Физиологический статус молодняка крупного рогатого скота после применения микрокапсулированного препарата, включающ е го пробиотик и селен

На правах рукописи

ЧЕЛНОКОВ Виктор Анатольевич

физиологический статус МОЛОДНЯКА

крупного рогатого скота после применения

микрокапсулированного препарата,

включающего пробиотик и селен

03.03.01 – физиология

автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Курск – 2013

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Курская государственная

сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова»

Научный руководитель:	Заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор биологических наук, профессор Сеин Олег Борисович
Официальные оппоненты:	Ерёменко Виктор Иванович, доктор биологических наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова», заведующий кафедрой эпизоотологии, радиобиологии и фармакологии
	Джавадов Абульфат Калвалы оглы, доктор биологических наук, профессор, Мценского филиала ФГБОУ ВПО «Госуниверситет УНПК», заведующий кафедрой химии, экологии и землеустройства
Ведущая организация:	ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I»

Защита состоится 29 ноября 2013 г. в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 220.040.03 при ФГБОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова» по адресу: 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70. Тел. (4712) 53-13-30, факс (4712) 53-84-36.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова».

Автореферат диссертации опубликован на официальном сайте ФГБОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова» и на Интернет-сайте ВАК: http: //vak2.ed.gov.ru

Автореферат разослан 28 октября 2013 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Рыжкова Галина Федоровна

Общая характеристика работы

Актуальность темы. В современных условиях интенсивного развития сельского хозяйства важное место отводится дальнейшему увеличению производства продуктов животноводства. особая роль в решении этой задачи принадлежит выполнению комплекса общехозяйственных мероприятий, предусматривающих создание необходимых условий содержания и кормления животных.

В последние годы для сбалансирования рационов сельскохозяйственных животных, в том числе и крупного рогатого скота, кроме традиционных питательных и минеральных веществ получили широкое применение пробиотики – биологические препараты, представляющие собой стабилизированные культуры симбионтных микроорганизмов или продукты их ферментации.

Актуальность использования пробиотических препаратов обусловлена, прежде всего, их биологическим спектром действия на организм животных. Попадая в желудочно-кишечный тракт, активно размножаясь, пробионты осуществляют неспецифический контроль за численностью условно-патогенной микрофлоры, вытесняют ее из состава кишечной популяции и сдерживают проявление факторов патогенности у ее представителей. В настоящее время пробиотические препараты используют в практике животноводства и ветеринарной медицины для улучшения процессов пищеварения у животных с целью стимуляции роста, устранения расстройств желудочно-кишечного тракта, повышения неспецифической резистентности организма (Л.В. Харитонов и др., 1990, 1991; М.А. Сидоров и др., 1998, 2000; А.Н. Панин, 2000; Б.В. Тараканов, 2000; Е.В. Малик и др., 2001, 2002; В.В. Субботин, 2002; Н.В. Данилевская и др., 2005; M. Blanchet, 1986; R. Fuller, 1989.

Биологическими предприятиями выпускаются различные коммерческие формы пробиотических препаратов, содержащие живые микробные клетки в лиофилизированном и жидком состоянии, с наполнителями и без них. Такие препараты включают в свой состав как отдельные пробиотические микроорганизмы, так и несколько видов бактерий. При этом одной из важных характеристик полученного пробиотика является его способность длительно сохранять живые клетки и поддерживать их жизнеспособность при прохождении микроорганизмов до нижних отделов кишечника. Поэтому микроорганизмы–пробионты должны быть устойчивыми к рН желудка и желчи. К сожалению, большинство микроорганизмов обладают слабо выраженными «защитными» свойствами и, пройдя через кислую среду желудка, значительная часть их погибает (Б.В. Тараканов, 2000; И.Ю. Чечерин и др., 2012). В этой связи в последние годы появились капсулированные пробиотические препараты, «упакованные» в полимерные или желатиновые капсулы, которые преимущественно используются в медицине. В ветеринарной практике и животноводстве они не нашли широкого применения в связи с относительно высокой стоимостью и сложностью введения в организм продуктивных животных.

В Юго-Западном государственном университете на кафедре органической и аналитической химии была разработана технология микрокапсулирования пробиотических препаратов как в отдельности, так и в комплексе с другими биологически активными веществами, в частности был получен препарат «ВетСел», включающий пробиотик «Ветом 1.1» и селен. Микрокапсулы препарата обладают устойчивостью к кислой среде желудка и разрушаются под действием кишечных ферментов, что позволяет «доставлять» пробиотик без потерь непосредственно в кишечник животных.

В связи с появлением микрокапсулированных пробиотиков возникает необходимость изучения их влияния на физиологические, биохимические и продуктивные показатели сельскохозяйственных животных.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы являлось изучение физиологического статуса у молодняка крупного рогатого скота при использовании микрокапсулированного препарата «ВетСел».

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить клиническое состояние и общие гематологические показатели у телят и бычков на откорме при использовании препарата «ВетСел».

2. Провести исследование биохимического статуса у молодняка крупного рогатого скота после скармливания препарата «ВетСел».

3. Дать оценку функционального состояния щитовидной железы у подопытных животных после применения препарата «ВетСел».

4. Установить интенсивность роста молодняка крупного рогатого скота при использовании препарата «ВетСел».

5. Определить содержание белкового азота в органах, химический состав и энергетическую ценность мяса у бычков на откорме после применения препарата «ВетСел».

6. Разработать способ коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота и провести его производственную апробацию.

Научная новизна. Впервые изучен физиологический и биохимический статус у молодняка крупного рогатого скота при использовании микрокапсулированного препарата «ВетСел». Установлена биологическая эффективность данного препарата, направленная на нормализацию обмена веществ и повышение интенсивности роста животных. Показано, что препарат «ВетСел» оказывает положительное влияние на эритропоэз, обмен белков и углеводов, обладает антиоксидантными и ростостимулирующими свойствами.

Отличие результатов исследований от результатов, полученных другими авторами, заключается в том, что впервые проведены комплексные исследования физиологических и биохимических параметров у молодняка крупного рогатого скота при использовании микрокапсулированного препарата «ВетСел», также выявлено преимущество микрокапсулированного препарата по сравнению с пробиотиком «Ветом 1.1» и селенсодержащим препаратом «Сел-Плекс», используемых в традиционных формах.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты комплексных исследований физиологических и биохимических параметров у молодняка крупного рогатого скота дополняют существующие представления о интерьерных перестройках, происходящих в желудочно-кишечном тракте и в организме в целом, при использовании пробиотических препаратов и селена. Раскрыта роль микрокапсул в искусственной фаунизации кишечника у крупного рогатого скота.

Предложен производству способ коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота с использованием препарата «ВетСел».

Реализация результатов исследований. Результаты диссертационной работы внедрены в ООО «Агроресурс Молоко» Ольховатского района Воронежской области, в учебно-опытном хозяйстве «Знаменское» Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова. Материалы диссертации включены в рекомендации производству «Применение пробиотиков в животноводстве и ветеринарной медицине» (Курск, 2013 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты комплексных клинических и физиологических исследований у молодняка крупного рогатого скота при использовании микрокапсулированного препарата «ВетСел»;

- показатели морфологического и биохимического состава крови у молодняка крупного рогатого скота после применения препарата «ВетСел»;

- параметры, отражающие функциональное состояние щитовидной железы у телят и бычков на доращивании, получавших препарат «ВетСел»;

- влияние микрокапсулированного препарата «ВетСел» на рост, развитие, мясную продуктивность бычков, а также биологическую и энергетическую ценность говядины;

- способ коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота с использованием препарата «ВетСел».

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на:

- Международной научно-практической конференции «Развитие аграрного сектора в условиях вступления России в ВТО (Смоленск, 2012 г.);

- Международной научно-практической конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2012 г.);

- Международной научно-практической конференции «Современные проблемы развития животноводства» (Брянск, 2012 г.);

- Международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Агропромышленный комплекс: контуры будущего» (Курск, 2012 г.);

- Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы агропромышленного производства» (Курск, 2013 г.);

- Международный научно-практической конференции «Интегративные тенденции в медицине и образовании» (Москва, 2013 г.).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 8 научных статей, в том числе 2 в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 169 страницах компьютерного текста и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения. Работа содержит 22 рисунка и 29 таблиц. Список литературы включает 224 источника, в том числе 46 на иностранных языках.

2. Материал и методы исследований

Диссертационная работа выполнялась в период 2010-2013 гг. по прилагаемой схеме (рисунок 1) на кафедре терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова и ООО «Агроресурс Молоко» Ольховатского района Воронежской области.

Объектом исследований являлись телята и бычки красно-пёстрой породы, которых подбирали в группы по принципу аналогов с учетом происхождения, массы тела, возраста и развития.

Все подопытные животные содержались в типовых помещениях, параметры микроклимата которых соответствовали зоогигиеническим требованиям. Кормление животных осуществлялось согласно нормам ВИЖ.

Работа состояла из трех экспериментов, в которых изучали общие свойства микрокапсулированного препарата «ВетСел» и его влияние на физиологический статус молодняка крупного рогатого скота.

Микрокапсулированный препарат «ВетСел» включает в свой состав пробиотик «Ветом 1.1», содержащий рекомбинантный штамм Bacillus subtilis ВКПМВ-10641 с концентрацией микроорганизмов - 1106/г и органический селен в форме препарата «Сел-Плекс» (фирма «Оллтек»).

Первый эксперимент был посвящен определению общих биологических свойств макрокапсулированного препарата в условиях in vitro, имитирующих пищеварение в различных участках желудочно-кишечного тракта крупного рогатого скота.

Для этого получали жидкое содержимое преджелудков, сычуга и кишечника путем пресс-фильтрации, фильтрации через ватно-марлевый фильтр, центрифугирования и фильтрации через керамический фильтр. В фильтраты вносили препарат «ВетСел» (одну дозу) и инкубировали при 37С в течение 4 часов и подсчитывали общее количество пробиотических бактерий с использованием камеры Горяева.

Рисунок 1 – Общая схема исследований

Во втором эксперименте изучали физиологическое состояние, интенсивность роста и развития телят молочного периода после скармливания препарата «ВетСел». С этой целью было отобрано 3 группы телят –аналогов 30-дневного возраста по 10 голов в каждой.

Телята 1 опытной группы получали препарат «ВетСел», который включали в рацион индивидуально каждому теленку с сухой стартерной подкормкой. Схема применения препарата «ВетСел» предусматривала его скармливание в дозе 60 мг на 1 кг тела животного один раз в день через день в течение 10 дней. Телята 2 опытной группы получали с подкормкой пробиотик «Ветом 1.1» в дозе 50 мг на 1 кг массы тела животного одновременно с селенсодержащим препаратом «Сел-Плекс» в дозе 200 мг на 1 кг подкормки. Скармливали препараты животным 2 опытной группы по той же схеме, что и телятам 1 опытной группы. Телята 3 группы являлись контрольными, они препараты не получали.

Содержались телята всех групп в одинаковых условиях и получали одинаковый рацион. Ежемесячно у телят определяли массу тела. При проведении эксперимента у 7 телят из каждой группы брали кровь для лабораторного анализа до начала эксперимента (30 дн.), а затем в 90- и 180-дневном возрасте. В 90 и 180 дней у телят получали рубцовое содержимое для определения общего количества бактерий и инфузорий.

Третий эксперимент был посвящен изучению физиологического состояния, интенсивности роста и развития бычков на откорме после скармливания препарата «ВетСел». Для этого было сформировано три группы бычков-аналогов 9-месячного возраста по 10 голов в каждой.

Бычки 1 опытной группы получали препарат «ВетСел», который скармливали с небольшим количеством комбикорма индивидуально каждому бычку в дозе 60 мг на 1 кг массы тела один раз в день через день в течение 10 дней. Затем препарат скармливали один раз в день каждые 10 дней до окончания откорма. Бычки 2 опытной группы получали пробиотик «Ветом 1.1» в дозе 50 мг/кг одновременно с селенсодержащим препаратом «Сел-Плекс» в дозе 200 мг на 1 кг сухого корма по той же схеме, что и животные 1 опытной группы. Бычки 3 контрольной группы препараты не получали.

У 7 бычков из каждой группы брали кровь для лабораторного анализа до начала эксперимента (9 мес.), а затем в 13- и 16- месячном возрасте. В эти же периоды получали рубцовое содержимое для определения общего количества бактерий и инфузорий.

По достижении бычками 16-месячного возраста из каждой группы было убито по 5 голов. При убое животных измеряли длину кишечника, а также отбирали пробы печени, тонкого отдела кишечника и длиннейшей мышцы спины для определения белкового азота.

Кровь, пробы отобранных органов и мышечная ткань длиннейшего мускула спины подвергались исследованию с использованием комплекса методов.

Физиологические методы предусматривали общий гематологический анализ (содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина), который проводили с использованием автоматического анализатора Abacus Junior Vet. Подсчет общего количества бактерий и инфузорий в содержимом рубца исследовали в камере Горяева.

Биохимические методы. Общий белок определяли рефрактометрически на рефрактометре РЛУ-1. Белковые фракции исследовали методом электрофореза на мембранах «Владипор» МФАС-ОС-1, сканирование электрофореаграмм проводили на динситометре при длине волны 540 нм. Содержание глюкозы, общих липидов, общего кальция, неорганического фосфора, общего магния, витаминов А, В, Е и ферментативную активность Ас-АТ и Ал-АТ устанавливали с использованием наборов «Био-Ла-Тест» (фирма «Лахема»), «Клини-Тест» и спектрометре ICAP 6000 Series. Концентрацию селена в крови животных определяли флуориметрическим методом на флуориметре ЭФ-3М с использованием 3,3 диаминбензидина. Уровень малонового диальдегида (МДА) в крови оценивали по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой, с последующей инкубацией в присутствии тритона Х-100 и определением оптической плотности образовавшегося триметинового комплекса при 532 нм (В.В. Рогожин и др., 2004). Концентрацию в крови гормонов щитовидной железы трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) определяли иммуноферментным методом. Содержание белкового азота в органах исследовали методом Кьельдаля.

Биометрические методы. Полученные в экспериментах данные подвергались биометрической обработке (П.Ф. Рокицкий, 1993). Степень достоверности различий вычисляли с использованием критерия Стьюдента. Обработку цифрового материала проводили на ПК с применением программы «Microsoft Excel».

3. Результаты исследований

3.1. Общая характеристика микрокапсулированного препарата «ВетСел»

Препарат «ВетСел» был изготовлен на кафедре органической и аналитической химии Юго-Западного государственного университета. Оригинальная технология и авторское оборудование, разработанные профессором кафедры А.А. Кролевцом, позволяют проводить микрокапсулирование веществ, обладающих как плотной (порошковые вещества), так и гидрофильной структурой (эмульсии, дисперсии, суспензии, коллоидные растворы).

В отличие от существующих макрокапсул, имеющих желатиновую или полимерную оболочку, микрокапсулы представляют собой образования шаровидной или близкой к таковой геометрическую форму. Микрокапсулы могут быть однослойными, с одной оболочкой и многослойными - с внешней и внутренней оболочками.

В качестве однослойной оболочки микрокапсул был использован биополимерный материал, а в качестве их ядра (внутреннего содержимого) – пробиотик и селенсодержащий препарат.

Разработанная технология предусматривает получение микрокапсул с заданными физическими и структурномеханическими характеристиками, такими как размер капсул, толщина и проницаемость оболочки, устойчивость к воздействию ферментов и температуры. Важной характеристикой микрокапсул является соотношение оболочки к внутреннему содержимому капсул.

Основной целью капсулирования указанных препаратов являлась их транзитная доставка в кишечник. При этом микрокапсулы выполняют роль контейнеров, обеспечивающих эту доставку.

Для изучения «поведения» микрокапсулированного препарата «ВетСел» в организме животных были проведены опыты в условиях in vitro, имитирующих пищеварение в различных участках желудочно-кишечного тракта крупного рогатого скота.

При убое клинически здоровых животных на боенской площадке осуществляли отбор содержимого преджелудков, сычуга и кишечника. Полученное содержимое подвергали пресс-фильтрации, фильтрации через ватно-марлевый фильтр и центрифугированию. Для освобождения надосадочного центрифугата от бактерий–симбионтов его пропускали через керамический фильтр и полученных фильтрах определяли рН.

Затем в пробирки с фильтратами из разных отделов желудочно-кишечного тракта помещали препарат «ВетСел» и инкубировали при 37С в течение 4 часов. После инкубации проводили подсчет общего количества бактерий в камере Горяева.

Результаты исследований показали, что после 4-часовой инкубации в фильтратах содержимого преджелудков пробиотические бактерии обнаруживались в количестве 1,1-1,2102 КОЕ/мл, в фильтрах сычуга они отсутствовали. В фильтрате содержимого тонкого отдела кишечника содержание пробиотических бактерий было наибольшим (1,4106КОЕ/мл), что связано с комплексом ферментов кишечного сока, действие которых является «агрессивным» по отношению к структуре капсул и разрушает их. В результате содержимое капсул поступает в полость кишечника.

Пробиотические бактерии быстро распространяются по всему кишечнику и начинают «продуцировать» биологически активные вещества, оказывающие как прямое действие на патогенные микроорганизмы, так и опосредованно, через активацию неспецифических факторов защиты макроорганизма. В свою очередь селенсодержащий препарат стимулирует систему ферментативной антиоксидантной защиты организма. В результате у животных активируются процессы пищеварения, повышается моторика и всасывающая функция кишечника, усиливается обмен веществ.

Изготовленный микрокапсулированный препарат был подвергнут проверке с учетом Методических рекомендаций Роспотребнадзора «Оценка безопасности наноматериалов» (приказ №280, от 12.10.2007 г.). Результаты исследований показали, что препарат «ВетСел» не оказывает отрицательного влияния на организм животных и относится к малотоксичным соединениям.

Внешне препарат «ВетСел» представляет собой сыпучее порошкообразное вещество белого цвета с желтоватым оттенком, без запаха. Хранят препарат при температуре не выше 25С, срок годности 24 мес.

3.2. общие гематологические показатели у телят, получавших биологически активные препараты

Учитывая, что кровь является наиболее специализированной тканью организма, которая поддерживает постоянство внутренней среды, осмотическое давление, рН буферных систем, а также является показателем физиологического состояния животного, нами были определены у подопытных телят общие гематологические параметры.

Результаты исследований показали, что содержание эритроцитов в крови телят всех групп до постановки на эксперимент не имело достоверных различий (Р>0,05) и находилось в пределах 5,7±0,15 – 6,2±0,3210 12/л. В последующие возрастные периоды содержание эритроцитов у телят, получавших биологически активные препараты повысилось и у телят 1 опытной группы составляло – 6,3±0,15 – 6,8±0,121012/л (Р<0,05) и у 2 опытной группы - 6,2±0,24 – 6,5±0,211012/л (Р<0,05). У контрольных животных содержание эритроцитов в период эксперимента изменялось незначительно и находилось в пределах 5,6±0,12 – 0,121012/л (Р>0,05).

Концентрация гемоглобина в крови телят изменялась параллельно динамике содержания эритроцитов. До начала эксперимента уровень гемоглобина в крови телят всех групп был практически одинаковым (100,5±2,6 – 108,5±2,4 г/л), затем у телят, получавших препараты, он повысился и составлял у животных 1 опытной группы 111,5±3,0 – 118,5±3,6 г/л, а у 2 опытной группы – 110,5±2,5 – 114,0±5,3 г/л.

Что касается лейкоцитов, то их содержание у телят опытных групп в месячном возрасте было относительно высоким и находилось в пределах 6,2±0,21 – 7,0±0,15109/л. В последующие возрастные периоды оно уменьшилось и достигало 5,8±0,24 – 6,0±0,15109/л. У контрольных животных изменения содержания лейкоцитов в период эксперимента имели недостоверный (Р>0,05) характер и находились в границах 6,4±0,21 – 6,6±0,15109/л.

3.3. биохимические показатели у телят, получавших биологически активные препараты

Результаты исследований показали, что у телят, получавших биологически активные препараты, в период эксперимента содержалось больше по сравнению с контрольными животными общего белка на 3,8 – 5,8 г/л, альбуминов – на 1,1 – 2,3%, гамма-глобулинов – на 3,1 – 5,4%, глюкозы – на 0,11 – 0,26 ммоль/л, общего кальция – на - 0,13-0,23 ммоль/л, неорганического фосфора – на 0,10 – 0,31 ммоль/л, селена – на 0,20 – 0,39 мкмоль/л, витамина А – на 0,07 – 0,10 мкмоль/л, витамина Е – на 0,3-2,6 мкмоль/л. В то же время в крови телят 1 и 2 опытной групп содержалось меньше альфа-глобулинов (12,8±0,1 – 15,7±0,4%) и МДА (0,18±0,02 – 0,27±0,02 мкмоль/л) по сравнению с контрольными животными (19,2±1,1 – 21,1±1,2%; 0,30±0,02 – 0,33±0,02 мкмоль/л).

В содержании бета-глобулинов и общих липидов в крови подопытных телят достоверных различий в период эксперимента выявлено не было.

Что касается тиреоидных гормонов, то в крови телят, получавших биологически активные препараты содержание Т3 (2,33±0,04 – 2,41±0,05 нмоль/л) и Т4 (73,0±1,9 – 77,8±2,6 нмоль/л) в 3-месячном возрасте повысилось, а в 6 мес, наоборот, понизилось (Т3 – 2,07±0,04 – 2,11±0,02 и Т4 – 66,3±2,9 – 68,8±2,6 нмоль/л).

Ферментативная активность аминотрансфераз у телят опытных групп (АЛТ – 1,95±0,04 – 2,14±0,04; АСТ – 3,24±0,02 – 3,40±0,04 мкмоль/млч) была выше, чем у контрольных животных (АЛТ – 1,70±0,04 – 1,93±0,04; АСТ – 3,20±0,02 – 3,27±0,02 мкмоль/млч). Однако данное повышение не выходило за физиологические границы.

3.4. содержание бактерий и инфузорий в рубцовом содержимом у подопытных телят

Результаты исследований содержания общего количества бактерий и инфузорий в рубцовом содержимом показали, что в 3-месячном возрасте у телят 1 опытной группы и у контрольных животных существенных различий не было. В то же время в содержимом рубца телят 2 опытной группы общее содержание бактерий (8,0±0,4 млрд/мл) и инфузорий (118,4±3,6 тыс/мл) было достоверно (Р<0,05) меньше, чем у контрольных животных (11,4±0,6 млрд/мл; 149,4±4,8 тыс/мл).

У телят 6-месячного возраста изучаемые показатели увеличились, при этом достоверных различий между ними не было. Так, у телят 1 опытной группы содержание бактерий и инфузорий соответственно составляло 11,9±0,8 млрд/мл и 158,5±3,5 тыс/мл. У телят 2 опытной группы содержание бактерий составляло 10,6±0,5 млрд/мл, а содержание инфузорий – 149,0±3,3 тыс/мл.

В свою очередь сравнительный анализ показал, что полученные данные у телят 1 опытной группы существенно не отличались от данных контрольных животных, а у телят 2 опытной группы количество бактерий (10,6±0,5 млрд/мл) было достоверно (Р<0,05) меньше по сравнению с контролем (12,0±0,4 млрд/мл).

3.5. Интенсивность роста телят, получавших биологически активные препараты

Известно, что наиболее информативным показателем роста животного является живая масса тела, которая отражает процесс роста в соответствующие периоды его индивидуального развития. Поэтому для того чтобы получить представление о влиянии использованных активных препаратов на рост и развитие подопытных телят, нами были определены живая масса тела, среднесуточный прирост, относительный и абсолютный приросты.

В ходе исследований было установлено, что телята, получавшие препарат «ВетСел» и препараты «Ветом 1.1» и «Сел-Плекс», в 6-месячном возрасте увеличили свою массу тела в среднем соответственно на 118,0 кг и 110,0 кг, тогда как у их аналогов из контрольной группы это увеличение составило 100,1 кг (таблица 1).

Таблица 1 – Живая масса тела у телят, получавших биологически активные препараты, кг

Возраст, мес.	Группа
	1 опытная	2 опытная	3 контрольная
1	49,0±0,7	48,0±0,8	48,9±0,8
2	68,4±0,8	67,0±0,9	66,1±0,7
3	93,0±1,1	90,5±1,0	87,4±0,8
6	167,0±2,4	158,0±3,3	149,0±3,0

Примечание: * - при Р<0,05 по сравнению с контрольной группой

Аналогичные изменения у подопытных животных отмечались и по среднесуточным приростам массы тела. Так, у телят 1 опытной группы среднесуточные приросты массы в среднем за эксперимент находились в пределах 496,7-822,2 г, во второй опытной группе – 474,5-750,0 г, а у контрольных животных – 453,3-684,4 г.

Используемые в экспериментах биологически активные препараты оказывали положительное влияние и на величину абсолютного прироста живой массы. У телят всех групп отмечалась общая тенденция к увеличению этого показателя. Однако если у телят 1 и 2 опытных групп он соответственно составлял 59,1 кг и 56,8 кг, то у телят контрольной группы 52,1 кг.

Что касается относительного прироста живой массы, то у телят опытных групп он также был выше (32,3-32,8%), по сравнению с контрольными животными (30%).

3.6. Общие гематологические показатели у бычков, получавших биологически активные препараты

Результаты общих гематологических показателей у подопытных животных показали, что при постановке на опыт в 9-месячном возрасте содержание эритроцитов у бычков всех групп было практически одинаковым и колебалось в границах 6,0±0,06 – 6,3±0,061012/л. В 13-месячном возрасте содержание эритроцитов в крови бычков 1 опытной группы достоверно (Р<0,001) повысилось в среднем на 0,71012/л, а в 16 мес. – на 0,91012/л. У бычков 2 опытной группы содержание эритроцитов с увеличением возраста животных, также достоверно (Р<0,01-0,001) увеличилось соответственно на 0,4 и 0,71012/л. У бычков 3 контрольной группы содержание эритроцитов по сравнению с животными опытных групп было меньше (6,0±0,06 – 6,3±0,061012/л).

Содержание лейкоцитов в крови бычков всех групп в 9 мес. достоверных различий не имело (Р>0,05). Однако в 13 мес. у животных, получавших биологически активные препараты, их содержание уменьшилось и у бычков 1 опытной группы составляло 5,9±0,091012/л, а 2 опытной группы – 6,0±0,051012/л. У животных контрольной группы содержание лейкоцитов в эти периоды, наоборот, увеличилось до 6,4±0,061012/л.

Концентрация гемоглобина в крови подопытных бычков до начала эксперимента находилась на относительно низком уровне (108,4±1,3 – 110,4±2,1 г/л). В последующие возрастные периоды у бычков как опытных групп (114,4±1,1 – 121,0±1,1 г/л), так и контрольной группы (110,0±1,2 – 110,4±1,1 г/л) она повысилась. Однако данное повышение у животных контрольной группы было статистически недостоверным (Р>0,05).

3.7. Биохимические показатели у бычков, получавших биологически активные препараты

В ходе исследований было установлено, что у бычков, которым скармливали препараты, в крови содержалось больше по сравнению с контрольными животными общего белка на 1,2-4,9 г/л, альбуминов – на 0,5-5,5%, гамма-глобулинов – на 2,1-3,7%, глюкозы – на 0,11-0,42 ммоль/л, неорганического фосфора – на 0,01 – 0,12 ммоль/л, селена – на 0,16-0,44 мкмоль/л, витамина Е – на 0,5 – 2,2 мкмоль/л, витамина С – на 0,20 – 0,89 ммоль/л, Т3 – на 0,04 – 0,31 нмоль/л, Т4 – на 2,3 – 8,0 нмоль/л.

В то же время в крови бычков, получавших препарат «ВетСел» и «Ветом 1.1» + «Сел-Плекс» в крови содержалось меньше, чем у контрольных животных альфа-глобулинов на 1,8 – 7,4%, бета-глобулинов – на 0,8-2,5%, МДА – 0,04-0,22 мкмоль/л. При этом в содержании общих липидов у опытных (3,7±0,12 – 4,2±0,16 г/л) и контрольных животных (3,8±0,11 – 4,0±0,11 г/л) существенных различий (Р>0,05) выявлено не было.

Ферментативная активность АЛТ и АСТ крови бычков, получавших препараты (АЛТ – 2,05±0,05 – 2,33 мкмоль/млч; АСТ – 3,18±0,04 – 3,57±0,03 мкмоль/млч) превышала таковую у контрольных животных (АЛТ – 2,06±0,05 – 2,12±0,08; АСТ – 3,07±0,04- 3,35±0,04 мкмоль/млч), однако не выходила за пределы физиологических норм.

3.8. Содержание бактерий и инфузорий в рубцовом содержимом у подопытных бычков

Определение общего количества бактерий в рубцовом содержимом показало, что у 9-месячных бычков их содержание находилось в границах 11,6±0,72 – 12,4±0,57 млрд./мл. При этом различия по группам, между данным показателем, были статистически недостоверными (Р>0,05). В 13 мес. содержание бактерий у животных всех групп повысилось: у бычков 1 опытной группы в среднем на 1,4 млрд./мл, у бычков 2 опытной группы – на 0,8 млрд./мл и у контрольных животных – на 1,6 млрд./мл. В 16 мес. содержание бактерий в рубцовом содержимом бычков, получавших препараты, находилось в пределах 13,8±0,91 – 14,4±0,57 млрд./мл. У бычков контрольной группы содержание бактерий существенных различий с животными опытных групп не имело (Р>0,05) и составляло 14,8±0,8 млрд./мл. Сравнение полученных данных с фоновыми значениями показало, что в 16 мес. у бычков 1 опытной группы и у контрольных животных они были достоверно выше (Р<0,05 – 0,001).

При подсчете инфузорий в рубцовом содержимом подопытных бычков было установлено, что до начала эксперимента их общее количество составляло 187,7±5,8 -195,4±3,3 тыс./мл. Затем содержание инфузорий у бычков всех групп увеличилось. При этом у животных, получавших препараты, данное увеличение было менее выраженным (226,3±5,4 – 234,6±4,6 тыс./мл) по сравнению с контрольными животными (231,4±5,7 – 244,0±4,9 тыс./мл).

3.9. Длина кишечника у бычков, получавших биологически активные препараты

С целью выяснения влияния биологически активных препаратов на рост кишечника у подопытных животных нами были определены его линейные параметры.

Результаты измерений показали (таблица 2), что длина кишечника у бычков, которым скармливали препараты, была больше, чем у контрольных животных. Так, общая длина кишечника у бычков 1 опытной группы составляла 48,4±0,38 м, что на 1,1 м превышало длину кишечника у бычков 2 опытной группы и на 2,1 м у контрольных животных. При этом наиболее существенные различия отмечались в длине тощей и подвздошной кишки. В этом случае у бычков, получавших препарат «ВетСел», длина данного отдела кишечника была больше на 1,6 м, чем у бычков контрольной группы. Выявленные различия являлись статистически достоверными (Р<0,05).

Длина ободочной и прямой кишки у бычков, которым скармливали биологически активные препараты, также была достоверно больше (Р<0,05), чем у контрольных животных. Однако в этом случае различия между показателями были не столь значительными по сравнению с длиной тощей и подвоздошной кишкой.

Таблица 2 – Длина кишечника у бычков, получавших биологически активные препараты

Группа	Отделы кишечника, м
	длина всего кишечника	двенад-цатиперстная кишка	тощая и подвздошная кишка	слепая кишка	ободочная и прямая кишка
1 опытная	48,4±0,24*	1,0±0,08	38,0±0,28*	0,35±0,08	9,0±0,12*
2 опытная	47,3±0,31	0,9±0,05	37,3±0,20*	0,30±0,07	8,8±0,14*
3 контрольная	46,3±0,28	0,8±0,07	36,4±0,30	0,30±0,09	8,8±0,10

Примечание: * - при Р<0,05 по сравнению с контролем

Что касается двенадцатиперстной и слепой кишки, то их длина у опытных и контрольных животных достоверных различий (Р>0,05) не имела.

3.10. Особенности роста и развития подопытных бычков

Полученные нами данные свидетельствуют, что применяемые препараты оказывали положительное влияние на приросты массы тела у подопытных бычков.

Таблица 3 – Живая масса у бычков, получавших биологически активные препараты, кг

Возраст, мес.	Группа
	1 опытная	2 опытная	3 контрольная
9	241,0±0,8	240,0±1,6	242,0±1,7
10	272,0±2,1	269,0±2,2	269,0±1,9
11	306,0±1,9	302,0±1,8	296,0±2,0
12	336,0±2,3	334,0±2,1	324,0±2,4
13	369,0±2,0	363,0±2,5	353,0±2,7
14	398,0±2,7	392,0±3,0	381,0±3,5
15	430,0±3,0	419,0±3,3	408,0±3,7
16	461,0±3,4	446,0±3,1	433,0±3,5

Как следует из данных, представленных в таблице 3, в начале эксперимента (9 мес.) живая масса бычков как опытных, так и контрольной групп различались незначительно. Однако уже в 10-месячном возрасте имели место определенные различия между изучаемыми показателями. Бычки, получавшие препараты, росли более интенсивно, и в 12-месячном возрасте их живая масса была больше в 1 опытной группе в среднем на 12,0 кг, а во 2 опытной группе на 10,0 кг, чем у животных контрольной группы.

В последующие возрастные периоды различия между опытными и контрольными животными увеличились. Так, в конце эксперимента (16 мес.) у бычков, получивших препараты, масса тела превышала таковую у бычков контрольной группы: в 1 опытной группе на 28 кг, а во 2 опытной группе – на 13 кг.

3.11. Содержание белкового азота в тканях органов бычков, получавших биологически активные препараты

Результаты исследования содержания белкового азота показали (таблица 4), что в длиннейшей мышце спины, печени и стенке тонкого отдела кишечника у бычков, которым скармливали микрокапсулированный препарат «ВетСел» (1 опытная группа), его содержание было достоверно больше (Р<0,05), чем у животных контрольной группы и получавших некапсулированный препарат (2 опытная группа). Так, в длиннейшей мышце спины у животных 1 опытной группы белкового азота содержалось в среднем на 0,13 г% больше, чем у бычков 2 опытной группы и на 0,27 г% больше (Р<0,05), чем у контрольных животных. В тканях стенки тонкого отдела кишечника данные различия соответственно составляли 0,12 г% и 0,30 г% (Р<0,05), а в печени – 0,11 г% и 0,23%.

Таблица 4 – Содержание белкового азота в органах бычков, получавших биологически активные препараты

Показатели	Группа
	1 опытная	2 опытная	3 контрольная
Длиннейшая мышца спины, г%	2,77±0,04*•	2,64±0,03*	2,50±0,04
Стенка тонкого отдела кишечника, г%	2,57±0,04*•	2,45±0,03*	2,27±0,03
Печень, г%	2,81±0,04	2,70±0,03*	2,58±0,04

Примечание:

* при Р<0,05 по сравнению с контрольной группой

• - по сравнению 1 группы со 2-ой группой

Полученные результаты указывают на то, что в организме бычков, получавших биологически активные препараты, в частности азотсодержащих веществ, метаболизм протекал на более интенсивном уровне. В результате в органах и тканях у бычков опытных групп содержание белкового азота достоверно превышало таковое у контрольных животных.

3.12. Способ коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота

На основе результатов, полученных в ходе выполнения диссертационной работы, нами был разработан способ коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота.

Способ предусматривает применение микрокапсулированного препарата «ВетСел» при выращивании телят и бычков на откорме.

С этой целью телятам с 30-дневного возраста скармливают препарат «ВетСел» в дозе 60 мг на 1 кг массы тела один раз в день через день в течение 10 дней.

Бычкам на откорме скармливают с комбикормом препарат «ВетСел» в дозе 60 мг на 1 кг массы тела один раз в день через день в течение 10 дней. Затем препарат скармливают один раз каждые 10 дней до окончания откорма.

Производственная апробация способа показала, что бычки, получавшие препарат «ВетСел», были активными, имели хороший аппетит и развитие. Среднесуточные приросты массы тела у них (967-998 г) превышали таковые у контрольных животных (830-857 г). При этом у молодняка не регистрировались желудочно-кишечные заболевания. В то же время среди животных, не получавших препарат, имели место случаи функционального расстройства органов пищеварения незаразной этиологии.

Препараты оказывали положительное влияние на поедаемость грубых и сочных кормов, переваримость и усвояемость питательных компонентов рациона, что способствовало повышению продуктивности животных. Бычки, получившие препараты, лучше росли по сравнению с контрольными животными. В результате этого расход кормов на 1 ц прироста снизился в 1 опытной группе на 8,7%, во 2 опытной группе 6,8%, обменной энергии – соответственно на 8,6 и 6,7%, переваримого протеина – на 8,6 и 6,7%. Более высокая интенсивность роста бычков, получавших препараты, обеспечила снижение затрат труда на производство 1 ц прироста на 4,5-8,5%.

выводы

1. Микрокапсулированный препарат «ВетСел» в используемых дозах не оказывает отрицательного влияния на организм подопытных животных. У телят и бычков на откорме после скармливания препарата основные клинические и общие гематологические параметры находились в пределах физиологических границ.

2. Препарат «ВетСел» оказывает стимулирующее влияние на эритропоэз. После его скармливания у телят достоверно (Р<0,05 – 0,001) повышалось содержание в крови эритроцитов на 0,1-0,61012/л и гемоглобина – на 3,0-10,0 г/л, а у бычков соответственно – на 0,5 – 0,71012/л и 7,0 – 10,6 г/л.

3. У телят и бычков, получавших препарат «ВетСел» в период эксперимента, в крови содержалось больше общего белка, альбуминов, гамма-глобулинов, глюкозы, общего кальция, неорганического фосфора, селена, витаминов А, Е и С по сравнению с контрольными животными и животными, получавшими препараты «Ветом 1.1» и «СелПлекс».

4. Ферментативная активность аминотрансфераз (АЛТ, АСТ) крови у животных после скармливания препарата «ВетСел» повышалась по сравнению с контролем и фоновыми показателями, однако не выходила за границы физиологических норм, что свидетельствует об отсутствии отрицательного влияния препарата на функциональное состояние печени.

5. Препарат «ВетСел» обладает антиоксидантными свойствами, после его применения у телят и бычков снижается в крови содержание малонового диальдегида, повышается содержание селена, витаминов А, Е и С.

6. Скармливание подопытным животным микрокапсулированного препарата «ВетСел» и препаратов «Ветом 1.1» и «Сел-Плекс» сопровождалось изменением функциональной активности щитовидной железы: у телят отмечалось увеличение содержания тиреоидных гормонов в 3-месячном возрасте и последующее снижение в 6 мес.; у бычков содержание тиреоидных гормонов в период эксперимента было достоверно (Р<0,05 – 0,01) больше, чем у животных, которые препараты не получали.

7. Препарат «ВетСел» не оказывал отрицательного влияния на биоценоз рубца. После его применения у телят в рубцовом содержимом содержание бактерий составляло 10,8±0,6 – 11,9±0,8 млрд/мл и инфузорий – 140,0±3,5 – 158,5±3,8 тыс/мл, а у бычков соответственно - 13,0±0,51 – 14,4±0,57 млрд/мл и 226,8±4,2 – 234,6±4,6 тыс/мл, что не имело статистически достоверных различий (Р>0,05) по сравнению с контрольными животными.

8. У бычков, получавших препарат «ВетСел», в 16-месячном возрасте длина кишечника была больше, чем у животных, не получавших препарат: длина двенадцатиперстной кишки на 0,2 м (Р>0,05), тощей и подвздошной – на 1,6 м (Р<0,001), слепой кишки – на 0,05 м (Р>0,05), ободочной и прямой кишки – на 0,6 м (Р<0,01).

9. Включение в рационы препарата «ВетСел» оказывает положительное влияние на рост и развитие молодняка крупного рогатого скота и способствует формированию животных крепкой конституции с хорошо развитым опорно-двигательным аппаратом. Абсолютный и относительный приросты массы тела, среднесуточные приросты, а также линейные промеры у бычков, получавших препарат «ВетСел», соответствовали нормативным показателям и превышали таковые у контрольных животных и животных, получавших препараты «Ветом 1.1» и «Сел-Плекс».

10. У бычков 16-месячного возраста, получавших препарат «ВетСел», содержание белкового азота в тканях органов было больше, чем у контрольных животных: в длиннейшей мышце спины на 0,27г% (Р>0,05), в тканях стенки тонкого отдела кишечника – на 0,30 г% (Р<0,02), в печени – на 0,23 г% (Р<0,001). При этом химико-энергетические показатели мяса бычков, которым скармливали препарат «ВетСел», превосходили показатели у контрольных животных, получавших препараты «Ветом 1.1» и «Сел-Плекс».

11. Использование способа коррекции обмена веществ и функционального состояния кишечника у молодняка крупного рогатого скота, разработанного на основе микрокапсулированного препарата «ВетСел», позволяет увеличить производство говядины и снизить себестоимость 1 ц мяса в среднем на 2,5%.

практические предложения

С целью коррекции обмена веществ и функциональной активности кишечника у молодняка крупного рогатого скота рекомендуется использование микрокапсулированного препарата «ВетСел»:

- телятам препарат скармливают в дозе 60 мг на 1 кг массы тела один раз в день через день в течение 10 дней;

- бычкам на откорме препарат скармливают в дозе 60 мг на 1 кг массы тела один раз в день через день в течение 10 дней, затем один раз каждые 10 дней до окончания откорма.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Челноков В.А. Нанокапсулированные пробиотики, практические аспекты применения в животноводстве и ветеринарной медицине / О.Б. Сеин, Д.В. Трубников, А.А. Кролевец, В.А. Челноков // Вестник Курской ГСХА.- 2013.-№3.-С.57-59.
2. Челноков В.А. Коррекция физиологического статуса у животных с использованием нанокапсулированных препаратов / О.Б. Сеин, А.А. Кролевец, В.А. Челноков, К.А. Толкачёв // Вестник Курской ГСХА.-2013.-№3.-С.64-66.
3. Челноков В.А. Применение препаратов «Ветом 1.1» и «Сел-Плекс» при выращивании молодняка крупного рогатого скота и свиней / В.А. Челноков, А.А. Долженков, В.Е. Чернов // Развитие аграрного сектора в условиях вступления России в ВТО: Сб. материалов междунар. науч.-практ. конференции.- Смоленск, 2012.-С.78-80.
4. Челноков В.А. Коррекция биохимического статуса у домашних животных с использованием пробиотиков / О.Б. Сеин, А.А. Долженков, В.Е. Чернов, Т.Ю. Юшкова, В.А. Челноков // Современные проблемы развития животноводства: Сб. науч. тр. междунар. науч.-практ. конференции.-Брянск, 2012.-С.94-96.
5. Челноков В.А. Содержание белкового азота в крови и органах у бычков и свиней при скармливании пробиотика «Ветом 1.1» и селенсодержащего препарата «Сел-Плекс» / О.Б. Сеин, В.А. Челноков, В.Е. Чернов, А.А. Долженков // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: Материалы междунар. науч.-практ. конференции.-Белгород, 2012.-С.94-95.
6. Челноков В.А. Белковый спектр крови у животных при скармливании пробиотических препаратов/ В.А. Челноков, К.А. Толкачев // Агропромышленный комплекс: контуры будущего: Материалы междунар. науч.-практ. конференции аспирантов и молодых учёных.-Курск, 2012.-С.278-279.
7. Челноков В.А. Рост и развитие молодняка крупного рогатого скота при скармливании нанокапсулированного пробиотика / О.Б. Сеин, А.А. Кролевец, В.А. Челноков, К.А. Толкачёв // Актуальные проблемы агропромышленного производства: Материалы междунар. науч.-практ. конференции.-Курск, 2013.-С.176-178.
8. Челноков В.А. Нанокапсулированные биологически активные препараты и их производственная апробация/А.А. Долженков, К.А. Толкачёв, В.А. Челноков, В.Е. Чернов // Интегративные тенденции в медицине и образовании: Материалы междунар. науч.-практ. конференции. - Москва, 2013.-С.29-30.

Формат 60х84 1/16. Бумага для множительных аппаратов.

Печать на копировальном аппарате КГСХА.

Усл. печ. л. 1,0. Уч.-изд.л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 198.