранялся на 14 и 21 сутки. В то время как содержание других макро и микроэлементов только лишь снижались, резкое снижение этих показателей приходилось на третьи сутки после кастрации ( для всех показателей р<0,05), при этом низкий уровень этих показателей сохранялся до 21 суток после кастрации.
7. Проведенные клинические и микробиологические исследования при кастрационных ранах у бычков показали выраженное пролонгированное бактерицидное действие Биопаг-Д, по сравнению с традиционной обработкой операционного поля и послекастрационных ран растворами иода в отношении стафилококков, стрептококков, E.coli, P. Vulgaris, что уменьшает риск послекастрационных воспалительных осложнений и сокращает сроки заживления кастрационных ран на 7 дней.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Практические предложения вошли в рекомендации «По диагностике, лечению и профилактике болезней в области пальцев у крупного рогатого скота», утвержденными НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИМ СОВЕТОМ МИНСЕЛЬХОЗА РБ секции по современным технологиям в животноводстве протокол №1 от 3 ноября 2010 года.
Для лечения ран и других гнойно-некротических процессов нами рекомендовано после первичной хирургической обработки, первой фазе раневого процесса применять раствор Биопаг-Д в разведении 1:1 с 0,5% раствором новокаина.
Биопаг-Д в разведении 1:1 с 0,5% ным раствором новокаина применять в качестве антисептика для обработки операционного поля при кастрациях.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Публикации соискателя в изданиях, рекомендованных ВАК РФ
1. Гимранов, В.В. Состояние иммунного статуса у крупного рогатого скота при раневом процессе [Текст] / В.В.Гимранов, И.З. Юсупов// Известия Оренбургского ГАУ.- 2011.- №2(30).-С.81-82.
2. Гимранов, В.В. Адаптация коров импортной селекции к условиям Республики Башкортостан [Текст] / В.В. Гимранов, Р.А. Утеев, И.З.Юсупов// Вестник Башкирского ГАУ.-2012.-№3.-С.26-28.
Публикации соискателя в других изданиях:
3. Гимранов, В.В. Влияние Биопаг-Д на заживление ран у крупного рогатого скота [Текст] /В.В. Гимранов, И.З.Юсупов//Научное обеспечение инновационного развития АПК. Материалы Всероссийской науч.-практ. конференции в рамках ХХ-ой Юбилейной специализированной выставки «Агрокомплекс – 2010».- Уфа.- 2010.-С.185-186.
4. Гимранов, В.В. Клинико-морфологические показатели раневого процесса у бычков при кастрационных ранах [Текст]/ В.В. Гимранов, И.З.Юсупов//Состояние, проблемы и перспективы развития АПК. Материалы международной научно-практический конференции, посвященной 80-летию ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ.-Уфа: ФГОУ ВПО БГАУ.- 2010.-С. 92-95.
5. Гимранов, В.В. Динамика обмена макро- и микроэлементов у крупного рогатого скота при раневом процессе [Текст] / В.В. Гимранов, И.З.Юсупов// Материалы Всероссийской науч.-практ. конференции в рамках ХХI Международной специализированной выставки «Агрокомплекс-2011».- Уфа, БГАУ.-2011.-С.79-81.
6. Гимранов, В.В. Показатели иммунного статуса у крупного рогатого скота при кастрационных ранах [Текст] /В.В. Гимранов, И.З.Юсупов // Вестник молодых ученых Республики Башкортостан.-2011.- №2.-С.64-67.
7. Гимранов, В.В. Состояние обмена макро и микроэлементов при раневом процессе у крупного рогатого скота [Текст] /В.В. Гимранов, И.З.Юсупов // Мат. междун. науч-практич. конференции. Ветеринарная медицина ХХ1 века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения/Ульяновск.-2011.-С.116-118.
8. Гимранов, В.В. Биохимические показатели крови при раневом процессе у крупного рогатого скота [Текст] /В.В. Гимранов, И.З.Юсупов // Мат. междун. науч. конференции. Актуальные проблемы ветеринарной хирургии.-Ульяновск.-2011.-С.43-49.
9. Гимранов, В.В. Проблемы адаптации коров импортной селекции к условиям республики Башкортостан [Текст] /В.В. Гимранов, И.З.Юсупов, Р.А.Утеев // Мат. Всероссийской науч.-практ. конференции 13-15 декабря 2011. Научное обеспечение устойчивого развития АПК. -Уфа, БГАУ.- 2011.- С.112-116.
10. Гимранов, В.В. Состояние адаптации коров голштино-фризской породы импортной селекции в условиях республики Башкортостан [Текст] / В.В. Гимранов, И.З.Юсупов // Ученые Записки УО Витебской ГАВМ.-2011.-т.47 вып.2ч. 1.- С.254-256.
Рекомендации
1. Гимранов, В.В. Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике болезней в области пальцев у крупного рогатого скота [Текст] /В.В.Гимранов, Р.А. Утеев, А.Ф. Гилязов, И.З. Юсупов//Рассмотрено и рекомендовано Научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства Республики Башкортостан (протокол №1 от 10 ноября 2011).-Уфа: БГАУ.-2012.-28с.
Лицензия на издательскую деятельность № 0261 от 10 апреля 1998. Подписано в печать ___ апреля 2013г. Формат 60 х 84 1/16. Бумага типографская. Гарнитура Таймс. Усл. печ. л.____Усл. изд. л._____Тираж 100 экз. Заказ №___
Издательство Башкирского государственного аграного университета. Типография Башкирского государственного аграрного университета. Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34
