Сана диагностическое и прогностическое значение маркеров неоангиогенеза у больных ишемической болезнью сердца
На правах рукописи
Эль – Бустани Сана
Диагностическое и прогностическое ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ НЕОАНГИОГЕНЕЗА
У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
14.03.10 - КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА
14.01.05 - КАРДИОЛОГИЯ
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Москва - 2011
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении
дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия последипломного образования Росздрава» и в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования
«Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию
Научные руководители:
Доктор медицинских наук, профессор Долгов Владимир Владимирович
Доктор медицинских наук Шевченко Алексей Олегович
Официальные оппоненты:
Доктор биологических наук, профессор Савина Марина Ивановна
Доктор медицинских наук, профессор Погосова Гоар Вачиковна
Ведущая организация:
Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН
Защита диссертации состоится «24» января 2011 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.08 при Российском государственном медицинском университете по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского государственного медицинского университета по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1
Автореферат разослан «24»декабря 2010 г.
Ученый секретарь диссертационного совета
д.м.н., профессор А.К. Рылова
Актуальность исследования
Сердечно-сосудистые заболевания остаются наиболее частой причиной утраты трудоспособности и смертности населения в большинстве стран мира. Согласно современным представлениям, атеросклероз является воспалительным заболеванием сосудистой стенки, в его инициации и развитии участвуют клетки иммунной системы и выделяемые ими цитокины, хемокины, молекулы адгезии и другие медиаторы.
В последние годы много исследований посвящено изучению лабораторных маркеров, способных отражать активность процессов, происходящих в стенке сосуда и приводящих к прогрессированию атеросклероза, развитию тяжелых, угрожающих жизни осложнений. К числу перспективных, но мало изученных лабораторных маркеров относят маркеры неоангиогенеза.
Неоангиогенез при ишемической болезни сердца является своеобразной защитной реакцией, индуцируемой гипоксией, гемодинамическим напряжением на сосудистую стенку и локальным воспалительным процессом (Henry T.D., Annex B.N.,et al.,1999; Luttun A., Tjwa M, Moons L.,et al., 2002). С другой стороны, неоангиогенез способствует прогрессированию атеросклеротической бляшки и является ключевым фактором, приводящим к ее дестабилизации и повреждению. Отдельные ангиогенные факторы сами по себе могут вносить существенный вклад в прогрессирование атеросклероза (Tjwa M., Luttun A.,Autiero M., et al.,2003). К числу факторов, непосредственно участвующих в регуляции ангиогенеза, относятся плацентарный фактор роста (PlGF) и трансформирующий фактор роста (TGF-).
PlGF является гликопротеином с молекулярной массой 46-50 кДа, членом семейства VEGF – факторов роста эндотелия сосудов. Он был открыт в 1991 году в ткани плаценты, откуда и получил свое название. В дальнейшем было показано, что PlGF вырабатывается эндотелиоцитами сосудов любой локализации в ответ на стимуляцию ФНО- (Hermann D.,et al., 2001). PlGF привлекает особое внимание исследователей как первичный стимулятор неоангиогенеза и потенциальный маркер острого коронарного синдрома (ОКС) (Pipp F., Heil M., et al., 2003).
На основании результатов исследований последних лет к числу косвенных маркеров неоангиогенеза был отнесен также острофазный белок плазмы крови гаптоглобин. Гаптоглобин играет важную роль в процессах, связанных с активацией неоангиогенеза (Moreno P.R., Levy A.P. 2006). Новообразованные микрососуды часто являются источником кровоизлияний внутрь атеросклеротической бляшки, приводящих к быстрому увеличению ее размера или повреждению. Гемоглобин, освободившийся при разрушении эритроцита, индуцирует оксидативное повреждение тканей, активирует воспаление и неоангиогенез. Гаптоглобин, формируя устойчивый комплекс с гемоглобином, участвует в первичном механизме защиты тканей от повреждения.
У больных атеросклерозом коронарных и периферических артерий уровень гаптоглобина выше, чем у здоровых лиц, однако клиническое значение PIGF и гаптоглобина при ИБС изучено мало.
Цель исследования.
Определить диагностическое и прогностическое значение плацентарного фактора роста и гаптоглобина у больных ИБС.
Задачи исследования.
- Провести сравнительный анализ содержания PlGF в плазме крови больных различными формами ишемической болезни сердца и у здоровых лиц; оценить связь уровня PlGF с клиническими и лабораторными данными у больных ИБС.
- Оценить связь уровней PlGF и TGF- в плазме крови больных ИБС с показателями ремоделирования периферических артерий – толщиной комплекса интима-медиа общей сонной артерии и упругостью (растяжимостью) стенки сонных артерий.
- Провести сравнительный анализ содержания гаптоглобина в плазме крови больных различными формами ишемической болезни сердца и у здоровых лиц; оценить связь уровня гаптоглобина с клиническими и лабораторными данными у больных ИБС.
- Оценить динамику гаптоглобина у больных ИБС в течение 2-х недель после развития острого коронарного синдрома.
- Проследить связь уровней PlGF и гаптоглобина с выживаемостью без нежелательных сердечно-сосудистых событий в течение 2-х лет наблюдения у больных ИБС.
- Изучить уровни PlGF и гаптоглобина в плазме крови и прогностическое значение этих маркеров у реципиентов сердечного аллотрансплантата.
- Оценить динамику концентрации PlGF и гаптоглобина у больных ИБС в условиях терапии симвастатином.
Научная новизна исследования.
Впервые изучено содержание PlGF и гаптоглобина в плазме крови больных различными клиническими формами ИБС и установлено, что у больных с острым коронарным синдромом уровень маркеров неоангиогенеза выше, чем у больных со стабильными формами ишемической болезни сердца.
Новыми являются данные о связи концентрации факторов роста – плацентарного фактора роста PlGF и трансформирующего фактора роста TGF- с показателями ремоделирования артериальной стенки при атеросклерозе – толщиной комплекса интима-медиа общей сонной артерии (ТИМ ОСА) и индексом растяжимости (упругости) стенки артерии у больных ИБС.
Впервые установлено неблагоприятное влияние высоких уровней PlGF и гаптоглобина на выживаемость без нежелательных сердечно-сосудистых событий у больных с различными формами ИБС и у реципиентов сердечного трансплантата.
Впервые установлено прогностическое значение гаптоглобина при остром коронарном синдроме в отношении ближайшего (14 дней) прогноза.
Практическая значимость исследования.
Практическое значение имеют сформулированные в ходе исследования рекомендации по использованию тестов на P1GF и гаптоглобин при прогнозировании, наблюдении и лечении больных ИБС. Результаты исследования могут служить основанием для выявления больных с повышенным риском острых атеротромботических событий.
Определение повышенного уровня PlGF в плазме крови может служить диагностическим признаком активности сосудистого воспаления и нестабильных форм ИБС, является предиктором неблагоприятного сосудистого прогноза у больных ИБС и реципиентов трансплантированного сердца. Измерение содержания PlGF в плазме крови может играть важную роль в стратификации риска у больных ИБС и указывать на необходимость коррекции проводимого лечения.
Положения, выносимые на защиту
- Участие факторов роста – маркеров неоартериогенеза плацентарного фактора роста PlGF и трансформирующего фактора роста TGF- в ремоделировании стенки артерий при атеросклерозе, что подтверждается связью концентраций указанных факторов с толщиной комплекса интима- медиа общей сонной артерии и индексом растяжимости (упругости) артериальной стенки у больных ИБС.
- Величина концентрации PlGF независимо определяет риск развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ИБС и реципиентов трансплантированного сердца.
- Уровень гаптоглобина, независимо от других факторов риска, определяет ближайший (14 дней) и отдаленный (2 года) прогноз у больных ОКС.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, из них 5 статей в центральных рецензируемых журналах.
Апробация работы.
Апробация работы состоялась 17 марта 2010 г. на совместной конференции кафедры клинической лабораторной диагностики ГОУ ДПО Российской медицинской академии последипломного образования, кафедры кардиологии факультета усовершенствования врачей ГОУ ВПО Российского государственного медицинского университета и лаборатории клинической и экспериментальной биохимии ФГУ Федерального научного центра трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова. Материалы и основные положения работы доложены и обсуждены: на Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 9-11 октября 2007 г.), Национальных днях лабораторной медицины России (Москва, 7-9 октября 2008 г.), IV, V Всероссийских съездах трансплантологов (Москва, 9-10 ноября 2008 г., 8-10 октября 2010 г.), II научно-образовательном форуме «Медицинская диагностика» (Москва, 25-27 мая 2010 г.).
Объем и структура диссертации.
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, характеристики больных и методов исследования, 3 глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов и заключения, 7 выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 227 ссылок, в том числе 49 на русском и 178 на иностранных языках. Работа изложена на 127 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 24 рисунками.
Материалы и методы исследования.
Работа основана на анализе данных, полученных при обследовании 230 лиц (83 женщин и 147 мужчин) в возрасте от 20 до 86 лет (средний возраст составил 60.9±7.6 лет), добровольно изъявивших желание участвовать в данном исследовании.
Характеристика обследованных пациентов
В исследование включено 156 больных ИБС в возрасте от 42 до 86 лет. Среди них стабильная стенокардия напряжения (CC) отмечалась у 96 больных, острый коронарный синдром (ОКС) - у 60: нестабильная стенокардия (НС) - у 40, инфаркт миокарда (ИМ) - у 20 больных. Обследование и лечение больных осуществлялось на кафедре кардиологии Факультета усовершенствования врачей РГМУ, на базе клинической больницы Управления делами Президента РФ и кафедре клинической лабораторной диагностики РМАПО.
У 40 лиц клинических признаков атеросклеротического поражения коронарных, сонных артерий, а также артерий конечностей выявлено не было, эти обследуемые составили группу сравнения.
В исследование также включены 34 реципиента трансплантированного сердца, обследование и лечение которых проводилось в ФГУ ФНЦ трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова Министерства здравоохранения и социального развития РФ.
В исследование не включались лица моложе 20 лет, беременные, а также больные острыми или с обострениями хронических воспалительных, аутоиммунных и инфекционных заболеваний в течение менее 4-х недель после наступления ремиссии; с тяжелыми поражениями печени и/или почек; декомпенсированным сахарным диабетом; выраженной сердечной недостаточностью.
Обследование больных включало: общее клиническое обследование (жалобы, осмотр, анамнез заболевания, анамнез жизни, клинический и биохимический анализы крови, исследование содержания липидов, коагулограммы (у больных с НС и ИМ); ЭКГ в 12 отведениях; нагрузочную пробу на велоэргометре по стандартной методике для выявления ИБС и оценки толерантности к физической нагрузке; эхокардиографическое исследование с цветным допплеровским картированием; ультразвуковое дуплексное сканирование с измерением толщины комплекса интима - медиа сонных артерий сосудов шеи проведено у 199 больных на аппаратах «Accuson - 512» (США) и «Logic-400» (Германия), селективное коронароангиографическое исследование; компьютерную томографию шеи и головы (63 пациентам).
Для измерения толщины комплекса интима-медиа (ТИМ) использовали изображение общей сонной артерии (ОСА) в продольном сечении в дистальной трети. ОСА сканировали в В-режиме с цветовым доплеровским картированием потока. ТИМ измеряли по задней стенке сонной артерии на расстоянии 1,5 - 2 см ниже области бифуркации путем установки ультразвукового курсора на границу раздела адвентиция-медиа и интима-просвет артериальной стенки. Показатель растяжимости общей сонной артерии оценивался как отношение изменения диаметра общей сонной артерии в систолу и диастолу сердца к разнице систолического и диастолического давления.
Статистическая обработка результатов исследования производилась с использованием пакета прикладных программ для научно-технических расчетов SPSS 11.5 (LEAD Technologies Inc., США). Достоверность различий количественных параметров в двух группах определялась по t-критерию Стьюдента (для признаков с нормальным распределением). Для оценки связи количественных и качественных признаков рассчитывали коэффициент ранговой корреляции Спирмана. Для оценки выживаемости без нежелательных событий применялся метод регрессионного анализа выживаемости Каплана-Мейера.
Лабораторные исследования
В качестве материала для исследования использовали венозную кровь. Обязательными условиями для взятия всех образцов являлись отсутствие обострения хронических или острых инфекционных заболеваний, травм в течение, по крайней мере, 4 предыдущих недель. Больным НС все лабораторные исследования проводились не позже, чем через 10 дней от последнего ангинозного приступа в покое, а больным ИМ – не позже, чем через 10 дней от даты развития ИМ.
Методом иммуноферментного анализа определяли концентрацию PlGF («R&D Systems», США), TGF- («Bender MedSystems», Австрия), неоптерина («IBL», Германия), гомоцистеина (ГЦ, «Axis-Shield», Германия-Норвегия).
Определение концентрации С-реактивного белка и гаптоглобина проводили методом иммунотурбидиметрии в микропланшетном формате с использованием наборов реагентов «Aptec Diagnostics nv», (Бельгия).
Результаты исследования
Изучение содержания PlGF у больных ИБС и его связи с клиническими и лабораторными данными.
Значения уровней PlGF в плазме крови всех обследуемых находились в пределах от 7 до 50 пг/мл, в среднем 14.3±8.5 пг/мл. Медиане распределения соответствовало значение 8 пг/мл, верхней границе первого квартиля распределения соответствовало значение 7.5 пг/мл, верхней границе третьего квартиля – 20.5 пг/мл.
У здоровых лиц, больных стабильной стенокардией напряжения, больных нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда уровни PlGF в крови составили соответственно 9.9±3.7 пг/мл, 12.2±6.6 пг/мл, 15.5±8.5 пг/мл и 15.1±10.9 пг/мл (Рисунок 1.).
Рис.1. Уровни PlGF у больных с разными формами ИБС и у лиц без ИБС.
* p<0,05
При этом у больных нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда уровни PlGF были достоверно выше, чем у больных стабильной стенокардией напряжения и у здоровых лиц.
Уровни PlGF в крови не зависели от возраста и пола исследуемых лиц, индекса массы тела, содержания липидов крови, среднего уровня систолического и диастолического АД, сахарного диабета 2-го типа, наличия в анамнезе перенесенного инфаркта миокарда или нарушения мозгового кровообращения. Не было выявлено зависимости между уровнями PlGF и уровнями С-реактивного белка, но обнаружена корреляция уровня PlGF с уровнями гаптоглобина (r=0.34, p=0.028), гомоцистеина (r=0.455, p=0.043) и неоптерина (r=0.31, p=0.048).
У больных стабильной стенокардией напряжения выявлена положительная статистически достоверная корреляция между уровнями PlGF в плазме крови и толщиной комплекса интима-медиа общей сонной артерии (r=0.2, p=0.01). Анализ показал, что у больных с низкими (7.5 пг/мл и меньше) и средними (от 7.6 до 20.5 пг/мл) уровнями PlGF в крови толщина комплекса интима-медиа общей сонной артерии не отличается, но она достоверно меньше, чем у больных с высокими (более 20.5 пг/мл) уровнями PlGF в крови (0.95±0.38 против 0.98±0.41 и 1.25±0.43 мм, соответственно, рисунок 2).
Рис. 2. Связь уровней PlGF в плазме крови больных стабильной стенокардией и ТИМ ОСА.
*-p<0.05
Оценивался также показатель растяжимости общей сонной артерии: как отношение изменения диаметра общей сонной артерии в систолу и диастолу сердца к разнице систолического и диастолического давления (Рисунок 3).
Рис. 3. Определение показателя растяжимости стенки общей сонной артерии.
Уровень фактора роста TGF- положительно коррелирует с коэффициентом упругости артериальной стенки (Рисунок 4).
Рис. 4. Связь уровней TGF- в плазме крови и коэффициента растяжимости (упругости) сонной артерии.
В таблице 1 представлена оценка клинической эффективности теста на PlGF у всех больных ИБС и отдельно у больных острым коронарным синдромом. При оценке диагностического значения PlGF при ИБС за верхнюю границу была принята медиана распределения уровня PlGF у больных ИБС - 8 пг/мл.
Таблица 1.
Диагностическое значение РlGF у больных ИБС и при
болезни коронарных артерий пересаженного сердца
| Показатели клинической эффективности теста | Диагностическое значение | |
| ИБС | ОКС | |
| Диагностическая чувствительность | 61% | 87% |
| Диагностическая специфичность | 62,5% | 82,5% |
| Диагностическая значимость положительных результатов | 53,5% | 79,5% |
| Диагностическая значимость отрицательных результатов | 57% | 90% |
Результаты проведенного исследования показали, что PlGF является независимым от других факторов риска маркером ОКС. Увеличение показателя толщины интима – медиа и уменьшение показателя растяжимости стенки сонной артерии являются следствием длительного воздействия факторов риска и отражают степень нежелательного ремоделирования периферических артерий, то есть степень выраженности атеросклероза. Полученные данные указывают на участие PlGF в процессах ремоделирования артериальной стенки при атеросклерозе.
Изучение содержания гаптоглобина у больных ИБС и его связи с клиническими и лабораторными данными.
Средние значения уровней гаптоглобина у всех обследованных составили 0.64±0.65 г/л (от 0.12 до 3.7 г/л). Верхние границы I-го, II-го и III-го квартилей распределения составили 0.25, 0.35, и 0.75 г/л, соответственно. Уровни гаптоглобина не зависели от пола, уровней липидов в крови, наличия сахарного диабета и артериальной гипертонии. Выявлена статистически достоверная слабая отрицательная зависимость уровней гаптоглобина в плазме крови от возраста (r=-0.18, p=0.011).
Уровни гаптоглобина у лиц без ИБС были достоверно ниже, чем у больных ИБС (0.47±0.16 против 0.79±0.51, соответственно, p=0.04), но не отличались у больных разными формами ИБС (Рисунок 5).
Рис. 5. Уровни гаптоглобина в плазме крови у лиц без ИБС и больных с разными формами ИБС.
* p < 0,05
В таблице 2 представлена оценка клинической эффективности теста на гаптоглобин у всех больных ИБС и больных острым коронарным синдромом.
Таблица 2.
Диагностическое значение гаптоглобина у больных ИБС
| Показатели клинической эффективности теста | Диагностическое значение | |
| ИБС | ОКС | |
| Диагностическая чувствительность | 88% | 77% |
| Диагностическая специфичность | 79,5% | 75,5% |
| Диагностическая значимость положительных результатов | 85,5% | 72,5% |
| Диагностическая значимость отрицательных результатов | 91% | 79% |
При оценке диагностического значения гаптоглобина при ИБС за верхнюю границу была принята медиана распределения уровня гаптоглобина у больных ИБС – 0,65 г/л.
Динамика уровней гаптоглобина у больных острым коронарным синдромом с рецидивом стенокардии в стационаре.
Среди больных острым коронарным синдромом, у которых исходно были определены уровни гаптоглобина, у 35 была НС, у 16 – ИМ. У 12 больных (7 больных НС, 5 больных ИМ) во время нахождения в стационаре возникали ангинозные приступы, сопровождавшиеся изменениями на ЭКГ. У остальных больных на фоне принимаемого лечения рецидивов приступов стенокардии не отмечалось. У больных ОКС с рецидивом приступов стенокардии через 14 дней отмечалось достоверное увеличение уровней гаптоглобина в плазме крови по сравнению с исходными показателями (0.59±0.22 против 1.24±0.46 г/л, соответственно, p<0.01), в то время как у больных ОКС без рецидива стенокардии уровни гаптоглобина, измеренные при поступлении в стационар и через 2 недели, достоверно не отличались (0.66±0.34 и 0.62±0.27 г/л, соответственно, p>0.05) (Рисунок 6).
Рис. 6. Изменения уровней гаптоглобина в течение 2 недель у больных острым коронарным синдромом с рецидивом и без рецидива стенокардии.
А – Исходно Б – Через 2 недели
* - р<0,01 в сравнении с исходным уровнем
Таким образом, определение концентрации гаптоглобина у больных ОКС в стационаре имеет практическое значение: повышение уровня гаптоглобина может указывать на риск рецидива стенокардии в течение ближайших 14 дней.
Связь уровней PlGF с отдаленным прогнозом у больных ИБС.
Результаты настоящего исследования показали, что у больных ИБС повышена концентрация PlGF и гаптоглобина. Поскольку эти показатели не зависели от традиционных факторов риска, их измерение может дать дополнительную информацию о вероятности нежелательных событий. В связи с этим, следующим этапом работы было изучение связи уровней PlGF в крови и отдаленного прогноза.
Для изучения связи уровней PlGF в плазме крови и отдаленного прогноза больные ИБС были разделены на 3 подгруппы. В состав I-ой подгруппы вошли больные с уровнями PlGF 7.5 пг/мл и ниже, во II-ую – больные с уровнями PlGF от 7.6 до 20.5 пг/мл (врехняя граница третьего квартиля распределения значений уровней PlGF), и в III-ю подгруппу – больные с уровнями PlGF более 20.5 пг/мл. В качестве нежелательных сердечно-сосудистых событий учитывали смерть от сердечно-сосудистых причин, развитие нефатального ИМ, НС, снижение толерантности к физической нагрузке.
Среди больных из I-й подгруппы с низким уровнем PlGF в крови нежелательные события отмечались у 3 из 26 больных, во II-й подгруппе со средними уровнями PlGF в крови нежелательные события имели место у 4 из 18 больных, и в III-й подгруппе с высокими уровнями PlGF - у 8 из 21 больных. В I-ой, II-ой и III-ей подгруппах средняя продолжительность периода до наступления нежелательных событий составила 1038±56 дней (95% ДИ: 927-1148), 729±55 дней (95% ДИ: 621-837) и 578±63 дня (95% ДИ: 456-700 дней), соответственно; все различия статистически достоверны.
Сравнение кривых выживаемости без нежелательных событий в исследуемых подгруппах при помощи логрангового метода показало, что прогноз у больных с низкими уровнями PlGF в крови достоверно лучше, чем у больных с высокими уровнями в крови этого маркера (p=0.038) (Рисунок 7).
Рис. 7. PlGF и прогноз у больных стабильной стенокардией
Связь уровней гаптоглобина с прогнозом у обследуемых больных.
Сто восемнадцать больных ИБС (72 больных СН и 46 больных ОКС), у которых при первичном обследовании определены уровни гаптоглобина, находились под наблюдением в течение 2 лет. С целью изучения влияния уровней гаптоглобина на прогноз, больные были разделены на подгруппы с высокими (>0.35 г/л) и низкими (<0.35 г/л) уровнями этого маркера. В качестве пограничного значения была взята медиана распределения значений уровней гаптоглобина в крови у исследуемых лиц. Период наблюдения составил, в среднем, 503±259 (18-849) дней с момента включения в исследование. Из обследуемых лиц трое больных умерло от сердечно-сосудистых заболеваний, у двух развился нефатальный инфаркт миокарда, у трех - НС, 4 были госпитализированы в стационар в связи со снижением толерантности к физической нагрузке, 5 больных - госпитализированы по экстренным показаниям для проведения лечебных мероприятий, не связанных с сердечно-сосудистыми заболеваниями.
Среди больных, первоначально включенных в исследование со СС, в подгруппе с низкими уровнями гаптоглобина в крови (<0.35 г/л) (n=41) отмечалось 3 нежелательных события (у одного больного развилась НС, 2 были госпитализированы в связи с прогрессированием стенокардии напряжения). В подгруппе больных с высокими уровнями гаптоглобина в крови (>0.35 г/л) (n=31) произошло 2 нежелательных события (один больной умер, один был госпитализирован в связи с прогрессированием стенокардии напряжения). Анализ выживаемости с использованием метода Каплана-Мейера показал, что средний период времени выживаемости без нежелательных событий в подгруппе больных с низкими уровнями гаптоглобина достоверно не отличается от такового показателя в группе больных с высокими уровнями гаптоглобина (763±22 дня против 756±31 день, соответственно, p=0.2). При этом, средняя выживаемость в подгруппе больных с низкими уровнями гаптоглобина оказалась достоверно выше, чем в подгруппе больных с высокими уровнями гаптоглобина (0.91±0.05 против 0.83±0.09, соответственно, p=0.013). Сравнение выживаемости без нежелательных событий при помощи логрангового критерия не выявило достоверных различий между двумя этими подгруппами (Рисунок 8).
Рис. 8. Выживаемость без нежелательных событий в зависимости от уровней гаптоглобина у больных стенокардией напряжения.
Среди больных, у которых при первичном обследовании был ОКС, в подгруппе, состоящей из больных с низкими уровнями гаптоглобина (<0.35 г/л) в течение периода наблюдения нежелательных событий не отмечалось. В то же время, среди больных с высокими уровнями гаптоглобина в крови (n=31) произошло 6 нежелательных событий: двое больных умерло, у одного больного развился ИМ, у двоих – НС, один больной был госпитализирован в связи с прогрессирующим снижением толерантности к физической нагрузке. Средняя выживаемость без нежелательных событий в подгруппе больных с высокими уровнями гаптоглобина составила 0.79±0.08, средний период выживаемости без нежелательных событий – 699±55 дней. Сравнение кривых выживаемости без нежелательных событий при помощи логрангового критерия показало, что у лиц, первоначально госпитализированных с ОКС с низкими уровнями гаптоглобина, отдаленный прогноз достоверно лучше (p<0.01) (Рисунок 9).
Рис. 9. Выживаемость без нежелательных событий в зависимости от уровней гаптоглобина у больных острым коронарным синдромом.
Связь уровней PlGF с частотой последующих сердечно-сосудистых событий у реципиентов трансплантированного сердца.
У реципиентов трансплантированного сердца, для которых болезнь коронарных артерий трансплантата является главной причиной заболеваемости и смертности, также установлено, что уровень PlGF является независимым фактором риска развития коронарной болезни трансплантата и сердечно-сосудистых осложнений. Диагностическая чувствительность теста на PlGF у реципиентов сердца с болезнью коронарных артерий составила 85%, диагностическая специфичность – 80,5%. При оценке диагностической значимости PlGF при развитии болезни коронарных артерий трансплантата за верхнюю границу была принята медиана распределения уровня PlGF у реципиентов сердца – 12 пг/мл. Более высокий уровень PlGF у больных до трансплантации, а также в первый год после трансплантации был связан с большей частотой последующих сердечно-сосудистых осложнений (Рисунок 10).
Рис. 10. Уровни PlGF до трансплантации сердца и риск нежелательных событий у больных после трансплантации.
Для гаптоглобина прогностического значения у реципиентов сердца не выявлено.
Влияние статинов на уровни PlGF и гаптоглобина при лечении больных ИБС.
Одной из задач настоящего исследования было изучение влияния статинов на уровни PlGF и гаптоглобина при лечении больных ИБС.
При включении в исследование 32 обследуемым, при наличии показаний был назначен симвастатин в дозе 20 мг/сут. При повторных анализах крови, выполненных через 2, 6 и 12 недель после начала приема препарата, достоверных изменений в уровнях PlGF и гаптоглобина выявлено не было, ни у больных, получавших симвастатин, ни у 32 больных группы сравнения, не получавших гиполипидемическую терапию (рисунок 11).
Рис. 11. Динамика изменений уровней гаптоглобина у лиц, принимавших симвастатин, и в группе сравнения.
Исходные уровни липидов в группе пациентов, получавших симвастатин, и в группе сравнения не отличались. У больных, получавших симвастатин, достоверные изменения уровней липидов в крови выявлены после 6 недель от начала приема препарата, в последующем липидный профиль достоверно не изменялся (Таблица. 3).
Таблица 3.
Динамика липидного профиля сыворотки крови
на фоне приема симвастатина
| Показатель моль/л М±m | исходно | Через 2 недели | Через 6 недель | Через 12 недель |
| ОХс, моль/л | 7,2 ± 1,0 | 6,3 ± 1,0 | 5,3 ± 1,0* | 5,1 ± 0,8* |
| ХсЛНП, моль/л | 4,9 ± 1,0 | 3,7 ± 0,9 | 2,8 ± 0,8* | 2,4 ± 0,3* |
| ХсЛВП, моль/л | 1,2 ± 0,3 | 1,1 ± 0,6 | 1,3 ± 0,3 | 1,6 ± 1,0 |
| ТГ, моль/л | 2,5 ± 1,2 | 2,1 ± 0,7 | 1,1 ± 1,0* | 1,5 ± 0,2* |
* - р < 0,01 в сравнении с исходным уровнем
ОХс – общий холестерин
ХсЛНП – холестерин липопротеинов низкой плотности
ХсЛВП – холестерин липопротеинов высокой плотности
ТГ - триглицериды
Противовоспалительный эффект симвастатина выявлялся уже через 2 недели по снижению концентрации С-реактивного белка. Очевидно, имеют место различные механизмы влияния статинов на маркеры воспаления и неоангиогенеза, возможно, необходимо более длительное время для их проявления.
Результаты настоящей работы показывают, что PlGF, играющий роль первичного воспалительного медиатора неоангиогенеза, и гаптоглобин, участвующий в процессах, связанных с активацией неоангиогенеза, являются маркерами, отражающими активность, и факторами, влияющими на ключевые механизмы дестабилизации атеросклеротической бляшки. Определение их уровней в крови может способствовать выявлению лиц с высоким сердечно-сосудистым риском.
Выводы:
- Концентрация PlGF в плазме крови больных острым коронарным синдромом выше, чем у пациентов со стабильной стенокардией напряжения и здоровых лиц. Уровень PlGF у больных ИБС не связан с традиционными факторами риска - полом, возрастом, индексом массы тела, наличием сахарного диабета II типа и гипертонической болезни, концентрацией липидов, но коррелирует с концентрацией гомоцистеина, неоптерина и гаптоглобина.
- Выявленная зависимость толщины комплекса интима-медиа общей сонной артерии от уровня PlGF в плазме крови и связь индекса растяжимости (упругости) артериальной стенки с концентрацией трансформирующего фактора роста (TGF-) указывает на участие факторов роста - маркеров неоартериогенеза в ремоделировании артериальной стенки при атеросклерозе.
- Уровень гаптоглобина в плазме крови больных ИБС выше, чем у здоровых лиц, но не различается у больных стабильной стенокардией напряжения, нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда. Содержание гаптоглобина у больных ИБС не зависит от пола, возраста, уровня липидов, наличия сахарного диабета II типа, гипертонической болезни, толщины комплекса интима-медиа общей сонной артерии, но коррелирует с уровнем PlGF и гомоцистеина.
- После развития острого коронарного синдрома уровень гаптоглобина повышался у больных с возникновением рецидива стенокардии на фоне медикаментозного лечения в течение 2-х недель в стационаре, но оставался стабильным у больных острым коронарным синдромом без рецидива стенокардии.
- У больных ИБС наличие высокого уровня PlGF в плазме крови (более 20,5 пг/мл) связано с неблагоприятным отдалённым прогнозом. У больных острым коронарным синдромом при наличии высокого уровня гаптоглобина (больше 0,35г/л) отдалённый прогноз хуже, чем у больных острым коронарным синдромом с низким (менее 0,35г/л) уровнем.
- PlGF является независимым фактором риска развития болезни коронарных артерий трансплантированного сердца. Величина уровня PlGF до трансплантации прямо связана с частотой последующих сердечно-сосудистых осложнений у реципиента после трансплантации сердца.
- У больных ИБС на фоне приёма симвастатина в дозе 20 мг в сутки не выявлено снижения уровней PlGF и гаптоглобина в плазме крови в течение 12 недель от начала лечения, при этом противовоспалительное действие препарата выявляется по снижению уровня С-реактивного белка через 2 недели, гиполипидемическое – через 6 недель от начала лечения.
Практические рекомендации:
- У больных ИБС целесообразно определение концентрации PlGF в плазме крови. Высокий уровень PlGF (> 20,5 пг/мл) связан с высоким риском развития нежелательных сердечно-сосудистых событий в течение ближайших 2 лет.
- У реципиентов трансплантированного сердца наличие высокого уровня PlGF до трансплантации связано с высоким риском развития сердечно-сосудистых осложнений после трансплантации.
- У больных острым коронарным синдромом целесообразно определять уровень гаптоглобина и его динамику. Повышение уровня в течение последующих 2 недель связно с риском рецидива стенокардии: стабильный уровень связан с благоприятным ближайшим прогнозом.
- Величина уровня гаптоглобина определяет отдаленный прогноз у больных острым коронарным синдромом: высокий уровень (> 0,35 г/л) связан с неблагоприятным прогнозом.
Список работ, опубликованных по теме диссертации.
- Шевченко А.О., Эль-Бустани С. Плацентарный фактор роста – маркер неоартериогенза у больных ИБС.- Лаборатория. - 2007.- №4.- С.3-5.
- Шевченко А.О., Шевченко О.П., Эль-Бустани С., Князев А.Н. Маркер неоартериогенеза PlGF коррелирует с толщиной комплекса интима-медиа общей сонной артерии и отдаленным прогнозом у больных ИБС. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2007.- 6(5).- С.340-341.
- Шевченко А.О., Эль-Бустани С., Орлова О.В., Шевченко О.П. Клиническое значение острофазного белка гаптоглобина у больных ИБС. - Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2007.- 6(5).- С.341
- Бугров А.В., Долгов В.В., Ракова Н.Г., Эль-Бустани С., Шевченко О.П. Иммуноферментный анализ ассоциированного с беременностью белка плазмы крови А (РАРР-А) у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями. - Клиническая лабораторная диагностика. – 2008. - №.9 – С.24-25.
- Шевченко А.О., Орлова О.В., Казаков Э.Н., Кормер А.Я., Эль-Бустани С., Шевченко О.П. Плацентарный фактор роста (PlGF) – маркер неоартериогенеза у больных ИБС и реципиентов сердца.– в материалах IV Всероссийского съезда трансплантологов, 9-10 ноября, 2008г. - С.33-34.
- Шевченко О.П., Орлова О.В., Эль-Бустани С. и соавт. Клиническое значение маркера неоартериогенеза - плацентарного фактора роста PlGF у реципиентов трансплантированного сердца. - Вестник трансплантологии и искусственных органов – 2009. - №3.– С.88-95.
- Шевченко А.О., Эль-Бустани С., Гинзбург Ю.С. и соавт. Плацентарный фактор роста PLGF у больных ишемической болезнью сердца. – Вестник РГМУ – 2010 - № 1. – С. 41-47.
- Эль-Бустани С. Лабораторные маркеры неоангиогенеза и ремоделирование артериальной стенки у больных ишемической болезнью сердца. – Лаборатория. – 2010 - № 2. – С. 38.
- Орлова О.В., Казаков Э.Н., Кормер А.Я., Честухин В.В., Миронков Б.Л., Эль-Бустани С., Шевченко О.П. Клиническое значение маркера неоангиогенеза - плацентарного фактора роста (PlGF) при болезни коронарных артерий пересаженного сердца. - Вестник трансплантологии и искусственных органов.- 2010.- Приложение.- С.167.
- Шевченко О.П., Шевченко А.О., Природова О.Ф., Орлова О.В., Эль-Бустани С., Гинзбург Л. Уровень sCD40L и риск развития острых атеротромботических событий. – Врач. – 2010 - № 5. – С. 106-109.
Список сокращений,
ИМ – инфаркт миокарда
НС – нестабильная стенокардия
ОКС – острый коронарный синдром
ОСА – общая сонная артерия
OХС – общий холестерин
СС – стабильная стенокардия
ТИМ – толщина интима-медиа
ТГ - триглицериды
ХсЛВП – холестерин липопротеинов высокой платности
ХсЛНП – холестерин липопротеинов низкой платности
PlGF – плацентарный фактор роста
TGF– трансформирующий фактор роста
