Диагностика, лечение и профилактика гепатоза у телят, сопровождающегося миокардиодистрофией
На правах рукописи
Шумилин Юрий Александрович
ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА
ГЕПАТОЗА У ТЕЛЯТ, СОПРОВОЖДАЮЩЕГОСЯ
МИОКАРДИОДИСТРОФИЕЙ
16.00.01 — диагностика болезней и терапия животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Воронеж 2007
Работа выполнена на кафедре терапии, клинической диагностики
и радиобиологии ФГОУ ВПО «Воронежский государственный
аграрный университет им. К.Д. Глинки»
Научный руководитель: доктор ветеринарных наук
Никулин Иван Алексеевич
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук
Самотин Анатолий Митрофанович
кандидат ветеринарных наук
Прасолов Алексей Алексеевич
Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова»
Защита состоится «24» мая 2007 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 006. 004. 01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии по адресу:
394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-б.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии.
Автореферат разослан «_____» апреля 2007 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета Ермакова Т.И.
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Гепатоз крупного рогатого скота является одной из сложных проблем, стоящих перед ветеринарной наукой и практикой.
В большинстве случаев это заболевание имеет сложную этиологическую структуру и проявляется в форме тяжелых патологических процессов, приводящих к ухудшению воспроизводительной способности животных и качества производимой продукции, сокращению сроков производственного использования коров, снижению молочной продуктивности на 15-26%, уменьшению прироста живой массы на 10-15%, повышению затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий.
Решению данной проблемы за счет правильной и своевременной корректировки технологий и рационов, контроля за качеством кормов и содержанием животных, введения препаратов целенаправленного действия посвящены научные изыскания многих отечественных и зарубежных ученых (В.С.Постников, 1964-1990; Б.В.Уша, 1965-1999; Д.Я.Луцкий, 1969-1980; Н.И.Кузнецов, 1969-2004; А.В.Жаров, 1970-1990; С.М.Сулейманов, 1982; В.Н.Байматов, 1986-1990; И.Ф.Хазимухаметова, 1986-2001; А.М.Самотин 1987-2002; И.А.Никулин, 1991-2006; Ю.Н.Алехин, 1992-2001; E.Blaser, 1987; I.A.Acorda, H.Yamada, S.M.Glamasari, 1995; U.Johannsen, M.Schafer, A.Uhlig, 1988; J.Klein, J.Kucerova, 1998; A.Pechova, J.Inek, I.Pavlata, 2002).
Вместе с тем, некоторые стороны патогенеза, диагностики и лечения гепатоза нуждаются в дальнейшем изучении, особенно во взаимосвязи с иммунным статусом, функциональным состоянием органов и систем организма животных, оставшихся без достаточного количества пластических и энергетических ресурсов, необходимых для нормальной работы.
Цель и задачи исследований. Цель – усовершенствовать методику диагностики гепатоза и миокардиодистрофии у новорожденных телят и изучить лечебно-профилактическую эффективность пуриветина при данной патологии.
Для достижения цели поставлены следующие задачи:
- Изучить распространённость и этиопатогенетические факторы возникновения гепатоза у новорожденных телят.
- Разработать иммунологические тесты для прижизненной диагностики гепатоза у крупного рогатого скота.
- Выявить взаимосвязь между функциональным состоянием печени и сердца у телят при гепатозе и усовершенствовать методику диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят.
- Выявить лечебную и профилактическую эффективность пуриветина при гепатозе телят и отработать оптимальную дозу.
Научная новизна и теоретическая значимость. Определены иммунологические показатели крови у здоровых и больных гепатозом новорожденных телят симментальской породы. Разработан способ приготовления эритроцитарного диагностикума (патент на изобретение №2280867) для выявления уровня свободно циркулирующих в крови антител к тканям печени.
Изучены электрокардиографические показатели у здоровых и больных миокардиодистрофией телят и на этой основе предложен способ электрокардиографической диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят (патент на изобретение №2292840).
Отработана оптимальная профилактическая и лечебная дозы комплексного препарата пуриветин при гепатозе новорожденных телят, осложненном миокардиодистрофией, и проведено его внедрение в клиническую практику.
Практическая значимость работы. Расширено представление о патогенезе гепатоза у крупного рогатого скота. Установлены иммунологические тесты для диагностики гепатоза у сухостойных коров и новорожденных телят. Выявлены форма электрокардиографической кривой в сагиттальных отведениях и величина зубцов и интервалов электрокардиограммы здоровых телят и при миокардиодистрофии. Разработан способ диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят. Предложена схема применения пуриветина в комплексной терапии новорожденных телят при гепатозе сопровождающемся миокардиодистрофией.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены на Сибирском международном ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2005); межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых «Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки» (Воронеж, 2005); международной научно-практической конференции, посвященной 75-летию УГАВМ «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Троицк, 2005); международной научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы диагностики, терапии и профилактики болезней животных» (Воронеж, 2006); международной научно-производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А. «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006), а также ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава Воронежского ГАУ (2004-2007г).
Публикация результатов исследования. По теме диссертации
опубликовано 9 работ.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Диагностические тесты для выявления гепатоза у крупного рогатого скота.
2. Функциональное состояние сердца при гепатозе телят.
3. Диагностика миокардиодистрофии у новорожденных телят.
4. Лечебная и профилактическая эффективность пуриветина при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 161 странице компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методики исследований, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 200 источников, в том числе 24 на иностранных языках и приложений. Работа иллюстрирована 24 таблицами и 39 рисунками.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
Данная работа является частью исследований кафедры терапии, клинической диагностики и радиобиологии Воронежского ГАУ по теме №8 «Разработать и внедрить научно обоснованные экологически безопасные методы диагностики, лечения и профилактики массовых болезней животных в условиях ЦЧЗ». Госрегистрация №8.01.200.1.003994.
Опытно-производственные и лабораторные исследования по решению поставленных в работе задач осуществляли в 2003-2006 г. в условиях
СХА «Никольская» Таловского района Воронежской области и на Опытной станции ВГАУ. Лабораторные анализы проводились на базе кафедры терапии, клинической диагностики и радиобиологии ВГАУ, лаборатории Воронежской ОКБ. Гистологические исследования выполнены на базе НУЗ «Дорожная клиническая больница на ст. Воронеж-1 ОАО РЖД» совместно с заведующим патологоанатомическим отделением Лейбович Б.Е.
Материалом для исследования послужили 180 телят с рождения и до месячного возраста и 50 коров симментальской породы.
Были изучены клинический статус, морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови сухостойных коров при гепатозе и полученных от них телят 1-3 дневного возраста.
С целью изучения лечебной эффективности пуриветина при гепатозе
в СХА «Никольская» был проведен научно-производственный опыт на 40 новорожденных телятах. Больных животных распределили на 4 группы: контрольную и три опытные (n=10).
Телята контрольной группы содержались на общехозяйственном рационе и получали лечение, принятое в хозяйстве: голодная диета с применением отваров лекарственных трав (зверобой, кора дуба), антибактериальные препараты (дитрим) и регидратационные средства (внутривенно раствор глюкозы). Животные 1, 2 и 3 опытных групп с 1-2 дня жизни, кроме лечения, принятого в хозяйстве, дополнительно к основному рациону, один раз в сутки в течение 20 дней получали пуриветин по схеме: первые 5 дней 80, 40 и 20 мг/кг, следующие 5 дней 60, 30 и 15 мг/кг и последние 10 дней 40, 20 и 10 мг/кг массы тела соответственно по группам.
Пуриветин представляет собой сыпучий порошок светло-бежевого цвета. В его состав входят пурины (инозин), метилурацил, кобамамид (коферментная форма витамина В12), аскорбиновая кислота (витамин С), фруктозо-1,6-дифосфат кальция (ФДФ), лимонная кислота. Фармакологические свойства препарата определяются совокупностью свойств входящих в него компонентов.
Изучение профилактической эффективности пуриветина проведено на 40 условно клинически здоровых новорожденных телятах, принадлежащих Опытной станции ВГАУ, из которых сформировали 4 группы: контрольную и три опытные (n=10).
Животные контрольной группы выращивались по общепринятой схеме хозяйства. Телята опытных групп с 1-2 дня жизни дополнительно к основному рациону, один раз в сутки в течение 20 дней получали с кормом пуриветин в дозе 10, 20 и 40 мг/кг массы тела соответственно.
Производственное испытание пуриветина было проведено на 100 телятах. С профилактической целью новорожденным телятам (n=25) препарат назначали с 1 по 20 день жизни в оптимальной дозе — 20мг/кг массы тела.
С лечебной целью пуриветин назначали новорожденным телятам (n=25) в оптимальной дозе по схеме: первые 5 дней 40мг/кг, следующие 5 дней 30 мк/кг и последние 10 дней 20мг/кг массы тела. Животные контрольных групп (n=50) выращивались по общепринятой схеме хозяйства.
Во всех научно-производственных опытах за подопытными животными в период эксперимента было установлено клиническое наблюдение, в начале и конце опыта проводили взвешивание телят и брали пробы крови (n=4) для морфологических, биохимических и иммунологических исследований.
Клинические исследования новорожденных телят проводили согласно общепринятому в ветеринарии плану (А.М. Смирнов, Л.Я. Конопелько, 1988).
Пробы крови брали в начале и в конце опыта из яремной вены утром до кормления животных. В крови определяли СОЭ, содержание эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов по общепринятым методикам.
В сыворотке крови коров и телят определяли: общий белок - рефрактометрически; общие иммуноглобулины - 18% раствором сульфата натрия; активность аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и -глютаминтранспептидазы (ГГТП) - с помощью реактивов фирмы «Лахема»; циркулирующие иммунные комплексы определяли по П.В. Барановскому и B.C. Данилишиной (1983); цинк-сульфатная осадочная печеночная проба проводилась по И.П. Кондрахину (2004). Концентрацию натрия и калия определяли с применением ионселективных электродов на электролитном анализаторе фирмы Kone.
Для оценки Т- и В-систем иммунитета использовали метод розеткообразования, предложенный А. С. Закс, А. А. Быковой и Т. А. Юшковой (1986).
Функциональное состояние миокарда у телят оценивали с помощью электрокардиографии. Электрокардиограмму регистрировали одноканальным электрокардиографом ЭК1Т – 03М2 по системе сагиттальных отведений М.П. Рощевского (1958) с записью трех биполярных туловищных отведений и усиленных отведений Гольдберга (aVR, aVL, aVF). В качестве электродов использовали зажимы типа «нахвостников». Для лучшего контакта кожу и шерсть на месте фиксации электродов смачивали 10% раствором хлорида натрия. После наложения электродов к ним подключали штепсель проводов электрокардиографа согласно маркировке.
Мочу собирали при естественном мочеиспускании. В отобранных пробах определяли тест полосками DEKA PHAN LEUCO удельную плотность, рН, белок, глюкозу, кетоновые тела, уробилиноген, билирубин и клетки крови.
Экспериментальные данные обработаны с использованием методов математической статистики, принятых в биологии и медицине (Г.Ф. Лакин, 1973; Е.В. Гульбер, 1978) с учётом рекомендаций Р.Х. Тукшаитова и
И.Р. Багаутдинова (1998) и применением прикладной программы
«Statistica 5.0».
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Этиопатогенетические факторы возникновения гепатоза
и миокардиодистрофии у новорожденных телят
При диспансеризации коров-матерей принадлежащих Опытной станции ВГАУ и СХА «Никольская» было отмечено, что они содержатся на несбалансированных рационах (с избытком сырого жира, сырой клетчатки, кальция при дефиците кормовых единиц, переваримого протеина, фосфора, микроэлементов) с нарушением структуры рациона. Допускается скармливание грубых кормов пораженных плесенью, силоса с повышенным содержанием масляной кислоты при отсутствии активного моциона.
У 40% коров отмечено увеличение области печеночного притупления, значительное рассасывание последних хвостовых позвонков, снижение упитанности и частоты сокращений рубца, матовость и взъерошенность волосяного покрова, алопеции.
При исследовании крови и сыворотки крови больных коров за 7-14 дней до отела содержание лейкоцитов и гемоглобина находилось в пределах оптимальных значений; снижено количество эритроцитов на 10,4-17,4%,
Т-лимфоцитов на 14-18%; повышен уровень общего билирубина на 46-49%, общих иммуноглобулинов на 43-45%, ЦИК С3 на 48-55% и С4 19-28%, концентрация общего белка на 12-14%, активность АсАТ на 68-80%, АлАТ на
31-46%, ГГТП на 51-92%. Снижение коллоидной устойчивость белков сыворотки крови проявилось положительными коллоидно-осадочными пробами. Антитела к тканям печени зарегистрированы в титре 1:16 у 13-15%, 1:32 у 25-33%, 1:64 у 54-60% коров при гепатозе.
При морфологическом исследовании печени отмечена жировая дистрофия гепатоцитов и формирующийся мелкоузловой монолобулярный цирроз печени, что полностью подтверждает клиническую картину.
Таким образом, содержание глубокостельных коров на несбалансированных рационах приводит к нарушению обмена веществ, функции печени, что в дальнейшем отражается на развитии и здоровье приплода.
3.2. Клинико-морфологический, биохимический и иммунологический статус здоровых и больных гепатозом новорожденных телят
У клинически здоровых новорожденных телят масса тела при рождении, появление устойчивой позы стояния, сосательного рефлекса, клинические показатели: температура тела, количество дыхательных движений, частота пульса находились в пределах общепринятых нормативов.
В крови у физиологически зрелых новорожденных телят на 1-3 день после рождения содержалось эритроцитов 7,36±0,11012/л, гемоглобина 109,5±1,8г/л, лейкоцитов 7,96±0,27109/л, лимфоцитов (4,03±0,14109/л), процентное содержание Т- и В-лимфоцитов соответственно 28,39±0,43% и 5,27±0,14%, и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов соответственно 1,15±0,05109/л и 0,21±0,01109/л, что соответствует границам оптимальных значений.
В сыворотке крови здоровых новорожденных телят уровень общего белка составил 56,9±0,6г/л, общих иммуноглобулинов 16,59±0,35мг/мл, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 — 4,63±0,18Ед.Оп. и
С4 6,3±0,28Ед.Оп., активность АсАТ 138±7,38 нмоль/сл, АлАТ 179±8,98 нмоль/сл, титр антител к тканям печени равен 1:4 и 1:8 у 56% и 44% животных соответственно. Показатель цинк сульфатной пробы равен 1,84±0,03мл, количество натрия (Na+) и калия (К+) в плазме крови 144±1,58 и
4,5±0,17 мЭкв/л соответственно, что находится в рамках оптимальных значений. Количество общего билирубина и активность ГГТП на 9,3% и 79,4% соответственно выше общепринятых нормативов.
Показатели клинического статуса, крови и сыворотки крови здоровых новорожденных телят взяты в данной работе в качестве критериев для оценки здоровья животных.
У новорожденных телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени (остеодистрофия, гепатоз), сосательный рефлекс понижен или слабо выражен. Телята больше лежат, плохо опираются на конечности, движения неуверенные. На 1-3 день жизни у 100% животных развилась диарея. Фекалии разжиженные, кисловатого запаха, желто-серого цвета. Кожа сухая, эластичность ее снижалась, собранные складки с трудом расправляются. Волосяной покров тусклый, в большинстве случаев взъерошен, у некоторых телят отмечены алопеции. Подкожная жировая клетчатка слабо развита. Видимые слизистые оболочки у 60% гладкие, блестящие, преимущественно бледно-розовые, у 27,5% телят с цианотичным оттенком и у оставшихся 12,5% телят матово-красные. У 56% телят наблюдается ослабление сердечного толчка, у 41% болезненность печени при перкуссии и пальпации.
В крови новорожденных телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, на 1-3 день после рождения (табл.3) установлено низкое количество эритроцитов (4,48±0,161012/л), гемоглобина (97,8±1,3г/л) при повышенном уровне лейкоцитов (9,51±0,26109/л).
В сыворотке крови зафиксировано повышение активности АсАТ (199±5,89нмоль/сл), АлАТ (216±6,81нмоль/сл), ГГТП (25,6±1,41мккат/л); уровня общих иммуноглобулинов (22,06±0,92мг/мл); титра антител к тканям печени: так, в титре 1:16 антитела выявлены у 43,7%, а в титре 1:32 у 56,3% животных, при повышенном содержании циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 (9,38±0,42Ед.Оп.) и С4 (10,51±0,31Ед.Оп.).
В плазме крови телят отмечено снижение количества натрия (Na+) (116,3±1,85мЭкв/л) и калия (К+) (3,2±0,11мЭкв/л).
Цинк сульфатная печеночная проба по Кондрахину положительна и составляет 1,48±0,02мл, что на 19,6% ниже условно здоровых телят.
Процентное содержание Т-лимфоцитов (24,97±0,7%) снижено, а
В-лимфоцитов (8,04±0,4%), напротив, повышено. Это отразилось и на абсолютном количестве Т-лимфоцитов (1,1±0,04109/л) и В-лимфоцитов (8,04±0,4109/л).
Таким образом, новорожденные телята, полученные от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, при рождении имеют низкую массу тела; в крови у них низкое содержание эритроцитов, гемоглобина, высокий уровень общего билирубина, повышенная активность индикаторных ферментов. В иммунограмме увеличено количество общих иммуноглобулинов, В-лимфоцитов, титр антител к тканям печени. В первые дни жизни у новорожденных телят отмечается диарея, протекающая со снижением упитанности, потерей эластичности кожи и алопециями, что свидетельствует о нарушении обмена веществ и функции печени в форме неонатальной гепатодистрофии, сопровождающейся развитием аутоиммунизации.
3.3. Функциональное состояние сердца клинически здоровых и больных гепатозом телят
У здоровых новорожденных телят форма электрокардиографической кривой, зарегистрированная в сагиттальных отведениях, постоянна при изменении положения тела и передних конечностей, с характерным положительным предсердным зубцом Р (Р1 - 0,4±0,1; Р2 - 1,8±0,1; Р3 - 1,5±0,1), начальной желудочковой активностью в виде небольшого зубца r (r1 - 1,5±0,2;
r2 - 3,3±0,5; r3 - 3,5±0,5) и глубокого зубца S (S1 - 1,8±0,4; S2 - 14,0±0,8;
S3 - 14,3±0,7), а также положительного зубца Т (Т1 - 0,7±0,13; Т2 - 5,2±0,5;
Т3 - 5,1±0,5) (таб.1).
 |
| Рис.1. ЭКГ здорового теленка (V=50мм/с, 1mV=10мм; II отведение) |
У клинически здоровых новорожденных телят зубец Р имеет характерную форму (рис.1). Восходящее колено зубца Р1 совпадает по времени с возбуждением левого предсердия. К моменту появления на ЭКГ выемки между зубцами Р1 и Р2 оказывается деполяризованной большая часть поверхности левого предсердия. Восходящее колено зубца Р2 соответствует времени окончания возбуждения правого предсердия. Нисходящее колено зубца Р2 соответствует времени окончания возбуждения левого предсердия.
Систолический показатель (СП) у новорожденных телят составил 51±2%, частота сердечных сокращений (ЧСС) находилась в пределах 145±10 ударов в минуту.
У телят в возрасте 15-30 дней (табл.1) в сравнении с новорожденными отмечается увеличение амплитуды зубца Р1 в 2 раза (Р<0,05), зубца Т2 на 40% (Р<0,01).
Таблица 1.Электрокардиографические показатели клинически здоровых телят
| Зубец | Амплитуда зубцов в I, II и III отведениях в возрастном аспекте, мм (при контрольном возмущении напряжения в 1 mV равном 10мм) | |||||
| 1 — 14 дней | 15-30 дней | |||||
| I | II | III | I | II | III | |
| P | 0,4±0,1 | 1,8±0,1 | 1,5±0,1 | 0,8±0,1 | 1,9±0,1 | 1,2±0,1 |
| Q | 1,5±0,3 | — | — | 2,8±0,8 | — | — |
| R | 1,5±0,2 | 3,3±0,5 | 3,5±0,5 | 1,8±0,3 | 1,5±0,2 | 2,1±0,3 |
| S | 1,8±0,4 | 14±0,8 | 14,3±0,7 | 1,6±0,4 | 14,8±1,5 | 13,3±1,0 |
| T | 0,7±0,1 | 5,2±0,5 | 5,1±0,5 | 1,2±0,3 | 7,3±0,5 | 6,5±0,7 |
Продолжительность интервалов QRS, QT и RR в возрасте 15-30 дней отличается от таковой у новорожденных телят (табл.2).
Таблица 2.Продолжительность интервалов ЭКГ у клинически здоровых телят
| Интервал | Длительность интервалов у телят разного возраста, с | |
| 1-14 дней | 15-30 дней | |
| PQ | 0.12±0.04 | 0,12±0,01 |
| QRS | 0.05±0.002 | 0,04±0,003 |
| QT | 0.22±0.01 | 0,24±0,02 |
| RR | 0.44±0.04 | 0,56±0,08 |
При анализе полученных электрокардиограмм у всех подопытных телят больных гепатозом, установлено наличие различных признаков, характерных для миокардиодистрофии, в связи, с чем мы приводим средние данные, характеризующие группу телят, имеющих сходную ассоциацию признаков ЭКГ.
 |  |
| I отведение А | I отведение Б |
 |  |
| II отведение А | II отведение Б |
Рис. 2. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии:
А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм)
У 10% телят зубец Р1 практически отсутствует, амплитуда Р2 снижена на 41%, Р3 на 29%. Вершина зубца Q1 расщеплена, амплитуда увеличена в 2,2 раза. Зубец R1 увеличен в 2 раза, а R2 напротив уменьшен в 3 раза. Зубец Т1 — отрицательный, Т3 увеличен на 37% по сравнению со здоровыми животными. Усиленные отведения подтверждают наличие дистрофических изменений в правой половине сердца.
У 10% телят отмечается другой комплекс изменений, характерных для миокардиодистрофии. Зубец Р1 отсутствует, R1 увеличен в 2 раза, а его вершина раздвоена, R3 уменьшен в 3 раза. Во втором отведении зубец R отсутствует, а вместо него регистрируется комплекс QS амплитудой 17±0,8мм. Амплитуда зубца S3 увеличена на 26% (рис.2).
Локализация патологического процесса в области правого желудочка и желудочковой перегородки отмечена у 22,5% животных, при этом на ЭКГ зубец R1 значительно раздвоен, R2 увеличен на 82% (рис.3).
 |  |
| I отведение А | I отведение Б |
 |  |
| II отведение А | II отведение Б |
| Рис. 3. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) | |
На ЭКГ 20% телят отсутствует зубец R1, а вместо него регистрируется комплекс QS1. Зубец Т1 отрицательный, амплитуда увеличена в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми телятами, а Т2 двухфазный и суммарная амплитуда не превышает 2 мм, Т3 уменьшен на 61%. Такие изменения ЭКГ указывают на угнетение обменных процессов в миокарде.
Раздвоение зубца R1, снижение амплитуды S2 на 21% указывает на дистрофические изменения в области предсердий и межжелудочковой перегородки и регистрируется у 12,5% больных телят (рис.4).
Выраженные дистрофические изменения в области обоих желудочков и межжелудочковой перегородки отмечаются у 15% животных и проявляются глубоким зубцом Q2 и зубцом R2, который не поднимается выше изопотенциальной линии. Комплекс QRS расширен (до 0,06с) и деформирован, он приобретает W-образный вид (рис.5). При этом зубец Q1 увеличен в 2 раза, а в третьем отведении регистрируется комплекс QS3.
 |  |
| I отведение А | I отведение Б |
| Рис. 4. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) | |
У 10% телят дистрофические изменения проявились W-образным комплексом QRS в первом отведении, увеличением амплитуды зубца Т2 в 2,3 раза и Т3 в 2,2 раза, при этом вершина зубца Т заостренная.
У 20% телят миокардиодистрофия проявилась замедлением проведения импульса от синусового узла к предсердиям, переходящим в синоатриальную блокаду.
 |  |
| II отведение А | II отведение Б |
| Рис. 5. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) | |
При анализе ЭКГ телят, больных гепатозом, выявлены отклонения в амплитуде зубцов P, Q, R, S, T в основных — I, II, III и усиленных — aVR, aVL, aVF отведениях, выражающиеся в увеличении или уменьшении амплитуды более чем на 25%, полярности или видоизменении формы, что указывает на наличие очагов дистрофии миокарда и нарушение внутрисердечной проводимости, которая всегда сопутствует миокардиодистрофии.
3.4. Морфологические изменения печени и сердца
при гепатозе новорожденных телят
С целью выяснения морфологических изменений в печени и сердце от трех телят был отобран материал для гистологического исследования.
При микроскопическом исследовании печени видно, что в венах наблюдается застой крови и эритроциты скапливаются в синусоидных капиллярах. В центре долек вены и капилляры расширены, полнокровны, печеночные клетки атрофичны, пространства Диссе расширены.
В условиях кислородного голодания, ведущего к жировой декомпозиции, печень теряет гликоген и инфильтрируется жиром, при этом в некоторых участках печени отмечаются диффузные мелкие (пылевидные) вакуоли на месте капелек жира. Ядра гепатоцитов теряют форму, иногда вакуолизируются, их граница нечетко выражена, видны небольшие группы клеток с кариопикнозом. Изредка встречаются клетки с нерезко выраженной белковой дистрофией, их цитоплазма зернистая, мелковакуолизирована.
При микроскопическом исследовании сердца отмечается сочетание дистрофии (гидропической) с очажками лизиса кардиомиоцитов. Поврежденные участки миокарда чередуются с практически не измененными.
В зоне ярко выраженной гидропической дистрофии кардиомиоциты увеличены в объеме, их цитоплазма заполнена вакуолями, содержащими прозрачную жидкость. Ядро смещается на периферию, иногда вакуолизируется или сморщивается. Прогрессирование этих изменений приводит к распаду ультраструктур клетки и переполнению клетки водой. Клетка превращается в заполненный жидкостью баллон или огромную вакуоль, в которой плавает пузырьковидное ядро.
Выражением сердечно-сосудистой недостаточности является общее венозное (застойное) полнокровие, при этом вены кровенаполнены, а артерии практически пусты. Длительно существующее венозное полнокровие ведет к дистрофии, а затем к атрофии и последующему лизису кардиомиоцитов. На начальных этапах это проявляется набуханием клеток, увеличением ядер, исчезновением поперечной исчерченности кардиомиоцитов.
Таким образом, данные клинического и электрокардиографического обследования телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, результаты биохимического исследования крови свидетельствуют о нарушении обмена веществ, развивающейся дистрофии печени и сердечной мышцы, что полностью подтверждено морфологической картиной, которая характерна для миокардиодистрофии и гепатоза.
3.5. Изучение лечебной эффективности пуриветина
при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией
3.5.1. Клинико-морфологические, биохимические и иммунологические показатели у телят при назначении пуриветина с лечебной целью
За период научно-производственного опыта в контрольной группе пало 2 теленка, а у 63% оставшихся животных сохранилась матовость волосяного покрова и слабость сердечного толчка, диарея продолжалась 8-12 дней.
К концу опыта в крови телят контрольной группы увеличилось количество электролитов крови: натрия на 7,7% и калия на 10,9% относительно фоновых показателей (Р<0,05); возросла активность АсАТ на 11,1% и содержание лейкоцитов на 17,8%, преимущественно за счет абсолютного количества лимфоцитов на 25,8% (Р<0,01). В популяции лимфоцитов возросло абсолютное количество Т- на 18,2% (1,3±0,03·109/л) и В-лимфоцитов на 61,1% (0,58±0,03·109/л). Количество ЦИК С4 составило 14,1±0,35 Ед.Оп., что на 34,2% выше фоновых значений (Р<0,001). Уровень общих иммуноглобулинов снизился на 22,8% (17,03±0,7) относительно фона (Р<0,001). Количество телят с титром антител к тканям печени 1:16 снизилось до 25%, однако с титром — 1:32 возросло до 75% (табл.3).
Указанные изменения морфологических, биохимических и иммунологических показателей свидетельствуют о развитии гепатоза и аутоиммунных процессов.
Назначение пуриветина телятам опытных групп обеспечило прекращение диареи на 4-6 день дачи препарата. К концу опыта волосяной покров у всех животных приобрел блеск, исчезла болезненность печени, слизистые оболочки стали матово-красные, сердечный толчок умеренной силы. Вместе с тем, из-за прогрессирования патологического процесса в третьей опытной группе один теленок пал. Среднесуточный прирост массы тела у телят в 1, 2, 3 опытных группах и контрольной группе составил 553, 511, 496 и 475 г соответственно.
Применение пуриветина благоприятно отразилось на состоянии эритропоэза, иммунологическом и биохимическом статусе. Наиболее статистически достоверные результаты выявлены в крови телят опытной группы 1 (табл.3). О нормализации эритропоэза говорит увеличение количества эритроцитов на 31,5% (до 6,18±0,21·1012/л) (Р<0,01), гемоглобина на 13,9% (до 109,3±3,5г/л) относительно одноименных показателей у животных контрольной группы (Р<0,05).
На улучшение функционального состояния печени у телят получавших пуриветин указывает снижение количества общего билирубина на 28,3% (до 4,98±0,17мкмоль/л) (Р<0,05), активности индикаторных ферментов АсАТ на 21,7% (до 173±8нмоль/сл) (Р<0,01), АлАТ на 31,6% (до 143±7нмоль/сл) и ГГТП на 40,5% (до 13,8±0,46мккат/л) (Р<0,001) по сравнению с контрольной группой, что говорит о прекращении разрушения клеток (рис.7).
Рис. 6 Уровень антител к тканям печени
при назначения пуриветина с лечебной целью
Показатель цинк сульфатной пробы увеличился на 17,2% (до 1,7±0,04мл) (Р<0,01), что также свидетельствует о благоприятном действии препарата пуриветин на функциональную деятельность печени.
Под действием пуриветина нормализовались показатели электролитного обмена, что проявилось увеличением в крови ионов натрия на 17,1% (до 146,8±2,1мЭкв/л) (Р<0,01) и калия на 38,9% (до 4,93±0,1мЭкв/л) (Р<0,001).
В иммунограмме произошло снижение ЦИК С3 на 22,3% (до 8±0,29Ед.Оп.) (Р<0,01), С4 на 38,1% (до 8,73±0,29Ед.Оп.) и общих иммуноглобулинов на 52,8% (до 8,03±0,69мг/мл) (Р<0,001) относительно контрольной группы. Содержание лейкоцитов уменьшилось на 31,4% (до 7,68±0,28·109/л) (Р<0,001), при этом абсолютное количество лимфоцитов снизилось на 38,7% (до 3,44±0,28·109/л) (Р<0,01). Изменилось и процентное содержание лимфоцитов в строну увеличения Т-лимфоцитов до 28,9±0,65% (Р<0,01) и уменьшения В-лимфоцитов до 6,45±0,46% (Р<0,001). Снизился и уровень аутоиммунизации к тканям печени, которые зарегистрированы в титре 1:8 у 25%, а в титре 1:16 у 75% телят (рис.6).
Таблица 3. Морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови телят больных гепатозом,
при назначении пуриветина
| Показатели | Группы телят | |||||||||
| фон (n=16) | контроль (n=4) | % к фону | опытная 1 (n=4) | % к контролю | опытная 2 (n=4) | % к контролю | опытная 3 (n=4) | % к контролю | ||
| Лейкоциты, 109/л | 9,51±0,26 | 11,2±0,49 | +17,8** | 7,68±0,28 | -31*** | 9,1±0,45 | -18,8* | 10,6±0,43 | -5,4 | |
| Т-лимфоциты, 109/л | 1,1±0,04 | 1,3±0,03 | +18,2*** | 1,0±0,1 | -23,0* | 1,17±0,06 | -10,0 | 1,34±0,04 | +3,1 | |
| В-лимфоциты, 109/л | 0,36±0,03 | 0,58±0,03 | +61,1*** | 0,22±0,02 | -62,1*** | 0,32±0,02 | -44,8*** | 0,47±0,01 | -19,0* | |
| Эритроциты, 1012/л | 4,48±0,16 | 4,7±0,15 | +4,9 | 6,18±0,21 | +31,5** | 5,5±0,42 | +17 | 5,1±0,16 | +8,5 | |
| Гемоглобин, г/л | 97,8±1,3 | 96,0±3,9 | -1,8 | 109,3±3,5 | +13,9* | 103,8±3,2 | +8,1 | 98,3±3,7 | +2,4 | |
| Билирубин общ., мкмоль/л | 6,88±0,23 | 6,95±0,58 | +1,1 | 4,98±0,17 | -28,3* | 5,43±0,22 | -21,9* | 6,13±0,37 | -11,8 | |
| АсАТ, нмоль/сл | 199±5,89 | 221±7 | +11,1** | 173±8 | -21,7** | 190±8 | -14* | 209±8 | -5,4 | |
| АлАТ, нмоль/сл | 216±6,81 | 209±5 | -3,2 | 143±7 | -31,6*** | 175±5 | -16,3** | 198±9 | -5,3 | |
| ГГТП, мккат/л | 25,6±1,41 | 23,2±0,46 | -9,4 | 13,8±0,46 | -40,5*** | 16,6±0,51 | -28,4*** | 19,1±0,56 | -17,7** | |
| Цинк сульфатная проба, мл | 1,48±0,02 | 1,45±0,02 | -2 | 1,7±0,04 | +17,2** | 1,71±0,03 | +17,9*** | 1,68±0,03 | +15,9*** | |
| Натрий (Na+) мЭкв/л | 116,3±1,9 | 125,3±3,54 | +7,7* | 146,8±2,1 | +17,1** | 138,4±2,63 | +10,5* | 130±2,38 | +3,8 | |
| Калий (К+) мЭкв/л | 3,2±0,11 | 3,55±0,1 | +10,9* | 4,93±0,1 | +38,9*** | 4,38±0,21 | +23,4* | 3,9±0,13 | +9,9 | |
| Общие иммуноглобулины, мг/мл | 22,06±0,92 | 17,03±0,7 | -22,8*** | 8,03±0,69 | -52,8*** | 9,88±0,57 | -42,0*** | 14,8±0,64 | -13,1 | |
| ЦИК | С3, Ед.Оп. | 9,38±0,42 | 10,3±0,43 | +9,8 | 8,0±0,29 | -22,3** | 8,48±0,19 | -17,7** | 9,25±0,32 | -10,2 |
| С4, Ед.Оп. | 10,51±0,31 | 14,1±0,35 | 34,2*** | 8,73±0,29 | -38,1*** | 9,75±0,34 | -30,9*** | 10,6±0,54 | -24,8** | |
| Титр антител к тканям печени | 1:16 у 44% 1:32 у 56% | 1:16 у 25% 1:32 у 75% | - | 1:8 у 25% 1:16 у 75% | - | 1:16 у 100% | - | 1:16 у 75% 1:32 у 25% | - | |
Примечание: *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001
Рис. 7 Уровень индикаторных ферментов
при назначения пуриветина с лечебной целью
Таким образом, применение пуриветина при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией, обеспечивает нормализацию эритропоэза, пигментного обмена, иммунологического и биохимического статуса, что ведет к сокращению периода болезни, увеличению сохранности новорожденных телят и повышению темпов их роста.
3.5.2. Влияние пуриветина на функциональное состояние
сердца у телят при гепатозе
К концу периода наблюдения у телят контрольных групп существенных изменений на ЭКГ по сравнению с началом опыта не отмечено.
В опытных группах произошли позитивные изменения в функциональном состоянии миокарда, что отразилось на улучшении электрокардиографических показателей. Наиболее существенные изменения ЭКГ, свидетельствующие об улучшении состояния миокарда, зарегистрированы у телят 1 опытной группы.
У телят с дистрофическими изменениями в правой половине сердца под действием пуриветина зубец Р1 стал положительным, амплитуда Р2 увеличилась в 2 раза. Зубец R1 снизился и достиг нормы, а R2 напротив увеличился в 2 раза. Т1 — стал положительным.
У телят с комплексом изменений, характерных для миокардиодистрофии, в котором отсутствует зубец Р1, зубец R1 увеличен в 2 раза, а его вершина раздвоена, R3 уменьшен в 3 раза, к концу опыта произошло появление зубца Р1, R1 снизился и раздвоенность вершины практически исчезла, амплитуда R3 возросла в три раза и достигла оптимальной величины (рис.2). Во втором отведении вместо комплекса QS появляется зубец R2 нормальной амплитуды и S2 амплитудой 14±0,9мм. Амплитуда зубца S3 также снижается до 14мм.
При локализации патологического процесса в области правого желудочка и межжелудочковой перегородки у телят получавших пуриветин на ЭКГ исчезает раздвоение зубца R1, амплитуда R2 снижается и достигает нормальной величины (рис.3).
На электрокардиограмме телят с отсутствуем зубца R1 и наличием вместо него комплекса QS, отрицательным зубцом Т1 и двухфазным Т2 под действием пуриветина появился R1; Т1 стал положительным, а Т2 однофазным.
Такие изменения ЭКГ указывают на нормализацию обменных процессов в миокарде в целом, а в правой половине сердца в особенности.
При дистрофических изменениях в области предсердий и межжелудочковой перегородки раздвоение зубца R1 исчезает, амплитуда Т1 увеличивается в 2 раза, S2 на 20% (рис.4).
Выраженные дистрофические изменения в области обоих желудочков и межжелудочковой перегородки, проявляющиеся комплексом QRS W-образного вида (рис.5), после назначения пуриветина исчезают. При этом зубец Q2 исчезает и появляется R2.
У телят с дистрофическими изменениями миокарда, проявившиеся W-образным комплексом QRS в первом отведении, увеличением амплитуды зубца Т2 в 2,3 раза, Т3 в 2,2 раза и с вершиной зубца Т готической формы, вид ЭКГ изменяется: в первом отведении регистрируется комплекс QRS нормальной амплитуды, величина Т2 и Т3 снижается на 42 и 45% соответственно.
Синоатриальная блокада после назначения пуриветина не регистрируется. Значительные дистрофические изменения в предсердиях, приводящие к изменению полярности зубца Р1 и Т1, увеличению R1 в 5 раз, R2 в 2,1 раза, R3 в 2 раза на фоне снижения S2 на 43%, исчезают после применения препарата. Зубцы Р1 и Т1 восстанавливают свою полярность, R1 уменьшается в 5 раз, R2 в 1,5 раза, R3 в 2 раза на фоне увеличения S2 на 51%. Амплитуда зубца Т3 снизилась на 46% и его форма становится пологой.
Таким образом, пуриветин влияет на обменные процессы в миокарде и улучшает функциональную активность проводящей системы. Результатом такого действия является нормализация трофики миокарда, улучшение качества сердечных сокращений – их силы и ритма, что и отражается на ЭКГ.
3.6. Изучение профилактической эффективности пуриветина
Все подопытные телята в течение научно-производственного опыта были клинически здоровы.
В крови подопытных телят (n=16) в начале наблюдения содержание лейкоцитов (7,96±0,27·109/л), в том числе лимфоцитов (51,1±1,62%), а также эритроцитов (7,36±0,1·1012/л), гемоглобина (109,5±1,8г/л), общего белка (56,9±0,6г/л), общих иммуноглобулинов (16,7±0,35мг/мл), натрия (144±1,58мЭкв/л), калия (4,5±0,17мЭкв/л), активность АсАТ (138±7,38 нмоль/сл), АлАТ (179±8,98нмоль/сл) и показатель цинк сульфатной пробы (4,5±0,17мл) находились в пределах оптимальных значений (табл.4).
При этом отмечено увеличение общего билирубина на 9,4%, активности ГГТП на 79,5%. Количество ЦИК С3 и С4 составило 4,63±0,18 и 6,3±0,28Ед.Оп. соответственно, а титр антител к тканям печени 1:4 зафиксирован у 56% и 1:8 у 44% телят.
Среднесуточный прирост массы тела за период наблюдения у телят контрольной группы составил 640 г, у телят опытных групп 681, 714, 724 г соответственно, что на 106,4, 111,6 и 113,1% выше, чем у телят контрольной группы.
Таблица 4. Морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых телят,
при назначении пуриветина
| Показатели | Группы телят | |||||||||
| фон (n=16) | контроль (n=5) | % к фону | опытная 1 (n=7) | % к контролю | опытная 2 (n=7) | % к контролю | опытная 3 (n=7) | % к контролю | ||
| Лейкоциты, 109/л | 7,96±0,27 | 8,83±0,64 | +10,9 | 8,48±0,7 | -4 | 8,15±0,43 | -7,7 | 8,28±0,53 | -6,2 | |
| Т-лимфоциты, 109/л | 1,15±0,05 | 1,5±0,17 | +30,4 | 1,58±0,19 | +5,3 | 1,72±0,13 | +14,7 | 1,73±0,1 | +15,3 | |
| В-лимфоциты, 109/л | 0,21±0,01 | 0,61±0,08 | +190*** | 0,46±0,05 | -24,6 | 0,49±0,04 | -19,7 | 0,46±0,02 | -24,6 | |
| Эритроциты, 1012/л | 7,36±0,1 | 6,0±0,53 | -18,5* | 7,33±0,25 | +22,2* | 7,28±0,4 | 21,3 | 7,48±0,45 | +24,7 | |
| Гемоглобин, г/л | 109,5±1,8 | 90,5±4,1 | -17,4*** | 105±3,5 | +16* | 108,5±5,1 | +19,9* | 110,3±1,7 | +21,9*** | |
| Билирубин общ., мкмоль/л | 5,25±0,4 | 5,75±0,39 | +9,5 | 4,05±0,21 | -29,6** | 3,73±0,24 | -35** | 3,55±0,28 | -38,3** | |
| АсАТ, нмоль/сл | 138±7,38 | 203±24 | +47* | 136±17 | -33 | 124±7 | -38,9* | 145±6 | -28,6 | |
| АлАТ, нмоль/сл | 179±8,98 | 217±15 | +21,2* | 152±16 | -30* | 161±7 | -25,5* | 173±8 | -20,3* | |
| ГГТП, мккат/л | 14±1,33 | 17,3±0,46 | +23,6* | 16,1±0,73 | -6,9 | 14,3±0,36 | -17,3** | 13,9±0,46 | -19,7** | |
| Цинк сульфатная проба, мл | 1,84±0,03 | 1,55±0,03 | -15,8*** | 1,68±0,05 | +8,4 | 1,85±0,05 | +19,4** | 1,7±0,04 | +9,6* | |
| Натрий (Na+) мЭкв/л | 144±1,58 | 132,5±3,2 | -8** | 141,5±2 | +6,8 | 142,0±1,5 | +7,2* | 146,0±1,5 | +10,2** | |
| Калий (К+) мЭкв/л | 4,5±0,17 | 3,8±0,1 | -15,6** | 4,6±0,3 | +21,1* | 4,6±0,2 | +21,1* | 4,8±0,2 | +26,3** | |
| Общие иммуноглобулины, мг/мл | 16,7±0,35 | 9,75±0,36 | -41,6*** | 8,18±0,61 | -16,1 | 8,05±0,5 | -17,4* | 7,98±0,36 | -18,2* | |
| ЦИК | С3, Ед.Оп. | 4,63±0,18 | 5,55±0,23 | +19,9** | 5,03±0,29 | -9,4 | 5,2±0,35 | -6,3 | 4,98±0,48 | -10,3 |
| С4, Ед.Оп. | 6,3±0,28 | 7,18±0,37 | +13,9* | 6,75±0,21 | -6 | 7,05±0,1 | -1,8 | 6,8±0,23 | -5,3 | |
| Титр антител к тканям печени | 1:4 у 56% 1:8 у 44% | 1:8 у 75% 1:16 у 25% | - | 1:4 у 50% 1:8 у 50% | - | 1:4 у 50% 1:8 у 50% | - | 1:4 у 75% 1:8 у 25% | - | |
Примечание: *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001
На 20 день опыта в крови телят контрольной группы установлено снижение содержания общего белка (48±2,2г/л) на 15,6% (Р<0,01), эритроцитов (6,0±0,53·1012/л) на 18,5% (Р<0,05), гемоглобина (90,5±4,1г/л) на 17,4%, показателя цинк-сульфатной пробы (1,55±0,03мл) на 15,8%% (Р<0,001), общих иммуноглобулинов (9,75±0,36мг/мл) на 41,6% (Р<0,001), количества натрия и калия на 8 и 15,6% соответственно (Р<0,01).
Отмечено увеличение активности АсАТ на 47%, АлАТ на 21,2% и ГГТП 23,6% (Р<0,05); количества В-лимфоцитов (0,61±0,08·109/л) в 1,9 раза (Р<0,001); уровня ЦИК С3 (5,55±0,23Ед.Оп.) на 19,9% (Р<0,01), а С4 (7,18±0,37Ед.Оп.) на 13,9% (Р<0,05).
Титр антител к тканям печени 1:8 зарегистрирован у 75%, а 1:16 — у 25% телят контрольной группы.
Применение пуриветина благоприятно отразилось на состоянии эритропоэза, белковом и пигментном обмене. Наиболее выраженные изменения отмечаются в крови телят опытной группы 3, что проявилось повышением содержания эритроцитов (7,48±0,45·1012/л) на 25%, гемоглобина (110,3±1,7г/л) на 21,9% (Р<0,001), общего белка на 21,5% (Р<0,05), показателя цинк сульфатной пробы (1,7±0,04мл) на 9,6% (Р<0,05), снижением уровня общего билирубина (3,55±0,28мкмоль/л) на 38,3% (Р<0,01), активности АсАТ (145±6нмоль/сл) на 28,6%, АлАТ (173±8нмоль/сл) на 9% (Р<0,05) и ГГТП (13,9±0,46мккат/л) на 19,7% (Р<0,01).
Под действием пуриветина изменился состав лимфоцитов в сторону увеличения количества Т-лимфоцитов до 35,78±1,45% и уменьшения В-лимфоцитов до 9,5±0,5%, а также снизилось количество общих иммуноглобулинов (7,98±0,36мг/мл) на 18,2% (Р<0,05).
Увеличение в крови натрия (146,0±1,5мЭкв/л) и калия (4,8±0,2мЭкв/л) на 10,2 и 26,3% соответственно свидетельствует об улучшении электролитного состава крови.
Титр антител к тканям печени составил 1:4 и 1:8 у 75 и 25% телят соответственно, что указывает на снижение аутоиммунизации при применении пуриветина с профилактической целью.
Таким образом, применение пуриветина в первые 20 дней жизни стимулирует кроветворение, показатели клеточного и гуморального иммунитета, а также снижает уровень аутоиммунизации к тканям печени, что обеспечивает профилактику гепатоза и повышение темпов прироста живой массы тела до 13,1%.
3.7. Результаты производственной апробации
препарата пуриветин
Производственное испытание пуриветина было проведено в СХА «Никольская» Таловского района Воронежской области.
Пуриветин назначали здоровым новорожденным телятам с профилактической целью в оптимальной дозе — 20мг/кг массы тела.
Новорожденные телята (n=50) были распределены на 2 группы: контрольная и опытная. Животные контрольной группы выращивались по общепринятой схеме хозяйства. Телята опытной группы дополнительно получали пуриветин с 1 по 20 день жизни с молозивом, а затем и с молоком.
Назначение пуриветина новорожденным телятам с профилактической целью обеспечило (табл.5) снижение заболеваемости их гепатозом и миокардиодистрофией на 75%, сокращение продолжительности и тяжести течения болезни и увеличение среднесуточного прироста массы тела на 12%.
Таблица 5. Показатели продуктивности и клиническое состояние новорожденных телят при назначении пуриветина
| Показатели | С профилактической целью | С лечебной целью | ||||
| контроль | опыт | контроль | опыт | |||
| Количество животных в группе | 25 | 25 | 25 | 25 | ||
| Средняя масса тела, кг | в начале опыта | 29,6±1,3 | 28,2±1,9 | 30,0±2,0 | 29,1±1,7 | |
| в конце опыта | 46,4±2,5 | 47±2,0 | 46,5±1,8 | 48,3±1,2 | ||
| Количество животных с диарейным синдромом | 7 | 2 | 25 | 25 | ||
| Продолжительность болезни, дней | 9-12 | 4-6 | 10-12 | 4-7 | ||
| Количество павших животных | - | - | 3 | - | ||
| Период наблюдения, дней | 30 | 30 | 30 | 30 | ||
| Среднесуточный прирост массы тела, кг | 560±31 | 627±12 | 462±17 | 523±27 | ||
| Продолжительность назначения препарата, дней | - | 20 | - | 20 | ||
| Количество животных с признаками миокардиодистрофии | в начале опыта | - | - | 25 | 25 | |
| в конце опыта | 8 | 2 | 22 | 5 | ||
С лечебной целью пуриветин назначали больным новорожденным телятам в оптимальной дозе по схеме: первые 5 дней 40мг/кг, следующие 5 дней 30 мк/кг и последние 10 дней 20мг/кг массы тела.
Применение пуриветина новорожденным телятам с лечебной целью обеспечило (табл.5) снижение заболеваемости миокардиодистрофией на 77%, сокращение продолжительности и снижение тяжести течения болезни, увеличение среднесуточного прироста массы тела на 13%, а также повышение сохранности молодняка.
Таким образом, результаты производственных испытаний подтверждают экспериментальные данные о положительном влиянии пуриветина на функцию печени и миокарда, а также интенсивность роста у новорожденных телят.
3. ВЫВОДЫ
- В обследованных типичных хозяйствах Воронежской области у 30-56% новорожденных телят отмечается гепатоз, как следствие нарушения обмена веществ и функции печени у коров-матерей.
- Гепатоз у новорожденных телят клинически проявляется низкой массой тела при рождении у 45% животных, диареей в первые дни жизни у 100%, отставанием в росте и развитии, взъерошенностью и матовостью волосяного покрова у 72%, алопециями у 21%, анемичностью кожи и слизистых оболочек у 60%, болезненностью печени при пальпации и перкуссии у 41% животных.
- В крови здоровых новорожденных телят содержится эритроцитов 7,36±0,11012/л, гемоглобина 109,5±1,8г/л, лейкоцитов 7,96±0,27109/л, лимфоцитов 4,03±0,14109/л, процентное содержание Т- и В-лимфоцитов соответственно 28,39±0,43% и 5,27±0,14%, и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов соответственно 1,15±0,05109/л и 0,21±0,01109/л, уровень общего белка 56,9±0,6г/л, общего билирубина 5,25±0,4мкмоль/л, общих иммуноглобулинов 16,59±0,35мг/мл, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 4,63±0,18Ед.Оп и С4 6,3±0,28Ед.Оп., активность АсАТ 138±7,38 нмоль/сл, АлАТ 179±8,98 нмоль/сл. Показатель цинк сульфатной пробы равен 1,84±0,03мл, количество натрия (Na+) и калия (К+) 144±1,58 и 4,5±0,17 мЭкв/л. Титр антител к тканям печени выявлен в разведении 1:4 или 1:8.
- При гепатозе новорожденных телят повышается активность АсАТ до 199±5,89 нмоль/сл, АлАТ до 216±6,81 нмоль/сл; снижается уровень натрия (Na+) до 116,3±1,85 мЭкв/л и калия (К+) до 3,2±0,11 мЭкв/л, содержание эритроцитов до 4,48±0,161012/л, гемоглобина до 97,8±1,3 г/л; выявляется положительная цинк сульфатная печеночная проба 1,48±0,02 мл.
- При гепатозе телят отмечается усиление аутоиммунных процессов, о чем свидетельствует наличие в крови антител к тканям печени в разведении 1:16 и 1:32 соответственно в 43,7% и 56,3% случаев; увеличение циркулирующих иммунных комплексов С3 до 9,38±0,42Ед.Оп. и С4 до 10,51±0,31Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 22,06±0,92мг/мл при снижении абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов соответственно до 24,97±0,7% и 1,1±0,04109/л и В-лимфоцитов соответственно до 8,04±0,4% и 0,36±0,03109/л.
- В печени больных гепатозом телят при микроскопическом исследовании выявлено венозное полнокровие, скопление эритроцитов в синусоидных капиллярах, в гепатоцитах – диффузные мелкие вакуоли на месте капелек жира, в отдельных случаях нерезко выраженная белковая дистрофия.
- Гепатоз новорожденных телят в 100% случаев сопровождается миокардиодистрофией о чем свидетельствуют показатели электрокардиограммы в сагиттальных отведениях, характеризующиеся увеличением или уменьшением более чем на 25% амплитуды зубцов P, Q, R, S, T, в основных — I, II, III и усиленных - aVR, aVL, aVF отведениях, изменением полярности или формы
- У здоровых новорожденных телят форма электрокардиограммы, зарегистрированная в сагиттальных отведениях, постоянна при изменении положения тела и передних конечностей, с характерным положительным предсердным зубцом Р (Р1 - 0,4±0,1; Р2 - 1,8±0,1; Р3 - 1,5±0,1), начальной желудочковой активностью в виде небольшого зубца r (r1 - 1,5±0,2; r2 - 3,3±0,5; r3 - 3,5±0,5) и глубокого зубца S (S1 - 1,8±0,4; S2 - 14,0±0,8; S3 - 14,3±0,7), а также положительного зубца Т (Т1 - 0,7±0,13; Т2 - 5,2±0,5; Т3 - 5,1±0,5).
- Морфологические изменения сердца у телят при миокардиодистрофии характеризуются сочетанием гидропической дистрофии с очажками лизиса кардиомиоцитов, длительно существующим венозным полнокровием.
- Применение препарата пуриветин новорожденным телятам при гепатозе и миокардиодистрофии улучшает проводимость миокарда, повышает сохранность животных до 100% и прирост массы тела на 7,6%, нормализует гематологический (увеличение количества эритроцитов до 6,18±0,21·1012/л, гемоглобина до 109,3±3,5г/л), биохимический (снижение общего билирубина до 4,98±0,17мкмоль/л, активности АсАТ до 173±8нмоль/сл и АлАТ до 143±7нмоль/сл) и иммунологический статус телят (понижение титров антител к тканям печени до 1:8 у 25% и 1:16 у 75% телят, увеличение Т-лимфоцитов до 28,9±0,65% и уменьшение В-лимфоцитов до 6,45±0,46%, при снижении ЦИК С3 до 8±0,29Ед.Оп. и С4 до 8,73±0,29Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 8,03±0,69мг/мл).
- Назначение пуриветина клинически здоровым новорожденным телятам в первые 20 дней жизни в дозе 20мг/кг массы тела профилактирует нарушение метаболических функций печени, способствует повышению неспецифической резистентности организма и среднесуточного прироста на 11,6%.
- Экономическая эффективность при применении пуриветина с лечебной целью составляет 36 руб., а с профилактической 10,1руб. на 1 руб. затрат.
4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
- В качестве диагностических критериев гепатоза новорожденных телят считать установление антител к тканям печени в титре 1:32, увеличение циркулирующих иммунных комплексов С3 до 9,38±0,42Ед.Оп. и С4 до 10,51±0,31Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 22,06±0,92мг/мл при снижении абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов соответственно до 24,97±0,7% и 1,1±0,04109/л и В-лимфоцитов соответственно до 8,04±0,4% и 0,36±0,03109/л.
- При гепатозе для коррекции функции печени и сердца новорожденным телятам применять пуриветин по схеме: первые 5 дней — 40мг/кг, 5 дней — 30мг/кг и последние 10 дней — 20мг/кг.
- Для профилактики гепатоза и миокардиодистрофии, а также для стимулирования роста животных рекомендуется назначать пуриветин клинически здоровым новорожденным телятам в первые 20 дней жизни в дозе 20мг/кг массы тела.
- Приведенные в работе нормативы ЭКГ (таблица 1, 2) рекомендуются в качестве диагностических тестов при оценке функционального состояния сердечно-сосудистой системы и диагностики нарушений функции миокарда у телят. Обнаружение признаков электрической нестабильности миокарда у новорожденных телят должно рассматриваться как показание для назначения кардиопротекторной и метаболической терапии.
5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ
ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
- Никулин И.А. Взаимосвязь уровня аутоиммунизации с иммунологическим статусом коров при гепатозе / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, М.Ю. Нижегородов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины // Матер. междунар. науч.-практ. конф. посвящ. 75-летию УГАВМ: Сб. науч. тр. — Троицк: УГАВМ, 2005 — С.93-95.
- Никулин И.А. Клинико-иммунологический статус коров при гепатозе / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, М.Ю. Нижегородов // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: Матер. Сиб. Междунар. вет. конгр. / Новосиб. гос. аграр. ун-т. — Новосибирск, 2005. — С.324-325.
- Никулин И.А. Применение пуриветина для лечения гепатоза новорожденных телят / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин // Ветеринарный врач, — №1. — 2007. — С.37-39.
- Никулин И.А. Сопоставление электрокардиограммы и морфологии сердца при миокардиодистрофии у телят / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, К.О. Зернов // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. Междунар. науч.-производ. конф., посвящ. 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А. — Воронеж: Научная книга, 2006. — С.172-176.
- Паршин П.А. Сравнительная оценка способов записи электрокардиограмм у телят / П.А. Паршин, И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, В.И. Паршина // Ветеринарная патология, — №1(20). — 2007. — С.59-61.
- Патент №2280867 Российская Федерация, МПК G01N 33/49, G01N 33/556. Способ приготовления эритроцитарного диагностикума для определения антител к тканям печени / Никулин И.А., Шумилин Ю.А.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО ВГАУ им. К.Д. Глинки. — №2004138524/15; заявл. 28.12.2004; опубл. 27.07.2006. Бюл. №21. — 4с.
- Патент №2292840 Российская Федерация, МПК A61B 5/0468, A61B 5/0472, A61B 5/0402. Способ электрокардиографической диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят / Никулин И.А., Шумилин Ю.А.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО ВГАУ им. К.Д. Глинки. — №2005128691/13; заявл. 14.09.2005; опубл. 10.02.2007. Бюл. №4. — 8с.
- Шумилин Ю.А. К вопросу о методике регистрации электрокардиограммы у телят / Ю.А. Шумилин // Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки: Матер. межрегиональной науч.-практ. конф. молодых ученых. – Ч.II. — Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2005. — С.172-175.
- Шумилин Ю.А. Опыт профилактики гепатоза телят / Ю.А. Шумилин // Актуальные проблемы диагностики, терапии и профилактики болезней животных: Матер. международной науч.-практ. конф. молодых ученых. — Воронеж: ВНИВИПФиТ, 2006. — С.122-124.
