Терапевтическое действие ларивитола при токсическом поражении печени лабораторных животных и гепатозах цыплят-бройлеров

На правах рукописи

Ерёменко Сергей Васильевич

ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ЛАРИВИТОЛА ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И ГЕПАТОЗАХ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ

06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Белгород – 2012

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования

«Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени

В.Я.Горина»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Резниченко Людмила Васильевна

Официальные оппоненты: Никулин Иван Алексеевич доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра 1», кафедра терапии и фармакологии, профессор.

Сноз Григорий Васильевич доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицина и биотехнологии им. К.И. Скрябина, кафедра клинической диагностики и радиобиологии, профессор.

Ведущая организация – ФГБОУ ВПО «Орловский государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится 15 мая 2012 года в «____» часов на заседании диссертационного совета Д 220.004.02 при ФГБОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Я. Горина» по адресу: 308503, Белгородская область, Белгородский район, пос. Майский, ул. Вавилова, д. 1. Тел/факс 8(4722)-39-22-62

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО

«Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я.Горина», а с авторефератом в сети интернет на официальном сайте Министерства образования и науки РФ vak.ed.gov.ru и на сайте академии www.bsaa.edu.ru

Автореферат разослан «___» ____________ 2012 г.

Ученый секретарь Резниченко Людмила

диссертационного совета Васильевна

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Поражения печени различной этиологии занимают значительное место в общей структуре заболеваний и являются достаточно широко распространенной патологией (Подымова С.Д., 1998; Дынжинова Е. А, 2007; Привалов И. М., 2009).

При патологии печени, независимо от этиологии, ведущим патоморфологическим синдромом является цитолиз, обусловленный повышением проницаемости и (или) разрушением мембран гепатоцитов и их органелл с развитием гиперферментемии митохондриального фермента АсАТ и цитоплазматического фермента АлАТ (Подымова С.Д., 1998; Шерлок Ш. с соавт., 1999).

Для коррекции цитолитического синдрома в настоящее время целесообразно включение в современную фармакотерапию хронических поражений печени препаратов, обладающих гепатопротекторным и мембраностабилизирующим действием и тем самым активитующих антиоксидантную защиту организма (Катикова О.Ю., 2002; Доркина Е.Г, 2004). К препаратам, обладающим гепатопротектрными свойствами, относят каротин, жирорастворимые витамины, биофлавоноиды и др.

Гепатопротекторный эффект могут оказывать фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, средства, ингибирующие перекисное окисление липидов и обладающие антигипоксической активностью (Силуянова Н. с соавт.,2002). Для лечения и профилактики токсических гепатитов можно применять препараты, содержащие в своём составе витамины, биофлавоноиды и другие биологически активные вещества (Скакун Н.П. с соавт., 1987 ; Тихазе А.К. с соавт.,1999; Абидуева Е.Л., 2005; Ильченко, Л.Ю. с соавт., 2007).

Исходя из этого, нами, совместно с учёными-химиками ЗАО «Петрохим» ( г.Белгород) был разработан новый комплексный препарат, в состав которого вошли биофлавоноидный комплекс лиственницы, а также витамины А, Дз и Е, который получил название ларивитол. При разработке ларивитола, было учтено его антиоксидантное действие, которое является ключевым звеном в профилактике заболеваний животных.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы было изучение гепатотропных свойств ларивитола на модели острого токсического гепатита на белых крысах и подтверждение его фармакологического действия при гепатозах цыплят-бройлеров.

Для достижения цели на разрешение были поставлены следующие задачи:

• определить безвредность ларивитола на лабораторных животных;
• вызвать токсический гепатит у белых крыс путём применения четырёххлористого углерода;
• на модели острого токсического гепатита установить гепатотропный эффект ларивитола и сравнить его эффективность с аминовиталом;
• сравнить эффективность действия ларивитола и аминовитала при гепатозах цыплят-бройлеров;
• определить химический состав и биологическую ценность мяса птицы, получавшей ларивитол;
• экономически обосновать использование ларивитола в птицеводстве.

Научная новизна работы. На модели острого токсического гепатита впервые изучены гепатотропные свойства ларивитола. Действие препарата проявлялось уменьшением нарушений функционального состояния печени, вызванного четырёххлористым углеродом, и сопровождалось снижением до физиологической нормы активности ферментов переаминирования, щелочной фосфатазы и содержания билирубина в сыворотке крови, восстановлением гистоструктуры печени.

На цыплятах-бройлерах подтверждены выявленные на лабораторных животных гепатотропные свойства ларивитола. Дано обоснование возможности его использования в качестве лечебно-профилактического средства при гепатозах цыплят-бройлеров.

Практическая значимость работы. Предложен новый препарат для лечения гепатозов цыплят-бройлеров и дано экономическое обоснование использования его в птицеводстве.

Ларивитол выпускает ЗАО «Петрохим» (г. Белгород). Разработано и утверждено временное наставление по его применению.

Апробация результатов исследования. Результаты исследования были представлены на международных научно-практических конференциях: «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2010, 2011), «Современные подходы к развитию АПК» (Казань, 20011), и расширенном заседании кафедры инфекционной и инвазионной патологии Белгородской государственной сельскохозяйственной академии (2012).

Публикация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ в сборниках международных конференций, центральных журналах и отдельных изданиях (из них две – в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования РФ).

Основные положения, выносимые на защиту:

• результаты токсикологических свойств ларивитола;
• доказательства гепатотропного действия препарата на модели острого токсического гепатита на белых крысах;
• доказательства терапевтического действия ларивитола при гепатозах цыплят-бройлеров;
• оценка товарного вида и биологической ценности птицеводческой продукции после применения ларивитола;
• практические предложения по применению ларивитола;

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 112 страницах стандартного компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений. Библиографический список включает 166 источника, в том числе – 65 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 21 таблицей и 6 рисунками.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась в 2009-2012 гг. на базе Белгородской государственной сельскохозяйственной академии и Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории. Производственные опыты проводились в условиях ЗАО «Приосколье» Новооскольского района Белгородской области.

Объектом исследования служил препарат ларивитол, который представляет собой сыпучую порошкообразную массу кремового цвета и содержит в своём составе биофлавоноидный комплекс лиственницы – 0,02 мг/г; витамин А – 500 МЕ/г; витамин Дз – 250 МЕ/г; витамин Е – 0,2 мг/г.

В экспериментальной части работы было использовано 88 белых крыс, 12 кроликов, 18 морских свинок, 120 цыплят-бройлеров; в клинических и научно-производственных испытаниях – 46000 цыплят.

Токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением крысам четырёххлористого углерода в форме 50% эмульсии на вазелиновом масле из расчёта 4,0 мл на 1 кг массы тела в течение 3-х суток (Венгеровский А.И. с соавт., 1999).

В конце периода наблюдения из каждой группы умерщвляли по 6 животных для патоморфологических исследований. Методом оценки эффективности действия препаратов был клинический осмотр животных, измерение массы тела и контроль некоторых биохимических показателей сыворотки крови (AST и ALT, креатинин, общий билирубин, щелочная фосфатаза, общий белок и т.д.).

Комплексные исследования клинического состояния птицы проводили с учетом условий их кормления и содержания. При диагностике гепатозов учитывали активность печёночных ферментов (аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы) и щелочной фосфатазы, содержание билирубина в сыворотке крови, результаты патологоанатомического вскрытия.

Принималось во внимание степень поражаемости поголовья и падёж.

При формировании групп учитывали породность, возраст, живую массу и общее состояние животных.

Схема опытов представлена в табл.1.

Табл. 1 – Схема опытов

Группы	Количество животных	Применяемы препараты	Дозы препаратов
Первый опыт Определение токсикологических свойств ларивитола
Второй опыт Изучение гепатотропных свойств ларивитола на модели экспериментального острого токсического гепатита белых крыс
1-контрольная	18	Интактные животные	-
2-опытная	18	ССl4 (4,0 мл/кг массы тела)	-
3-опытная	18	ССl4 + ларивитол	2,0 г/кг массы тела
4-опытная	18	ССl4 +аминовитал	0,2 мл/л воды
Третий опыт Оценка клинического состояния и биохимических показателей крови цыплят-бройлеров
Четвёртый опыт Лечебное действие ларивитола при гепатозах цыплят-бройлеров
1-контрольная	120	Основной рацион (ОР)	-
2-опытная	120	ОР+аминовитал	0,2 мл/л воды
3-опытная	120	ОР+ларивитол	1,0 г/кг массы тела
4-опытная	120	ОР+ларивитол	2,0 г/кг массы тела
5-опытная	120	ОР+ ларивитол	3,0 г/кг массы тела
Производственная проверка
1-контрольная	16210	Основной рацион (ОР)	-
2-опытная	16563	ОР+ ларивитол	1,0 г/кг массы тела
3-опытная	17104	ОР+ ларивитол	2,0 г/кг массы тела
4-опытная	16507	ОР+ ларивитол	3,0 г/кг массы тела

Гематологические показатели (число эритроцитов, лейкоцитов, лейкограмму) определяли общепринятыми методами (Симонян Г. А. с соавт., 1995), биохимические показатели крови – при помощи гематологического анализатора «Хитачи», активность лизоцима в сыворотке крови – нефелометрическим методом (Дорофейчук В. Г., 1968), бактерицидную активность сыворотки – по И. М. Карпуть (1993), фагоцитарную активность – по количеству фагоцитирующих псевдоэозинофилов из 100 учтенных клеток.

При ветеринарно-санитарной оценке мяса пользовались правилами ветеринарно-санитарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мясных продуктов (М., 2001).

На основании результатов, полученных в производственных условиях, проводили расчёт экономической эффективности применения ларивитола (Никитин И.Н., 1982). Полученный в опытах цифровой материал был подвергнут статистической обработке на персональном компьютере по методам вариационной статистики с вычислением аргумента Стьюдента (td). Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при р0,05 (Лакин Г.Ф., 1973).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Определение безвредности ларивитола

Для изучения острой токсичности ларивитола было сформировано 4 группы белых крыс (одна контрольная и три опытные) обоего пола массой 180-220 г, по 10 гол в каждой. Животным опытных групп препарат применяли перорально из расчёта 11,0; 16,5 и 25,0 г/кг массы тела. Наблюдение проводили в течение 14 суток.

При этом не удалось установить конкретной величины ЛД50, ввиду того, что рассчитанные по верхней границе дозы оказались больше максимального объёма препарата, допустимого для введения в желудок крысы. Введение максимального объёма препарата не вызывало каких-либо отклонений в поведении животных и естественных отправлении (дефекации, диуреза). Ни в одной из опытных групп от изучаемых доз препарата не зарегистрировано гибели животных. Таким образом, по параметрам острой токсичности согласно ГОСТ 12.1.007-76 ларивитол можно отнести к веществам 4 класса – малоопасным.

Длительное (в течение 3 мес.) ежедневное применение ларивитола в дозах 2,0; 10,0 и 20,0 г/кг мас­сы тела (десятикратная доза от расчетной) также не вызывало изменений в общем состоянии животных, их условно-рефлекторной деятельности, морфологическом и биохимическом составе крови. Установлено, что ларивитол не обладает также местнораздражающим и аллергизирующим действием и без каких-либо специальных режимов может назначаться перорально в рекомендуемых дозах.

3.2. Изучение гепатотропных свойств ларивитола на модели острого токсического гепатита

Острый токсический гепатит у белых крыс вызывали четырёххлористым углеродом на вазелиновом масле из расчёта 4,0 мл/кг массы тела в течение 3-х суток однократно.

Для проведения опыта было отобрано 4 группы белых беспородных крыс по 18 голов в каждой.

Первой группе никаких препаратов не применяли (интактные животные). Крысам второй, третьей и четвёртой опытных групп внутрибрюшинно 1 раз в сутки вводили 50%-ную эмульсию четырёххлористого углерода на вазелиновом масле в дозе 4 мл/кг массы тела в течение трёх суток подряд. Третьей опытной группе сразу после окончания инъекций четыреххлористого углерода в течение 14 суток в корм добавляли ларивитол из расчёта 2 г/кг массы тела, четвёртой опытной группе в течение такого же периода времени выпаивали аминовитал из расчёта 0,2 мл/л воды. Изменения биохимического состава крови животных представлены в табл. 2.

Как видно из таблицы, интоксикация CCl4 характеризовалось повышенным образованием билирубина и ингибированием экскреции внутрипеченочного звена данного пигмента. Во второй опытной группе отмечалось повышение уровня билирубина в сыворотке крови на 71,9 % по сравнению с интактной группой животных, при р<0,001.

Введение крысам четырёххлористого углерода привело к нарушению цитоплазматических мембран гепатоцитов, что проявилось увеличением в сыворотке крови ферментов переаминирования: во второй группе активность AST и ALT возросли на 71,9 и 99,6% соответственно по сравнению с интактными животными (р0,001). Наблюдалось также повышение активности щелочной фосфатазы (на 34,7%).

Таблица 2. – Биохимические показатели крови крыс

Показатели		Контрольная группа	Опытные группы
		1	2	3	4
		интактные животные	ССl4	ларивитол +ССl4	аминовитал+ССl4
	AST ед/л	187,9±8,47	323,0±7,41***	188,6±6,85	291,5±9,57***
	±к контролю, %	-	+71,9	+ 0,4	+55,1
	ALT ед/л	119,8±5,66	239,0±6,31***	121,5±5,33	198,2±4,31**
	±к контролю, %	-	+99,6	+1,4	+65,4
	Альбумины г/л	32,0±1,85	34,2±1,71	33,1±0,82	33,8±1,77
	±к контролю, %	-	+6,8	+3,4	+5,6
	Общий белок г/л	67,8±1,23	63,0±1,18*	68,7±1,34	69,2±0,99
	±к контролю, %	-	-7,1	+1,3	+2,1
	Мочевина ммоль/л	6,72±0,67	8,25±0,63	6,82±0,55	7,91±0,52
	±к контролю, %	-	+22,8	+1,5	+17,7
	Креатинин мг/дл	0,42±0,30	0,49±0,34	0,43±0,31	0,47±0,35
	±к контролю, %	-	+16,6	+2,4	+11,9
	Билирубин мг/дл	0,52±0,09	0,87±0,07*	0,54±0,12	0,59±0,14
	±к контролю, %	-	+67,3	+1,9	+11,8
	Холестерин ммоль/л	1,18±0,19	1,72±0,18*	1,23±0,22	1,49±0,21
	±к контролю, %	-	+50,0	+17,8	+28,6
	Глюкоза ммоль/л	9,22±1,16	4,81±1,11*	8,66±1,13	7,14±1,22
	±к контролю, %	-	-47,8	-6,1	-22,5
	Щелочная фосфатаза ед/л	349,1±8,80	470,2±9,87*	350,3±7,12	386,1±6,18*
	±к контролю, %	-	+34,7	+0,4	+10,5

Примечание: р0,001; ** р0,01; р0,05

Введение ларивитола крысам третьей опытной группы сопровождалось уменьшением синдрома цитолиза, что проявилось нормализацией в сыворотке крови активности ферментов переаминирования. Активность щелочной фосфатазы, как показателя фосфорно-кальциевого обмена и синдрома холестаза, также была в пределах физиологической нормы.

Действие аминовитала (4-я опытная группа) было менее выраженным, что подтверждается меньшим снижением активности AST и ALT, чем в группах с применением ларивитола.

Введение крысам четырёххлористого углерода (вторая группа) вызывало резкое снижение глюкозы в сыворотке крови (на 47,8%) по сравнению с интактными животными. Как известно, гипогликемия связана с ингибированием четырёххлористым углеродом гликонеогенеза и усиления гликогенолиза (Бахадыров Ф.Н., с соавт., 1998). При этом нарушался синтез печенью инсулиназ, гидролизирующих инсулин.

После применения ларивитола в третьей опытной группе уровень глюкозы снизился незначительно (на 6,1%). После выпаивания аминовитала уровень глюкозы также снизился в сыворотке крови животных четвёртой опытной группы (на 22,5%), однако эти изменения не подтверждались статистически в сравнении с интактными животными.

Следовательно, ларивитол более эффективно препятствует развитию гипогликемии.

Гепатозащитное действие ларивитола может быть обусловлено наличием в его составе биофлавоноидного комплекса и витаминов А и Е, которые, как известно, являясь антиоксидантами, обладают гепатотропным действием.

Что касается аминовитала, то его действие было менее эффективным на протяжении всего периода проведения эксперимента.

При сравнении гистоструктуры печени контрольных и интактных животных установлены значительные различия. После применения четырёххлористого углерода отмечалось нарушение строения печени. Гепатоциты с явлениями зернистости, гидропической, жировой дистрофии (рис.1)

.

Рис. 1 Гистоструктура печени животных после применения четырёххлористого углерода

После применения ларивитола (рис.2) отмечено полное восстановление печени.

Рис. 2. Гистоструктура печени контрольных животных и гистоструктура печень крыс после применения ларивитола

Из рисунка видно, что гистросотруктура органа после лечения ларивитолом мало отличается от печени контрольных крыс. Признаков жировой дистрофии практически не обнаружено. Поражённые клетки с очагами некроза практически отсутствуют. Наблюдаются регенераторные процессы за счет клеток печени и соединительной ткани.

Примение крысам аминовитала на фоне четырёххлористого углерода вызвало незначительный терапевтический эффект рис. (3).

Рис. 3. Гистоструктура печени животных после применения аминовитала

Таким образом, применение ларивитола практически полностью останавливает развитие токсического гепатита, в то время как аминовитал лишь частично снижает токсическое действие четыреххлористого углерода и слабо способствует регенерации гепатоцитов.

На основании проведённых исследований можно ожидать, что ларивитол окажет такое же действие при гепатозах птицы. Чтобы проверить это, нами проведены исследования на цыплятах-бройлерах, которые в условиях крупных птицеводческих хозяйств наиболее часто подвержены различным поражениям печени.

3.3. Терапевтический эффект ларивитола при гепатозах

цыплят-бройлеров

При оценке клинического состояния и биохимических показателей крови цыплят-бройлеров установлено поражение их печени в 10- и 25-суточном возрасте. Это подтверждалось значительным повышением в сыворотке крови активности ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, снижением общего белка, повышением билирубина и глюкозы.

Изучение гепатотропных свойств ларивитола на цыплятах бройлерах начали с определения оптимальных доз препарата. Изучались три дозы – 1,0; 2,0 и 3,0 г/кг массы тела. Параллельно проводилось сравнение эффективности действия ларивитола с аминовиталом.

После скармливания ларивитола в дозах 2,0 и 3,0 г/кг отмечалось увеличение среднесуточных приростов птицы (на 11,9 и 12,4% выше контрольных показателей).

Ларивитол не вызвал каких-либо существенных изменений в популяциях лейкоцитов крови. Незначительные сдвиги в лейкограмме были статистически недостоверными и характеризовались лишь тенденцией к увеличению в ней доли псевдоэозинофилов.

Однако по биохимическому составу крови были отмечены существенные изменения (табл. 3).

Таблица 3 – Биохимические показатели крови цыплят-бройлеров

Показатели	Группы
	1-контрольная	2-опытная	3-опытная		4-опытная	5-опытная
		аминовитал	ларивитол 1,0 г/кг		ларивитол 2,0 г/кг	ларивитол 3,0 г/кг
Исходные данные
Гемоглобин, г/л	95,2±4,33	94,8±4,56		96,0±3,37	95,8±3,48	94,6±4,44
Общий белок, г/л	27,8±2,33	28,1±1,58		27,7±1,68	26,5±1,32	25,9±3,21
Глюкоза, ммоль/л	12,26±0,42	12,54±0,33		11,56±0,21	11,46±0,30	12,54±0,47
Кальций, ммоль/л	3,53±0,35	3,46±0,51		3,98±0,36	3,87±0,51	3,42±0,23
Фосфор, ммоль/л	4,92±0,56	5,11±0,31		5,27±0,41	5,13±0,49	4,87±0,33
Холестерол, ммоль/л	1,35±0,21	1,33±0,43		1,38±0,23	1,46±0,21	1,32±0,22
Билирубин, мг/дл	2,46±0,25	2,33±0,29		2,44±0,17	2,56±0,18	2,01±0,27
Щелочная фосфатаза ед/л	647,6±6,21	654,8±7,13		648,1±6,26	689,1±8,32	621,5±7,44
AST, ед/л	233,1±6,11	254,2± 5,22		241,1±3,75	212,1 ±6,20	244,1±5,35
ALT, ед/л	52,1±2,56	50,4±3,02		57,4±3,12	56,3 ±2,26	54,0± 3,22
В конце экспериментального периода
Гемоглобин, г/л	97,3±3,12	98,1±3,14		96,5±2,84	95,1±3,12	97,0±2,19
Общий белок, г/л	28,2±2,57	28,3±2,64		27,9±2,33	28,1±2,67	28,6±2,45
Глюкоза, ммоль/л	12,21±0,85	11,54±0,56		10,23±0,62	8,71±0,91*	9,11±0,76*
Кальций, ммоль/л	3,75±0,61	3,94±0,67		4,56±0,52	4,97±0,68	4,82±0,57
Фосфор, ммоль/л	4,55±0,39	4,92±0,31		4,15±0,47	3,65±0,38	3,77±0,31
Холестерол ммоль/л	1,56±0,39	1,61±0,22		1,33±0,54	1,34±0,46	1,30±0,15
Билирубин, мг/дл	2,24±0,33	2,12±0,43		1,47±0,52	1,24±0,40	1,32±0,39
Щелочная фосфатаза ед/л	638,2±12,84	623,1±10,28		576,8±13,8*	522,7±12,21**	531,8±13,10 **
AST, ед/л	247,7±7,89	233,2±8,21		228,6±8,12*	177,3±7,71 **	181,2±8,92**
ALT, ед/л	57,3±3,89	56,1±2,33		54,7±3,88	42,3±3,78*	43,1±3,81*

Примечание: * - р0,05; р0,01

У подопытных цыплят, получавших ларивитол, заметно снижалась активность AST и ALT, играющих важную роль в процессах переаминирования, деградации аминокислот и биосинтезе белка (Мецлер Д., 1980; Кольман Я., Рём К., 2000).

Следует отметить достоверное снижение активности аспартатаминотрансферазы от всех изучаемых доз ларивитола: на 7,7% – от минимальной дозы препарата и на 28,4 и 26,8% соответственно – от доз 2,0 и 3,0 г/кг массы тела. Снижение аланинаминотрансферазы отмечалось только после применения максимальных доз препарата (на 26,1% от дозы 2,0 г/кг и на 24,8% от дозы 3,0 г/кг массы тела).

После применения ларивитола произошло снижение глюкозы в сыворотке крови, причём достоверно от доз 2,0 и 3,0 г/кг массы тела (на 28,7 и 25,4% соответственно по сравнению с контролем при р<0,05).

Активность щелочной фосфатазы также снизилась до физиологических значений после скармливания ларивитола: от дозы 1,0 г/кг – на 9,6%, от доз 2,0 и 3,0 г/кг – на 18,1 и 16,7% соответственно по сравнению с контролем (во всех случаях р<0,05-0,01).

Таким образом, проведённые исследования на цыплятах показали, что ларивитол оказывает гепатотропное действие, которое проявлялось снижением до физиологической нормы активности ферментов переаминирования, щелочной фосфатазы и содержания глюкозы в сыворотке крови. Действие аминовитала было менее эффективным. Активность ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы в сыворотке крови несколько снижалась, но не достигала уровня, наблюдаемого после применения ларивитола.

Высокая гепатотропная эффективность ларивитола обусловлена наличием в нём анитиоксидантов – биофлавоноидов и витамина Е.

В своих последующих исследованиях мы изучали влияние ларивитола на общую резистентность организма цыплят (табл.4).

Таблица 4 – Показатели естественной резистентности

цыплят-бройлеров

Показатели		Группы
		1-контроль	2-опытная	3-опытная	4-опытная	5-опытная
			аминовитал	ларивитол 1,0 г/кг	ларивитол 2,0 г/кг	ларивитол 3,0 г/кг
Исходные данные
Бактерицидная активность, %		44,29±1,54	46,23±1,62	43,57±1,39	45,77±1,54	46,21±1,53
Фагоцитарная активность, %		42,35±1,64	43,51±1,52	44,21±1,66	42,79±1,85	41,94±1,32
Лизоцимная активность, %		11,54±0,82	12,21±0,63	11,77±0,53	12,24±0,36	11,88±0,75
Иммуноглобулины, ед		3,21±0,32	3,51±0,27	3,36±0,29	3,24±0,27	3,12±0,52
В конце экспериментального периода
Бактерицидная активность, %	45,70±1,56		46,82±1,38	45,83±1,29	47,12±1,38	48,21±1,46
Фагоцитарная активность, %	43,12±1,62		44,21±1,63	46,87±1,87	49,21±1,59*	48,75±1,59*
Лизоцимная активность, %	12,22±0,74		12,64±0,97	11,79±0,84	11,85±0,79	12,36±0,82
Иммуноглобулины, ед	3,56±0,32		3,21±0,44	3,71±0,46	3,52±0,77	3,78±0,66

Примечание: * - р<0,05;

В конце экспериментального периода было установлено, что применение различных доз ларивитола вызывало повышение фагоцитарной активности псевдоэозинофилов, причём достоверное только от максимальных доз (на 14,1 и 12,8% соответственно при р<0,05).

3.4. Качество и биологическая ценность мяса птицы

Качество мяса цыплят-бройлеров после применения ларивитола несколько отличалось от показателей контрольной группы. БПК мышечной ткани оказался достоверно выше, чем у цыплят, не получавших препарат, но только после применения максимальных доз (на 20-25,6%); в мышцах увеличивалось содержание протеина, (статистически достоверно от доз 2,0 и 3,0 г/кг массы тела – на 13,6 и 14,1% соответственно).

При определении аминокислотного состава мяса было установлено увеличение общего количества заменимых и незаменимых аминокислот после применения и ларивитола и аминовитала, но в большей степени от ларивитола по незаменимым аминокислотам.

ВЫВОДЫ

1. Разработан гепатотропный препарат ларивитол, содержащий в своём составе биофлавоноидный комплекс лиственницы и витамины А, Д3, Е.
2. Ларивитол является малотоксичным препаратом. Он по ГОСТ 12.1.007-76 относится к веществам 4 класса, не обладает хронической токсичностью, местнораздражающим и аллергенным действием;
3. Острый токсический гепатит на белых крысах, вызываемый четырёххлористым углеродом, проявляется повышением в сыворотке крови активности аспартатаминотрансферазы (на 71,9%) и аланинаминотрансферазы (на 99,6%), содержания билирубина (на 71,9 %), снижением общего белка (на 7,1%) и развитием жировой дистрофии печени.
4. Ларивитол, применяемый белым крысам на фоне токсического гепатита, вызванного четырёххлористым углеродом, обладает гепатотропным действием, которое проявляется восстановлением функции гепатоцитов, существенным снижением в сыворотке крови активности ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, содержания билирубина, повышением уровня общего белка.
5. Аминовитал, применяемый белым крысам на том же фоне, что и ларивитол, оказывает слабое гепатотропное действие, не препятствует развитию жировой дистрофии печени; в сыворотке крови активность аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы на фоне токсического гепатита снижается лишь на 55,1 и 64,5% соответственно.
6. Гепатотропное действие ларивитола было подтверждено на цыплятах-бройлерах. Оптимальной дозой препарата при лечении гепатозов является 2,0 г/кг массы тела.
7. Применение при гепатозе цыплятам-бройлерам ларивитола в дозе 2,0 г/кг массы тела способствует снижению в сыворотке крови содержания глюкозы (на 28,7%), активности щелочной фосфатазы (на 18,1%), аспартатаминотрансферазы (на 28,4%), аланинаминотрансферазы (на 26,1%), повышению фагоцитарной активности псевдоэозинофилов (на 14,1%).
8. В мышечной ткани цыплят, получавших ларивитол, содержится больше белка (на 13,6 %), повышается БПК (на 20,0%) по сравнению с контрольными показателями.
9. Экономическая эффективность применения цыплятам-бройлерам ларивитола в дозе 1,0 г/кг массы тела составляет 1,7 руб. на 1 руб. затрат, в дозе 2,0 г/кг – 4,3 руб. и в дозе 3,0 г/кг– 2,8 руб. на 1 руб. затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Ларивитол рекомендуется использовать для лечения цыплят-бройлеров при гепатозах, повышения естественной резистентности организма и продуктивности. Препарат рекомендуется применять с кормом из расчёта 2,0 г/кг массы тела в течение 20-25 сут.

На производство и применение ларивитола разработана нормативная документация (технические условия, инструкция по применению).

Результаты исследований могут быть использованы при создании новых средств, нормализующих функцию печени и повышающих неспецифическую резистентность организма; составлении научной и информационной литературы, а также в учебном процессе при подготовке ветеринарных врачей и зооинженеров.

Публикации в ведущих рецензируемых изданиях,

рекомендованных действующим перечнем ВАК

1. Ерёменко С.В. Новые препараты при токсических гепатитах сельскохозяйственных животных/ С.В. Ерёменко //Уч. записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана.– Т. 207. – Казань, 2011. – С. 242-247.
2. Харченко Ю.А., Ерёменко С.В., Авдонина О.О. Гепатопротекторные свойства новых препаратов // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 1; URL: http://www.science-education.ru/101-5552 (дата обращения: 21.02.2012).

Прочие публикации, содержащие основные

научные результаты диссертации

3. Резниченко Л. В. Гепатопротекторные свойства каротинсодержащих комплексов / Л. В. Резниченко, С.Б. Носков, С.В. Ерёменко // Бюллетень научных работ. /Белгородская ГСХА.– Вып. 21.– Белгород, 2010. – С. 50-52.
4. Носков С.Б. Изучение гепатопротекторных свойств витаминсодержащих препаратов на модели острого токсического гепатита / С.Б. Носков, Л. В. Резниченко, С.В. Ерёменко // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Мат-лы 14-й международ. науч.-произв. конф. – Белгород, 2010. – С. 86.

5. Ерёменко С.В. Гепатопротекторное действие каротинсодержащих препаратов // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Мат-лы XV международ. науч.-произв. конф. – Белгород, 2011. – С. 72.

Подписано в печать 11.04.12

Печ.л. 1 Тираж 100 экз. Заказ № 38

308503 п.Майский Белгородской области

Типография БелГСХА им. В.Я. Горина