Эффективность иммуномодулятора “ баксин-вет “ при лечении хронического эндометрита сук с кистой яичников.
На правах рукописи
ФЕДОРОВИЧ Владимир Васильевич
Эффективность иммуномодулятора “ Баксин-вет “ при лечении хронического эндометрита сук с кистой яичников.
16.00.07. – ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Москва – 2009
Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ).
Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор
Петров Алексей Михайлович
Официальные оппоненты: доктор биологических наук,профессор
Порфирьев Иван Арсентьевич
доктор ветеринарных наук,профессор,
заслуженный деятель науки РФ
Никитин Виктор Яковлевич
Ведущая организация: ФГОУ ВПО Самарская государственная сельскохозяйственная академия.
Защита состоится «_10__»_июня_______2009 г. в «____» часов на заседании диссертационного совета Д. 220.042.05 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23, тел. (495) 377-93-83.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»
Автореферат разослан «_____»____________2009 г.
Ученый секретарь Волчкова Л.А.
диссертационного совета
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. По данным ряда авторов: В.А.Карпова, 1984., В.А. Лукьяновского, Ю.И. Филиппова, 1988., Э.Б. Мордашевой, 2002., Г.П. Дюльгера, 2002., Н.С.Саженевой, 2004., Г.Б. Чулковой, 2007., Н.С. Емельяновой, 2007., А.В. Шориной, 2007 болезни репродуктивной системы у мелких домашних животных составляют до 20% от общего числа различных заболеваний.Одним из наиболее часто встречающихся акушерско-гинекологических заболеваний у сук является эндометрит. Данное заболевание чаще всего рассматривают как системное заболевание, так как оно затрагивает функцию иммунной системы, центральной нервной и эндокринной систем, матки, яичников.
По данным Н.С. Емельяновой (2007) у 21,7% собак встречается сочетанная патология – эндометрит и киста яичников. Данная патология чаще всего приводит к полной потере репродуктивной функции у сук.Эта проблема также актуальна для специалистов, содержащих сук, активно использующихся в племенном разведении и, содержащихся в питомниках.Поэтому наиболее остро стоит вопрос о выборе рационального и эффективного метода лечения, позволяющего сохранить репродуктивную функцию животного.
Цель и задачи исследований. Целью наших исследований является изучение хронического эндометрита у сук осложненного кистой яичников и разработка эффективного метода лечения при данной патологии. Для достижения цели нами были поставлены следующие задачи:
- Изучить этиологию данного заболевания основываясь на анамнезах, а также на особенностях гормональных и иммунологических показателей крови.
- Выделить и идентифицировать микрофлору из вагинальной слизи у сук больных хроническим эндометритом.
- Изучить концентрацию половых гормонов(прогестерона и эстрадиола) в крови здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.
- Изучить параметры иммунитета и неспецифической защиты(резистентности) у здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.
- Разработать эффективный комплексный метод лечения данного заболевания у сук с использованием гормональных, антимикробных, противогрибковых препаратов и иммуномодулятора «Баксин-вет».
6. Рассмотреть возможность принятия мер профилактики данного заболевания.
Научная новизна. Изучено распространение хронического эндометрита и кисты яичников у сук в условиях Московской области. Определены основные микроорганизмы и их ассоциации, вызывающие хронический эндометрит у сук. Впервые проведено определение основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма сук при использовании иммуномодулятора «Баксин-вет».
Определена концентрация половых гормонов (эстрадиол и прогестерон) в крови у сук в процессе болезни и после их выздоровления.
Теоретическая и практическая значимость. Изучены гормональные и иммунологические показатели крови у сук при хроническом эндометрите осложненном кистой яичников. Разработана и внедрена схема комплексного лечения хронического эндометрита с учетом дисфункции яичников с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет».
При гиповолемии, детоксикации и для восстановления коллоидно-осматического состояния рекомендована многократная гидротационная терапия.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены обсуждены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (2006-2008); Международной научно-практической конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их решения» ГНУ «Всероссийский научно исследовательский институт животноводства (ВНИИЖ), Дубровицы, 2008; Международной научной конференции посвященной 200-летию высшего ветеринарного образования и основания Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины на тему: « Новые аспекты биотехнологии репродукции животных». Санкт-Петербург, 2008; На XVI Московском международном конгрессе по болезням мелких домашних животных (2008).
Публикации
По результатам собственных исследований с 2005-2008 гг. опубликовано 4 статьи, в том числе 4 статьи в изданиях рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации.
Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных, обсуждение выводов, практических предложений и списка используемой литературы. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 5 рисунками.
Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту.
- Результаты диагностики хронического эндометрита у сук с учетом дисфункции яичников.
- Результаты исследования бактериальной Контаминации матки у сук при хроническом воспалении эндометрия.
- Результаты определения эстрадиола и прогестерона в крови животных в процессе лечения и после их выздоровления.
- Показатели основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма животных при хроническом эндометрите с использованием для лечения иммуномодулятора «Баксин-вет».
- Результаты внедрения комплексного метода лечения хронического эндометрита и кисты яичников у сук с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых препаратов, метронидазола, гормональных препаратов и иммуномодулятора «баксин-вет».
Собственные исследования
Материалы и методы
Исследования по теме диссертации проведены с 2006 по 2008гг. на кафедре акушерства, гинекологии и искусственного осеменения животных Федерального Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина».
Клинические исследования сук проводились в клинике «Далс» г.Королева и «Миф» г. Мытищи Московской области. Гормональные исследования прогестерона и эстрадиола -17 проводили радиоиммунологическими методами с помощью готовых французских наборов реагентов. Для экспериментальных исследований использованы 128 сук различных пород(восточноевропейская овчарка, немецкая овчарка, кавказская овчарка, доберман, боксер, шелти, ротвеллер, кокер-спаниель, беспородные и помесные собаки) в возрасте от 5 до 10 лет.
Диагноз на эндометрит устанавливали на основании сбора анамнеза, результатов клинических, лабораторных исследований, узи-диагностики.
При этом обращали особое внимание на животных с нарушением полового цикла, выделениями из влагалища, непродуктивными вязками. Клиническое исследование больных животных проводили по общепринятым методикам. Для ультразвуковой диагностики эндометрита и кисты яичников у сук использовали аппарат узи-NS-HONDA 2000 с высокочастотным датчиком на 3,5-7МГц.
За период исследований прижизненный диагноз хронический эндометрит, осложненный кистой яичников, мы установили у 60 сук, тогда как острый эндометрит с обычными кистами яичников был выявлен у 68 сук. Установлено, что с 2006 по 2008 г.г. в г. Королеве количество сук, больных хроническим эндометритом постоянно возрастало. Так, если в 2006 году количество больных животных 22,1% то в 2007 году их было 23,6%, а в 2008 году соответственно 26,7%.
Количество сук больных хроническим эндометритом в г. Мытищи составило 23,8%, тогда как в 2007 году количество больных животных несколько снизилось и составило 23,3 %, а в 2008 году количество больных сук составило 25,5%.
Таким образом, количество сук больных хроническим эндометритом в городах Королев и Мытищи из года в год возрастает. Вероятно, причиной такого большого количества больных животных является несвоевременное обращение владельцев собак в ветеринарные клиники, или попытки самолечения больных животных.
Было отмечено, что заболевание сук хроническим эндометритом имеет определенную тенденцию. Так, с 5 до 10 летнего возраста животные наиболее подвержены данному заболеванию. Тогда как с 14 летнего возраста количество сук, больных хроническим эндометритом резко сокращается и к 16 летнему возрасту составляет 11,6%, тогда как в 10 летнем возрасте количество больных животных было 24,4 %.Мы предполагаем, что это связано со снижением репродуктивных способностей у сук в связи с их возрастом и снижением контактов с производителями.
Для определения эффективности комплексного метода терапии при хроническом эндометрите у сук осложненного кистой яичников находилось 60 сук, из которых по мере поступления в клинику были сформированы три подопытных группы.
- Контрольная группа. здоровые суки – 20 гол. Лекарственные препараты животным данной группы не применялись.
- II Опытная группа. 20 сук, больные хроническим эндометритом, осложненным кистой яичников. Для их лечения использовали:
- Рокситромицин ( антибиотик макролид), который назначали в дозе по 150мг ( 1таблетка) 2раза в сутки внутрь с кормом.
- Ципрофлоксацин (антибиотик широкого спектра действия из группы фторхинолов, обладающий наименьшим иммунодепрессивным действием) вводили внутривенно но 0,Зг в 25-30 мл 0,9% р-ра натрия хлорида 2раза в сутки.
Одновременно с антибиотиками внутрь назначали метронидазол (трихопол) по 0,2г 2раза в сутки, сульфаниламидный препарат- 10% р-р этазола натрия по 5мл 2раза в сутки внутривенно.
Для устранения грибковой микрофлоры применяли микомакс по 100мг внутрь с кормом один раз в течение 5-7 суток.
Из гормональных препаратов при фолликулярных кистах внутримышечно однократно вводили 5мкг Сурфагона, а при лютеиновых кистах яичников - магэстрофан также однократно внутримышечно в дозе по 0,2мл. Для устранения гиповолемии, интоксикации и коррекции нарушений коллоидно осмотического и водно - солевого баланса проводили гидратационную терапию. Для этого ежедневно внутривенно вводили до 150мл раствора реополиглюкина, 50 мл плазмы, 50 мл 10%ного раствора глюкозы, 50мл раствора Рингера. Общий объем инфузии за сутки составлял 250-300 мл.
Для усиления кровообращения матки и ускорения эвакуации экссудата назначали внутримышечно окситоцин 3-5 ЕД один раз в сутки в течение 5-7 суток.
На фоне медикаментозной терапии собакам назначали диету и ежедневно организовывали активный длительный моцион на свежем воздухе в течение 3-4 часов. Курс комплексной терапии составлял 10-14 суток. Животное считались клинически здоровым, если у него не было выявлено клинических и лабораторных признаков заболевания в течение 12-18 месяцев после выздоровления.
- III Опытная группа. 20 сук, больные хроническим эндометритом, осложненным кистой яичников. Для их лечения, кроме вышеуказанных препаратов, применяемых во второй опытной группе, дополнительно использовали иммуномодулятор – «Баксин-вет». «Баксин-вет» задавали с кормом внутрь 1 раз в день по 2 капсулы в течение двух недель.
Контроль за состоянием репродуктивных органов у сук осуществляли методом узи-диагностики.
Эффективность лечения животных оценивали по клиническим признакам животных, данным лабораторных исследований, узи- и по результативным вязкам сук в первую охоту после выздоровления.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием компьютерной программы Microsoft Excel, 2000
Материал для микробиологических исследований получали от сук различных пород репродуктивного возраста. Посев исследуемого материала производили на МПА в чашках Петри с последующим инкубированием в термостате при 370 С в течение 48ч. Затем подсчитывали количество колоний микроорганизмов, для их идентификации использовали «Определитель бактерий Берджи» (1997).
Радиоиммунологическое определение прогестерона в сыворотке крови проводили с помощью набора «Стерон-П-125J».
Радиоиммунологическое определение эстрадиола 17 проводили с помощью набора «CEA-Ire-Sorin-ЕSTRK».
Исследования активности лизоцима в сыворотке крови проводили по (E.Osserman, D. Lawlor, 1996, в модификации О.Н. Грызловой, П.А. Емельяненко, Денисенко, 1980)
Определение фагоцитарной активности нейтрофилов (метод В.М.Бермена, Е. М. Славской. 1958).
Определение Т-лимфоцитов проводили методом спонтанного розеткообразования с эритрацитами барана (Е-РОК).
Определение В-лимфоцитов проводили методом розеткообразования с эритроцитами барана в системе ЕАС.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Распространение хронического эндометрита и кисты яичников у сук.
За период с 2006 по 2008гг. в клиниках «Далс» г.Королева и «Миф» г. Мытищи Московской области клиническому осмотру было подвергнуто 3657 собак, в связи с различными заболеваниями. В результате клинических и лабораторных исследований у 878 сук была выявлена патология репродуктивных органов(24%). У 128 сук был установлен диагноз хронический эндометрит (14,6%), у 60 сук хронический эндометрит был осложненный кистой яичников.
Данную патологию диагностировали в основном у нерожавших сук в возврасте от 5 до 10 лет преимущественно у боксеров, ротвейлеров, немецких и кавказских овчарок, спаниелей, беспородных и помесных собак.
Проведенный нами клинико-диагностический анализ больных сук указывает, что в 18,5% случаев мы выявляли в яичниках фолликулярные кисты диаметром от 0,3 до 1,6 см, а в 6,4% - лютеиновые кисты
Количество животных больных хроническим эндометритом осложненным фолликулярными кистами значительно больше, по сравнению с животными больными хроническим эндометритом осложненным лютеиновыми кистами. Причем количество больных животных из года в год заметно возрастает.
В большинстве случаев кисты яичников регистрировались совместно с хроническим эндометритом у сук.
При узи-диагностике в основном выявляли фолликулярные кисты, что достоверно подтверждалось высоким уровнем эстрогенов в крови у сук.
При фолликулярных кистах проэструс протекал без особенностей, хотя и значительно затягивался дольше. Через 3-4 недели от начала проэструса серозно-кровянистые выделения приобретали более густую дегтеобразную консистенцию.
Хронический эндометрит в основном, возникал в первые 6-7 недель метэструса. При вагинальной цитологии выявляли поверхностные ороговевшие клетки, причем степень ороговения не изменялась до конца проэструса.
Лютеиновые кисты встречались значительно реже. Диагноз устанавливали также с помощью ультразвукового исследования и на основании высокой концентрации прогестерона в крови у сук. Данная патология характеризуется существенно затянувшейся лютеиновой (диэструс) фазой и повышенной концентрацией прогестерона в крови животных.
При исследовании микрофлоры, выделенной из репродуктивных органов у сук, были выявлены кишечная палочка(27%), вульгарный протей(18%), стрептококки(23%), стафилококки(11%), ассоциации различной микрофлоры(19%), грибы рода аспергилиус и дрожжевые грибы (22%).
Для того, чтобы сохранить репродуктивные функции у особо ценных животных мы решили провести исследование параметров иммунной системы и неспецифической (естественной) резистентности защиты у сук и установить их взаимосвязь с гонадотропными гормонами с тем, что бы выработать эффективный метод лечения животных при данной патологии.
Таблица 1
Динамика содержания эстрадиола 17- в крови сук, при хроническом эндометрите и фолликулярных кистах яичников (пг/мл).
| Сроки исследования до лечения | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| 11,2±0,18 | 117,0±1,20 | p < 0,05 | 123,1±2,01 | p < 0,05 | |
| 5-е сутки | 10,8±0,80 | 94,3±1,13 | p < 0,05 | 120,0±1,03 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 11,0±0,29 | 82,1±0,22 | p < 0,05 | 87,3±0,26 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 10,3±0,72 | 51,3±0,63 | p < 0,05 | 48,3±0,84 | p < 0,05 |
| 30-е сутки | 10,7±0,39 | 11,6±0,41 | p > 0,05 | 10,9±0,38 | p > 0,05 |
Из данных таблицы 1 видно, что у животных второй и третьей опытных групп содержание эстрадиола 17- в крови до лечения было в 10, 5 и 11 раз выше, соответственно, чем у контрольных (здоровых) животных первой группы.
Это указывает на то что фолликулярные кисты яичников усиленно вырабатывают эстрогены, которые тормозят овуляцию. Тогда как у животных второй и третьей опытных групп различия в содержании эстрадиола в крови были менее существенны (всего в 1.1 раза p > 0,05).
На пятые сутки лечения содержание эстрадиола в крови животных второй опытной группы снизилось с данным показателем до лечения на 19,4%, а у животных третьей опытной группы данный показатель снизился соответственно 27,2%. Различия в показателях содержания эстрадиола у животных второй опытной группы по сравнению с животными контрольной группы были в 8,7 раза, у животных третьей опытной группы соответственно в 11, 1 раза.
На 14-е сутки лечения различия в содержании эстрадиола у животных второй опытной группы со здоровыми животными первой контрольной группы были в 5 раз, с животными третьей опытной группы соответственно в 4, 7 раза.
На 30-е сутки с начала лечения различия в показателях содержания эстрадиола у больных животных второй и третьей опытных групп по сравнению со здоровыми животными первой контрольной группы были недостоверны(p>0,05).
Таблица 2
Динамика содержания прогестерона в сыворотке крови сук при хроническом эндометрите и лютеиновых кистах яичников.(нг\мл)
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 5,9±0,12 | 64,8±1,13 | p < 0,05 | 69,1±1,74 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 5,4±0,20 | 43,4±1,06 | p < 0,05 | 46,4±0,71 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 6,1±0,07 | 42,0±1,33 | p < 0,05 | 46,4±0,71 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 6,0±0,17 | 24,3±1,29 | p < 0,05 | 20,3±1,46 | p < 0,05 |
| 30-е сутки | 5,8±0,23 | 6,2±0,28 | p > 0,05 | 6,1±0,09 | p > 0,05 |
Из табл.2 видно, что содержание прогестерона в сыворотке крови животных второй опытной группы до лечения в 11 раз выше, чем у здоровых животных первой контрольной группы, а у животных третьей опытной группы данный показатель в 11, 7 раза выше чем у животных первой контрольной группы.
На пятые сутки лечения содержание прогестерона в сыворотке крови у животных второй опытной группы была в 8 раз и у здоровых животных третьей опытной группы в 8, 6 раз выше соответственно по сравнению со здоровыми животными первой контрольной группы, тогда как различия между животными второй и третьей опытных групп были не существенны(p>0,05).
На тридцатые сутки с начала лечения животных концентрация прогестерона в сыворотке крови у сук второй опытной группы 6,2+-0,28 нг/мг, у животных третьей группы соответственно 6,1+-0, 09 нг/мг и у здоровых животных первой контрольной группы данный показатель был в пределах 5,8+-0,23нг/мл.
Следовательно, на 30е сутки лечения концентрация прогестерона в сыворотке крови у всех трех групп подобных животных была в пределах физиологического нормы, характерной для здоровых животных.
Таким образом, комплексный метод лечения сук больных хронического эндометрита осложненного кистой яичников позволяет на тридцатые сутки лечения концентрацию эстардиола 17 и прогестерона довести до параметров характерных здоровым животным.
Динамика показателей иммунитета и неспецифической (естественной) резистентности при хроническом эндометрите и кистах яичников у сук.
Таблица 3.
Динамика общего количества лимфоцитов в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичника (тыс /мкл)
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 2,16±0,05 | 3,20±0,01 | p < 0,05 | 3,23±0,08 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 2,22±0,02 | 2,18±0,06 | p < 0,05 | 2,20±0,03 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 2,12±0,07 | 2,10±0,03 | p < 0,05 | 2,19±0,08 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 2,25±0,03 | 2,17±0,04 | p < 0,05 | 2,20±0,01 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 2,20±0,09 | 2,13±0,03 | p < 0,05 | 2,24±0,03 | p > 0,05 |
Как можно видеть из табл. 3 общее количество лейкоцитов в крови сук всех 3х опытных групп в различные периодах лечения достоверных различий не имело.
Вероятно это свидетельствует о том, что при хроническом эндометрите воспалительный процесс в эндометрии матки носит скрытый характер и морфологическая характеристика клеток белой крови не имеет четко выраженных различий.
Таблица 4.
Динамика содержания Т-лимфоцитов в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичников( тыс/мкл)
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 2,3±0,15 | 1,4±0,19 | p < 0,05 | 1,43±0,09 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 2,3±0,21 | 1,3±0,17 | p < 0,05 | 1,5±0,07 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 2,2±0,18 | 1,5±0,06 | p < 0,05 | 1,7±0,23 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 2,3±0,23 | 1,7±0,08 | p < 0,05 | 2,3±0,21 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 2,2±0,11 | 2,1±0,13 | p > 0,05 | 2,4±0,26 | p > 0,05 |
Из результатов исследования видно, что содержание т-лимфоцитов в крови больных животных достоверно ниже, по сравнению с данным показателем у здоровых животных I контрольной группы. Если у здоровых животных I контрольной группы содержание Т-лимфоцитов в их крови в различные возрастные периоды не имело существенных изменений, то у больных животных II и III опытных групп начиная с 10 дня с начала лечения содержание Т-лимфоцитов в их крови постепенно начинает возрастать.Также из данных табл. 4 видно, что у больных животных второй и третьей опытных групп содержание Т-лимфоцитов в крови до начала их лечения было на 39,1% и 37,8% - соответственно ниже, чем у здоровых животных первой контрольной группы. Очевидно, что это указывает на достоверное (p<0,05) снижении параметров клеточного иммунитета при данной патологии.
Таблица 5.
Динамика содержания Т-хелперов в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичников(%).
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 22,4±1,03 | 15,2±1,05 | p < 0,05 | 14,7±0,09 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 22,1±0,08 | 16,2±1,13 | p < 0,05 | 16,4±0,10 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 22,8±0,19 | 17,2±0,06 | p < 0,05 | 18,7±1,17 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 23,0±1,21 | 17,8±1,27 | p < 0,05 | 22,6±1,30 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 22,5±1,24 | 17,5±1,32 | p < 0,05 | 22,8±1,14 | p > 0,05 |
Содержание лимфоцитов т-хелперов (помощников) в крови здоровых животных I контрольной группы составляло 22,4±1,03%, тогда как у больных животных II опытной группы их содержание составляло 15,2±1,05 % и у животных III опытной группы соответственно 14,7±0,09%.
Как можно видеть из результатов исследований, содержание Т-хелперов в крови у сук при хроническом эндометрите и кистах яичников было существенно ниже, чем у здоровых животных.
На тридцатые сутки с начала лечения больных животных третьей опытной группы, содержание Т-хелперов в крови достигло аналогичного показателя у здоровых животных. Вероятно, что доведение параметров Т-хелперов у больных животных третьей опытной группы до величин характерных здоровым животным первой контрольной группы является следствием благотворного воздействия иммуномодулятора баксина на иммунную систему больных животных.
Таблица 6.
Динамика содержания Т-супрессоров в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичника(%).
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 11,3±1,2 | 19,7±0,6 | p < 0,05 | 21,0±0,8 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 11,7±1,6 | 19,3±0,4 | p < 0,05 | 18,2±0,03 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 12,4±1,1 | 18,6±0,01 | p < 0,05 | 15,0±0,09 | p < 0,05 |
| 14-е сутки | 12,8±0,7 | 17,9±0,09 | p < 0,05 | 12,6±0,01 | p > 0,5 |
| 30-е сутки | 12,5±1,1 | 16,8±0,02 | p > 0,05 | 12,8±0,8 | p > 0,05 |
Таким образом, из таблицы 6 видно, что содержание Т-супрессоров в крови сук второй и третьей опытных групп было достоверно выше(p<0,05), чем у здоровых животных первой контрольной группы. На четырнадцатые сутки с начала лечения,с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет» удалось существенно снизить содержание Т-супрессоров в крови у сук, а значит и снизить иммунодепрессивное воздействия популяции лимфоцитов на организм больных животных.
Таблица 7
Динамика показателей содержания В-лимфоцитов в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичника (тыс. мкл).
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 0,82±0,19 | 0,61±0,23 | p < 0,05 | 0,64±1,17 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 0,86±0,14 | 0,63±0,17 | p < 0,05 | 0,70±2,11 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 0,86±0,27 | 0,72±0,09 | p < 0,05 | 0,84±0,17 | p > 0,05 |
| 14-е сутки | 0,90±2,15 | 0,88±0,23 | p > 0,05 | 0,99±0,28 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 0,88±1,19 | 0,89±0,111 | p > 0,05 | 0,92±0,22 | p > 0,05 |
Из данных представленных в табл.7 можно видеть что содержание В-лимфоцитов в крови у сук больных хроническим эндометритом и кистой яичников до лечения было достоверно (p<0,05)ниже, чем у здоровых животных. Так, у сук второй опытной группы содержание В-лимфоцитов было на 25,6% ниже, а у животных третьей опытной группы на 21,9% ниже, чем у здоровых животных первой контрольной группы.
Данный факт указывает на то, что у больных животных второй и третьей опытных групп существенно снижен гуморальный иммунитет.
Таблица 8.
Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов крови(%).
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 64,3±0,15 | 68,3±0,08 | p > 0,05 | 68,7±0,13 | p > 0,05 |
| 5-е сутки | 65,0±0,23 | 68,8±0,17 | p > 0,05 | 66,3±0,08 | p > 0,05 |
| 10-е сутки | 66,1±0,17 | 67,4±0,20 | p > 0,05 | 66,8±0,29 | p > 0,05 |
| 14-е сутки | 65,7±1,43 | 64,2±1,63 | p > 0,05 | 65,9±0,77 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 65,9±1,80 | 65,3±1,58 | p > 0,05 | 66,0±1,24 | p > 0,05 |
Из таблицы 8 видно, что фагоцитарная активность нейтрофилов крови у сук второй и третьей опытных групп больных хроническим эндометритом и кистой яичников до лечения животных была незначительно выше, чем у здоровых животных первой контрольной группы(p>0,05).
Таблица 9.
Динамика содержания лизоцима в сыворотке крови(мкг\мл).
| Сроки исследования | Группы животных | ||||
| первая | вторая | P | третья | p | |
| До лечения | 32,4±1,26 | 48,2±1,13 | p < 0,05 | 47,8±0,82 | p < 0,05 |
| 5-е сутки | 31,7±1,14 | 45,1±2,01 | p < 0,05 | 42,7±1,34 | p < 0,05 |
| 10-е сутки | 32,1±01,02 | 43,4±0,86 | p < 0,05 | 32,4±0,23 | p > 0,05 |
| 14-е сутки | 32,8±0,73 | 31,9±1,17 | p > 0,05 | 31,6±1,10 | p > 0,05 |
| 30-е сутки | 32,2±0,80 | 32,0±1,16 | p > 0,05 | 32,0±0,28 | p > 0,05 |
Из таблицы 9 видно, что у сук второй и третьей опытных групп содержание лизоцима в сыворотке крови до начала лечения было на 48,8% и 47,5% выше соответственно, чем у здоровых сук первой контрольной группы(p<0,05).
По нашему мнению высокий уровень лизоцима в сыворотке крови больных животных указывает на наличие воспалительного процесса в организме животных. Вероятно, что высокая активность лизоцима в сыворотке крови больных животных играет существенную роль в подавлении воспалительного процесса в репродуктивных органах сук, так как лизоцим является одним из основных факторов неспецифической защиты организма животных.
На десятые сутки лечения животных концентрация лизоцима у здоровых животных первой контрольной группы и больных животных третьей опытной группы достоверных различий не имела(p>0,05).
Очевидно, что данный факт является следствием воздействия на иммунную систему больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет», который за счет коррекции параметров иммунитета(Т- и В-лимфоцитов) и факторов естественной резистентности(фагоцитоз),лизоцим купировал воспалительный процесс в матке у сук, тем самым параметры иммунитета и резистентности нормализовались в связи с выздоровлением животных.
Таблица 10.
Сравнительная эффективность различных методов лечения хронического эндометрита и кисты яичников у сук
| Показатели | Группы животных | ||
| 1-я группа | 2-я группа | 3-я группа | |
| 1.Количество животных, гол. | 20 | 20 | 20 |
| 2.Выздоровело без рецидива кист, гол. | - | 16 (80%) | 20(100%) |
| 3.Число рецидивов кист. гол. | - | 4 | - |
| 4.Средняя продолжительность лечения, дн. | - | 14 | 10 |
| 5.Проведено лапаротомии, гол. | - | 4 | - |
Как можно видеть из табл. 10 из 20 сук второй опытной группы при традиционном методе лечения выздоровело 16 животных(80%), в третьей опытной группе из 20 животных выздоровело 20, т.е. 100%.
Таким образом, предложенный нами комплексный метод лечения хронического эндометрита у сук осложненного кистой яичников с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет» позволяет восстановить иммунитет животных в течение 10 дней, вылечить животных без появления рецидивов заболевания, а также обеспечить у 12 сук проявление нормальной «пустовки» в течение ближайших 2-3х месяцев, плодотворную вязку и получение потомства).
Мы предполагаем что состояние иммунодефицита в организме сук, больных хроническим эндометритом с кистой яичников, связана с высоким содержанием в их крови стероидных половых гормонов. Так, концентрация эстрадиола и прогестерона в крови больных животных до начала их лечения была в 10-11 раз больше, чем у здоровых животных. В то же время нами было установлено, что концентрация Т-лимфоцитов, в том числе Т-хелперов, в крови больных животных до начала их лечения была существенно ниже, чем у здоровых животных, а вот содержание лимфоцитов Т-супрессоров в крови больных животных было многократно выше по сравнению с данным показателем у здоровых животных.
Использование при комплексном лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет» позволяет существенно снизить к четырнадцатому дню лечения животных,содержание в их крови гормонов – эстрадиол и прогестерон. Также очевидно, что на четырнадцатый день лечения больных животных содержание в их крови В-лимфоцитов, а также лимфоцитов Т-хелперов и Т-супрессоров достигает параметров, характерных для здоровых животных.
Результаты проведенных нами исследований показывают, что при традиционном методе лечения больных животных с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых и гормональных препаратов, параметры клеточного иммунитета(Т-лимфоциты) даже на тридцатый день с начала лечения не достигают величин характерных для здоровых животных. Тогда как параметры гуморального иммунитета(В-лимфоциты), а также факторы неспецифической резистентности(лизоцим) на четырнадцатые сутки с начала лечения больных животных второй опытной группы достигают нормы. Данный факт указывает на то, что при хроническом эндометрите и дисфункции яичников у сук больше всего угнетается клеточный иммунитет и несколько меньше гуморальный. Так как параметры клеточного иммунитета даже после тридцати дней с начала лечения не достигают нормы, тогда как параметры гуморального иммунитета на четырнадцатый день с начала лечения достигают величин характерных для здоровых животных.
Вероятно, что высокая концентрация эстрадиола 17 и прогестерона в крови больных животных более всего угнетает факторы клеточного иммунитета и меньше гуморального.
Использование при комплексном лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет»(третья опытная группа) позволяет к четырнадцатому дню с начала лечения устранить состояние иммунодефицита в их организме и значительно повысить эффективность их лечения.
ВЫВОДЫ
- У 24% обследованных сук была установлена патология репродуктивных органов, в том числе у 14,6% сук из числа обследованных, был установлен диагноз – хронический эндометрит осложненный кистой яичников. В результате клинических и диагностических исследований было установлено, что у 18,5% сук хронический эндометрит сочетался с фолликулярными кистами, а у 6,4% - с лютеиновыми кистами.
2. При фолликулярных кистах отмечалась достоверно высокая концентрация эстрогенов в крови больных сук. Так, содержание эстрадиола 17 в крови больных животных достигало 123,1пг\мл, тогда как у здоровых животных содержание эстрадиола 17 в крови составляло – 11,7пг\мл. При этом фаза проэструс значительно удлинялась.
При лютеиновых кистах в крови больных животных отмечали высокую концентрацию прогестерона до 69,1 нг\мл, тогда как у здоровых животных содержание прогестерона в крови было на уровне 5,9 нг\мл.
При лютеиновых кистах у сук значительно удлинялась фаза диэструс.
3. При исследовании микрофлоры, выделенной из цервикальной слизи у сук были выявлены кишечная палочка(27%), вульгарный протей(18%), стрептококки(23%), стафилококки(11%), ассоциации различной микрофлоры(19%), грибы(22%).
4. Установлено достоверное снижение в крови сук больных хроническим эндометритом и кистой яичников содержание Т-лимфоцитов – на 39,1%, лимфоцитов Т-хелперов на 34,4%, В-лимфоцитов – на 25,6%, фагоцитарной активности нейтрофилов крови на – 6,8%, что указывает на существенное снижение параметров иммунитета и неспецифической резистентности у больных животных, а повышение содержания лимфоцитов Т-супрессоров в крови больных животных на 85,8% указывает на состояние иммунодефицита.
5. Установлено,что содержание лизоцима в сыворотке крови здоровых сук составляет 32.4 мкг/мл.Содержание лизоцима в крови больных сук второй опытной группы 48,2 мкг/мл.,в третьей опытной группе 47,8 мкг/мл. При комплексном лечении с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет»содержание лизоцима в крови больных животных достигает параметров, характерных для эдоровых животных, в третьей опытной группе достигла к 10 дню, а во второй опытной группе к 30 дню с начала лечения.
6. Иммуносупрессивное воздействие половых гормонов эстрадиола и прогестерона приводит к сильному угнетению клеточных и гуморальных факторов иммунитета и неспецифической резистентности организма больных животных, что значительно затрудняет процесс их лечения.
7. Применение предложенной нами схемы лечения с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых и гормональных препаратов в сочетании с водно-солевыми растворами способствовали выздоровлению больных животных 2-й опытной группы в течение 14-ти дней. Однако вышеуказанная терапия не способствовала устранению состояния иммунодефицита в Т-системе иммунитета.
8. Использование комплексного метода лечения больных животных с включением в схему их лечения иммуномодулятора «Баксин-вет» в дополнение к указанным препаратам способствовало выздоровлению животных третьей опытной группы в течение 10 дней. Вероятно, что это произошло за счет более ранней коррекции клеточного и гуморального иммунитета и усиления факторов неспецифической резистентности у больных животных данной группы за счет использования при лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет».
ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
- Для профилактики хронического эндометрита и кисты яичников у сук необходимо проводить ежегодные плановые исследования животных с использованием узи-диагностики, клинических и лабораторных методов исследования с определением в их крови эстрадиола, прогестерона, а также основных показателей иммунитета и неспецифической(естественной) резистентности.
При клиническом исследовании животных обращать особое внимание на нарушения полового цикла, выделения из влагалища и непродуктивные вязки.
- При лечении эндометрита осложненного кистой яичников использовать комплексный метод, направленный на повышение резинстентности организма животных, повышение сократительной способности матки. Удаление экссудата из её полости. Создание в ней асептических условий, индицирование овуляции или лютеинизацию кисты.
- Собакам назначать антибиотики в максимальных дозах с учетом чувствительности выделенной из полости матки микрофлоры, наибольшую чувствительность выделенная микрофлора проявила к ципролету (ципрофлоксацин- антибиотик широкого спектра действия из групп фторхинолонов, обладающий нанаименьшим иммунодепресивным действием). В комплексе антибиотиков включать рокситромицин (антибиотик макролид), в дозе по 150 мг (1 таблетка) 2 раза в сутки внутрь вместе с кормом. Ципрофлоксацин вводить внутривенно по 0,3 г в 25-30 мл 0,9% р-ра натрия хлорида 2 раза в сутки.
Одновременно с антибиотиками внутрь назначать метронидазол (трихопол) по 0,2 г 2 раза в сутки, сульфаниламидный препарат – 10% р-р этазола натрия по 5 мл 2 раза в сутки внутривенно. Две капсулы иммуномодулятора Баксин один раз в день внутрь с кормом в течении 2х недель.
Для устранения грибковой микрофлоры применять микомакс по 100мг внутрь с кормом один раз в течении 5-7 дней.
Из гормональных препаратов при фолликулярных кистах внутримышечно однократно вводить 5 мкг Сурфагона, а при лютеиновых кистах яичников магоэстрофан также однократно внутримышечно в дозе по 0,2 мл.
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
- При сборе анамнеза учитывать возраст животного; характер питания, условия содержания; течение половых циклов; наличие или отсутствие родов; течение послеродового периода.
- При проведение акушерско-гинекологической диспансеризации у сук, особое внимание обращать на: структуру влагалищных мазков; гормональные показатели (прогестерон и эстрадиол); параметры специфического иммунитета и не специфической (естественной) резистентности.
- Результаты наших исследований подтверждают, что состояние иммунодефицита у сук больных хроническим эндометритом с кистой яичников, прежде всего связана с высоким содержанием в их крови этрадиола и прогестерона.
- Применение комплексного метода лечения сук больных хронического эндометрита осложненного кистой яичников с использованием: антимикробных, гормональных препаратов и имммуномодулятора «баксин-вет» способствуют: компенсации дефицита важнейших биологически активных веществ, которые в качестве неспецифических стимуляторов способны повышать параметры иммунитета и резистентности животных.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
- Федорович В.В. Возможность медикаментозного лечения эндометрита у сук, осложненного кистой яичников /В.В. Федорович// Международный вестник ветеринарии. Новые аспекты биотехнологии репродукции животных. Санкт-Петербург – 2008. - №3.- С. 39-41.
- Федорович В.В. Влияние иммунологических факторов на возникновение после родовых эндометритов у животных / А.М. Петров, М.А. Петров, В.В. Федорович, Е.В. Путилова, Г.М. Удалов// Международный вестник ветеринарии. Новые аспекты биотехнологии репродукции животных. Санкт-Петербург – 2008. - №3.- С. 42-45.
- Федорович В.В. Основные причины послеродовых заболеваний животных и современныхе методы их лечения. / А.М. Петров, М.А. Петров, В.В. Федорович, Е.В. Путилова, Г.М. Удалов, А.В. Панкратова// Материалы международной научно-практической конференции. Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их решения. Научные труды ВИЖа выпуск 64.Дубровицы – 2008. – с.428-431.
- Федорович В.В. Этиология и терапия хронического эндометрита у сук, осложненного кистой яичников/ В.В. Федорович // Ветеринария и кормление - №1.-2009. –с.18 – 19.
