Морфология больших слюнных желез млекопитающих с разным типом питания
На правах рукописи
ЧЕКАРОВА
Ирина Александровна
МОРФОЛОГИЯ БОЛЬШИХ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ МЛЕКОПИТАЮЩИХ С РАЗНЫМ ТИПОМ ПИТАНИЯ
06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных,
патология, онкология и морфология животных
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Улан-Удэ – 2011
Работа выполнена на кафедре ветеринарной медицины Забайкальского аграрного института – филиала ФГОУ ВПО «Иркутская государственная сельскохозяйственная академия» и кафедре анатомии, гистологии и патоморфологии ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.Филиппова»
Научные консультанты: Заслуженный деятель науки Бурятской АССР,
заслуженный деятель науки РФ,
доктор ветеринарных наук, профессор
Заслуженный деятель науки Республики Бурятия,
заслуженный работник высшей школы РФ,
доктор биологических наук, профессор
Ромазан Закарьянович Сиразиев
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
Кухаренко Наталья Степановна
(ФГОУ ВПО Дальневосточный
государственный агроуниверситет)
доктор ветеринарных наук, профессор
Донкова Наталья Владимировна
(ФГОУ ВПО Красноярский
государственный агроуниверситет)
доктор биологических наук, профессор
Рядинская Нина Ильинична
(ФГОУ ВПО Алтайский
государственный агроуниверситет)
Ведущая организация: Казанская государственная академия
ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана
Защита диссертации состоится 20 октября 2011г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.006.01 при ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.Филиппова» (670024 Республика Бурятия. г.Улан-Удэ, ул.Пушкина.8,тел. (3012)442611)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р.Филиппова.
Автореферат разослан “____” _____________ 2011г.
Ученый секретарь
диссертационного совета, доцент Е.А.Томитова
Актуальность темы. Функция любого органа протекает во взаимодействии со средой обитания, т.е. совершается для каждого вида, популяции, организма в совершенно конкретных физико-химических условиях. Выявить закономерности адаптации животных к этим условиям позволяют основополагающие морфологические исследования.
На недостаточность, необходимость и перспективность проведения фундаментальных исследований в рамках Международной биологической программы, предусматривающей использование морфофизиологических параметров как индикаторов адаптационных возможностей организма животных, указывает в своих работах С. Шварц (1968, 1969, 1980).
Структура и функция пищеварительной системы животных тесно взаимосвязана с потребляемым кормом. Одним из индикаторов этой связи являются слюнные железы, особенности морфологии которых вскрывают процесс приспособления животных к условиям обитания и питания.
Отечественными школами ветеринарных морфологов накоплен большой фактический материал по морфологии (главным образом, анатомии, гистологии и гистохимии) больших слюнных желез домашних и многих видов диких взрослых млекопитающих (Каргаполова Л.И., 1960; Ильин П.А., 1968; Голенкова В.Н., 1986; Бабаева А.Г., Шубникова Е.А., 1979; Зеленевский Н.В., 1992; Момот Н.В., 1996; Жилякова Л.В., 2003; Ступин А.В., 2005, Зеленевский Д.Н., 2007), а также в различные периоды онтогенеза (Архиповец А.И., 1958; Ильина Л.И., 1970; Ильин П.А., Момот Н.В., 1983; Ильин П.А. и др., 1986; Asari M. et al., 1994, 2000; Гончаров А.Г., 2002; Момот Ю.А., 2003; Eisenburckner A. et al., 2003; Требухова Е.Е., 2005). Однако видовые особенности органо- и гистогенеза этих органов отражены скудно.
Особенности ультратонкой организации больших слюнных желез в литературе наиболее полно описаны у грызунов и зайцеобразных (Piza I.G., Fava Fde M., 1973; Cope G.H., 1977, 1978; Bondi A.M. et al., 1983; Suzuki, S. et al., 1985; Suzuki, S. et al., 1987; Suzuki, S. et al., 1989; Okugawa J., Fujii H., 1990; Bondi A.M. et al., 1992; Cerbon M.A. et al., 1996; Ogawa C. et al.,2002; Toyoshima K., Tandler B., 1986 и др.). Единичные работы посвящены изучению данного вопроса у сельскохозяйственных, домашних и диких животных (Bloom C.D., Carls R., 1974; Suzuki, S.et al., 1975; Suzuki, S. 1981a,b; Jacob S. et Poddar S., 1987a,b; Зеленевский Н.В., 1992; Gargiulo A.M. et al., 1992; Mansouri S.H., Atri A., 1994; Момот Н.В., 1996; Момот Ю.А., 2003). Большинство работ были выполнены зарубежными исследователями и являются труднодоступными.
Чрезвычайно мало внимания уделяется исследованию стромы слюнных желез. Как правило, все сводится к короткому описанию на оптическом уровне наличия и степени выраженности коллагеновых, эластических и аргирофильных волокон (Момот Н.В, 1996; Гончаров А.Г., 2002; Жилякова Л.В., 2003; Момот Ю.А., 2003; Ступин А.В., 2005; Требухова Е.Е., 2005 и др.). Единичные работы зарубежных исследователей посвящены изучению вопросов формирования и пространственной организации соединительной ткани больших слюнных желез в пренатальный период развития крыс, мышей и человека с помощью сканирующей электронной микроскопии (Watanabe L. et al., 1997a; Watanabe L. et al., 1997b; Mitsutake K. and Sato I., 2003). В доступной литературе отсутствуют данные о пространственной организации соединительнотканных компонентов больших слюнных желез взрослых млекопитающих. Между тем, архитектонику волокнистых компонентов, характер и направление механической нагрузки в тканях определяет не только их количество, но и взаимодействие с другими компонентами.
Цель исследований. С использованием световой, трансмиссионной и сканирующей электронной микроскопии изучить общие закономерности и видовые особенности строения больших слюнных желез у представителей травоядных, всеядных и плотоядных млекопитающих и на примере яка проследить анатомическое формирование и гистогенез названных желез в разные периоды онтогенеза.
Для реализации поставленной цели были определены следующие задачи:
- изучить видовые особенности микроморфологической организации структурно-функциональных единиц околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез у представителей травоядных (крупный рогатый скот, як, китайский водяной олень), всеядных (домашняя свинья) и плотоядных (домашняя собака, енотовидная собака, леопард);
- выявить видовые особенности ультратонкого строения околоушной и нижнечелюстной слюнных желез с использованием трансмиссионной электронной микроскопии у представителей млекопитающих с разным типом питания;
- изучить закономерности пространственной организации соединительной ткани больших слюнных желез с использованием сканирующей электронной микроскопии;
- на примере яка проследить анатомическое формирование, динамику роста и развития больших слюнных желез в пренатальном и постнатальном периодах онтогенеза;
- исследовать гистогенез околоушной, нижнечелюстной и подъязычной желез у яка в разные периоды онтогенеза.
- Научная новизна и ценность полученных результатов заключается в том, что с использованием комплекса методов классической анатомии и гистологии, трансмиссионной и сканирующей электронной микроскопии, цито-, кариометрии, биометрического, корреляционного и регрессионного анализа выявлен ряд новых морфофункциональных особенностей структурных единиц околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез у представителей травоядных (крупный рогатый скот, як, китайский водяной олень), всеядных (свинья домашняя) и плотоядных (собака домашняя, снежный леопард, енотовидная собака) млекопитающих.
Проведены детальные морфометрические и стереометрические исследования структурно-функциональных единиц околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез. Изучено ультратонкое строение концевых отделов, вставочных и исчерченных выводных протоков белковых и смешанных (на примере околоушной и нижнечелюстной) желез у представителей травоядных, всеядных и плотоядных млекопитающих. Обнаружены видовые и органотипические особенности ультраструктурной организации желез. Проведен анализ возможной взаимосвязи структуры и функции желез от условий обитания и питания.
Описана пространственная организация соединительнотканных компонентов. Выявлены закономерности взаимоотношения коллагеновых и эластических волокон с клеточными элементами соединительной ткани и структурно-функциональными единицами больших слюнных желез.
Изучены гистогенез, гистоструктура, особенности развития структурно-функциональных единиц, анатомические преобразования и динамика роста больших слюнных желез яка во внутриутробном периоде развития, а также установлены морфометрические данные изученных органов в различные периоды онтогенеза.
Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты анатомических, гистологических, электронно-микроскопических, микрометрических, стереометрических и биометрических исследований больших слюнных желез представителей травоядных, всеядных и плотоядных млекопитающих является вкладом в развитие теоретических основ возрастной и видовой морфологии млекопитающих, представляют несомненный научный интерес и необходимы:
- при выявлении причин нарушений строения и функции органов пищеварительной системы;
- для сравнительной, видовой, и возрастной морфологии, гистологии и патоморфологии пищеварительного аппарата животных;
- для проведения экспериментальных наблюдений с целью выяснения актуальных вопросов физиологии, патогенеза и терапии функциональных нарушений органов пищеварения;
- могут быть использованы при чтении лекций; написании соответствующих разделов справочной и учебной литературы по возрастной, видовой и сравнительной морфологии; в лабораториях НИИ, изучающих возрастные, видовые и сравнительные особенности функции пищеварительного аппарата млекопитающих; в НИИ по проблемам профилактики и лечения болезней органов пищеварения домашних и диких млекопитающих.
Материалы данной работы вошли в учебные и методические пособия: «Практикум по анатомии домашних животных» (Улан-Удэ, 1999), «Атлас по анатомии домашнего яка (Poephagus grunnies)» (Улан-Удэ, 2002), «Номадное животноводство: ветеринарное обслуживание, экономика и организация» (Улан-Удэ, 2003), «Частная анатомия домашних животных» (Абакан, 2006).
Внедрение результатов исследований. Полученные данные внедрены и используются в учебной и научной работе кафедр института ветеринарной медицины и зоотехнии ФГОУ ВПО «Дальневосточный ГАУ», кафедры морфологии и физиологии ФГОУ ВПО «Приморская ГСХА», «Хакасский ГУ им.Н.Ф.Катанова», «Мордовский ГУ», анатомии и гистологии ФГОУ ВПО «Алтайский ГАУ», «Уральская государственная академия ветеринарной медицины», «Уральская ГСХА», анатомии «КГАВМ им.Н.Э.Баумана», ветеринарно-санитарной экспертизы и заразных болезней ОГАУ, анатомии, гистологии и патоморфологии ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им.В.Р.Филиппова», кафедре ветеринарной медицины Забайкальского аграрного института – филиала ФГОУ ВПО «Иркутская ГСХА».
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на: научных, научно-практических конференциях (УланУдэ, 1994, 1995, 1996, 2005; Барнаул, 1996, 1998; Чита, 2006), межрегиональной научной конференции (Улан-Удэ, 2001), Всероссийской научной конференции (Саратов, 2001), международных научных и научно-практических конференциях (Барнаул, 1995; Улан-Удэ, 1998, 2003; пос. Краснообск, 2006; Барнаул, 2006, 2007; Улан-Удэ, 2007; Чита, 2007, 2008, 2011; Улаанбаатор, 2010г.), III конгрессе международной Ассоциации морфологов (Тверь,1996), международном семинаре Международного центра по изучению яка (Улан-Батор, Монголия, 2002), XVI Московском международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2008).
Публикации. Основные научные положения по теме диссертации отражены в 38 печатных работах, в том числе из списка ВАК – 9.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 360 страницах машинописного текста, состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, собственных исследований, анализа полученных результатов, выводов, практических предложений. Список использованной литературы включает 418 источников, в том числе 256 иностранных. Работа иллюстрирована 77 таблицами, 142 микрофотографиями, 8 рисунками.
Основные положения, выносимые на защиту:
- 1. Микроморфологические особенности структурно-функциональных единиц больших слюнных желез представителей травоядных, всеядных и плотоядных млекопитающих.
- 2. Особенности ультратонкой организации серозных и слизистых гландулоцитов концевых отделов, эпителиоцитов вставочных и исчерченных выводных протоков.
- 3. Особенности пространственной организации соединительнотканного остова больших слюнных желез.
- 4. Органо- и гистогенез больших слюнных желез яка.
2. МАТЕРИАЛ, УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Материалом для исследований служили околоушные, нижнечелюстные, подъязычные (короткопротоковая и длиннопротоковая части) слюнные железы от половозрелых представителей травоядных (крупный рогатый скот, як, китайский водяной олень), всеядных (домашняя свинья) и плотоядных (домашняя собака, енотовидная собака, леопард) млекопитающих (табл. 1), а также предплодов, плодов и новорожденных яков, разводимых в Окинском и Закаменском районах Бурятии, которые богаты альпийскими и субальпийскими пастбищами (табл.2). Материал был получен на мясокомбинатах провинции Чонбук Южной Кореи и в лаборатории ветеринарной патологии колледжа ветеринарной медицины Чонбукского национального университета, а также непосредственно в хозяйствах Окинского и Закаменского районов Республики Бурятия, на Култукском и Улан-Удэнском мясокомбинатах во время убоя в период с 1994 по 1997 год. Весь экспериментальный материал получен от клинически здоровых животных, содержащихся в обычных хозяйственных условиях.
Возраст плодов определяли по К.А.Васильеву (1966), а взрослых особей по гуртовым ведомостям и по степени стирания резцовых зубов (Денисов В.Ф., 1958; Паденко А.С., 1971).
Материал для морфологических исследований фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Гистоморфологию желез изучали на срезах, окрашенных гематоксилин-эозином, по ван Гизон, железным гематоксилином по Гейденгайну (Ромейс Б., 1953), анилиновым синим (Лилли Р., 1969).
Таблица 1 – Объекты исследований (виды животных)
| Вид животного | Возраст | Количество животных |
| Крупный рогатый скот | взрослые | 3 |
| Китайский водяной олень | взрослые | 3 |
| Свинья | 6мес. | 6 |
| Собака | взрослые | 6 |
| Енотовидная собака | взрослые | 3 |
| Леопард | взрослые | 3 |
| Всего | 24 |
Таблица 2 – Объекты исследований
| Возрастная группа | Возраст | Количество |
| Предплоды | 45суток | 3 |
| Плоды | 2-2,5месяца | 3 |
| 3-3,5 месяца | 3 | |
| 4-4,5 месяца | 3 | |
| 5-5,5 месяцев | 3 | |
| 6-6,5 месяцев | 3 | |
| 7-7,5 месяцев | 3 | |
| Новорожденные | 1-5суток | 5 |
| Переходный период | 14 сут. | 3 |
| Взрослые | 3-5 лет | 3 |
| Всего | 32 |
Для гистологических исследований также применяли полутонкие срезы, которые получали на ультрамикротоме "MTX, RMC" (США). Их окрашивали 0,5% раствором метиленового синего и 0,5% раствором фуксина.
Подсчет процентного соотношения компонентов паренхимы осуществляли ускоренным способом количественного сравнения морфологических признаков (Стефанов С.Б., Кухаренко Н.С., 1988). Морфометрические измерения диаметра, высоты эпителия концевых отделов, вставочных и исчерченных выводных протоков, а также площади эпителиоцитов и их ядер (для подсчета ядерно-протоплазматического отношения) проводили с помощью программы Analisis версия 3.2 (Германия). Фотографирование гистопрепаратов осуществляли с использованием системного обеспечения Soft Imaging System (Германия), камеры – Color View 2, на микроскопе Aniovert Carl Zeiss (Германия).
Применяли корреляционный и регрессионный анализы. Сопоставление эмпирического и теоретического распределений проводили путем построения гистограмм и вычислением показателей асимметрии и эксцесса (Плохинский Н.А., 1970), с использованием работ Р.З. Сиразиева с соавт. (2005).
Полученный числовой массив микрометрических и цито-кариометрических измерений подвергался статистической обработке с использованием ПК “IBM PC” по программе “Статмед”(2000).
Для трансмиссионной электронной микроскопии использовали способ двойной фиксации (предварительная фиксация - 2,5% раствором глютаральдегида, последующая постфиксация - в 1%-м растворе четырехокиси осмия). Обезвоживание объектов проводили в этиловом спирте возрастающей концентрации. Заливку производили в ЭПОН – 812. Ультратонкие (УТС) срезы получали на ультрамикротоме "MTX, RMC" (США). Срезы толщиной 90 нм монтажировали на медные сеточки (100 пор на сетку, SPI, USA). Контрастирование срезов осуществляли с помощью 2%-го раствора уранилацетата. Особенности ультраструктуры клеток вставочных и исчерченных протоков, а также концевых отделов больших слюнных желез, изучали с помощью электронного трансмиссионного микроскопа JEOL JEM-1010.
Пространственную организацию соединительной ткани больших слюнных желез млекопитающих изучали методом сканирующей электронной микроскопии. Напыление золотом осуществляли в аппарате IB-3 (Eiko Engineering, Япония) при силе тока 10 ампер в течение 300 секунд. Препараты исследовали в сканирующем электронном микроскопе JEOL JSM-5900 (Япония).
У яков всех возрастных групп изучали топографию больших слюнных желез, определяли их размеры, массу и относительную массу каждой железы к массе всех больших слюнных желез. Массу желез определяли с помощью торсионных весов WT с точностью до 0,001г и аналитических весов А-33 с точностью до 0,01г, а линейные промеры желез у плодов - с помощью окулярного микрометра на микроскопе МБС - 9, а в постнатальный период - с помощью линейки и штангенциркуля с точностью до 1 мм.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Микроморфология структурно-функциональных единиц больших слюнных желез млекопитающих с разным типом питания
Околоушные, нижнечелюстные и подъязычные слюнные железы сложные, разветвленные альвеолярные или трубчато-альвеолярные. У представителей травоядных, всеядных и плотоядных млекопитающих они имеют постоянную скелето- и синтопию. Каждая железа покрыта плотной соединительнотканной капсулой, состоящей из коллагеновых, эластических волокон, клеточных элементов фибробластического ряда и аморфного вещества. Проникая внутрь органа, соединительнотканные перегородки, отходящие от капсулы, делят железы на хорошо контурированные дольки. В междольковой соединительной ткани располагаются междольковые выводные протоки, артерии и вены различных диаметров, лимфатические сосуды и нервы. Паренхима больших слюнных желез представлена секреторными концевыми отделами и системой внутридольковых выводных протоков.
Околоушная слюнная железа у изученных видов животных является сложной альвеолярной. По характеру выделяемого секрета железа у крупного рогатого скота и яка серозная, у остальных видов животных – смешанная (серозно-мукозная).
Нижнечелюстная слюнная железа у всех представителей травоядных, всеядных и плотоядных сложная трубчато-альвеолярная со смешанным характером секрета. У крупного рогатого скота в железе присутствуют в большом количестве слизистые ацинусы и концевые отделы, окруженные серозными полулуниями. Серозные секреторные единицы немногочисленны. У яка в железе среди смешанных концевых отделов с широкими серозно-мукозными полулуниями присутствуют единичные чисто слизистые и серозные ацинусы. У китайского водяного оленя мукозные концевые отделы окружены узкими серозно-мукозными полулуниями. Небольшое количество серозных ацинусов располагается в непосредственной близости к исчерченным выводным протокам. В эпителии исчерченных протоков имеются единичные бокаловидные клетки, количество которых значительно возрастает в эпителии междольковых протоков. У свиньи среди смешанных секреторных единиц с узкими серозными полулуниями имеются единичные серозные концевые отделы. У собаки абсолютное большинство ацинусов слизистые и лишь единичные из них окружены широкими серозными полулуниями, которые выстланы серозно-мукозными гландулоцитами. Присутствуют в паренхиме и единичные серозные концевые отделы. У енотовидной собаки слизистые концевые отделы окружены интенсивно базофильно-эозинофильными узкими серозно-мукозными полулуниями. Многочисленные концевые отделы, образованные серозно-мукозными гландулоцитами, присутствуют в непосредственной близости к исчерченным выводным протокам. У леопарда среди слизистых концевых отделов, окруженных широкими серозно-мукозными полулуниями, в значительном количестве располагаются секреторные единицы, образованные серозно-мукозными гландулоцитами.
Подъязычная слюнная железа у всех представителей травоядных, всеядных и плотоядных сложная трубчато-альвеолярная со смешанным характером секрета. У крупного рогатого скота в однопротоковой части железы абсолютное большинство ацинусов выстланы как слизистыми, так и серозными гландулоцитами без серозных полулуний. Единичные серозные секреторные единицы располагаются около исчерченных выводных протоков. Редко отмечаются слизистые концевые отделы с узкими серозными полулуниями. В многопротоковой части железы абсолютное большинство секреторных единиц – слизистые. Крайне редко отмечаются единичные серозные и смешанные (с узкими серозными полулуниями) концевые отделы. У яка в однопротоковой части железы основная масса концевых отделов слизистая, имеются слизистые ацинусы, окруженные узкими серозными полулуниями и единичные серозные секреторные единицы. Многопротоковая часть железы образована только слизистыми концевыми отделами. У китайского водяного оленя многочисленные слизистые ацинусы с широкими просветами. Единичные концевые отделы окружены узкими серозными полулуниями. Серозные секреторные единицы образуют целые дольки. У свиньи в однопротоковой части железы основная масса концевых отделов выстлана серозными гландулоцитами с небольшим количеством слизистых эпителиоцитов. В многопротоковой части большая часть слизистых ацинусов имеет узкие серозные полулуния. Белковые концевые отделы встречаются реже, чем слизистые. Абсолютное большинство секреторных единиц у собаки и енотовидной собаки образовано серозно-мукозными гландулоцитами. Небольшое количество ацинусов имеет немногочисленные мукоциты. У леопарда значительная часть концевых отделов выстлана серозно-мукозными гландулоцитами и немногочисленными мукоцитами. Имеются ацинусы с серозными полулуниями и единицы, образованные только серозно-мукозными клетками.
Внутридольковая протоковая система больших слюнных желез представлена вставочными и исчерченными протоками.
Вставочные протоки оказывают как позитивное, так и негативное влияние на содержание органических веществ в первичной слюне. Большинство исследователей отмечают, что вставочные протоки выстланы однослойным однорядным кубическим эпителием с высоким ядерно-цитоплазменным отношением (Зеленевский Н.В., 1992; Момот Н.В., 1996; Жилякова Л.В., 2003; Зеленевский Д.Н., 2007). Наши данные свидетельствуют о том, что эпителий вставочных протоков варьирует от низкого кубического (уплощенного) во вставочных протоках околоушной железы жвачных и подъязычной железы жвачных и леопарда, до столбчатого эпителия в нижнечелюстной слюнной железе у всех изученных млекопитающих. В эпителии вставочных протоков у представителей плотоядных (собака) присутствуют слизистые клетки, что согласуется с данными А.В.Ступина (2005), указывавшего на наличие мукоцитов в эпителии протоков околоушной железы серебристо-черной лисицы и норки.
Исчерченные протоки играют существенную роль в формировании секрета. Они выстланы простым однослойным однорядным столбчатым эпителием, цитоплазма которого имеет характерную эозинофильную исчерченность базального полюса. Видимая эозинофильная исчерченность хорошо выражена в нижнечелюстной железе и слабо – в околоушной. Среди типичных эпителиоцитов, характеризующихся наличием эозинофильной исчерченности в базальном полюсе цитоплазмы, присутствуют единичные «темные» клетки и эндокриноциты.
«Темные клетки» - узкие эпителиоциты с интенсивно эозинофильной цитоплазмой и узким вертикально-вытянутым интенсивно базофильным ядром. Данный тип клеток также был отмечен у других видов животных (Garret J.R., 1965; Phillips C.J. et al., 1977; Tandler B., 1993; Maruyama S. et al.,1993; Sato A., Migoshi S., 1998). Считаем, что они представляют обычный клеточный тип в определенной стадии функциональной активности.
Эндокриноциты - это крупные клетки со слабо эозинофильной цитоплазмой, большим округлым центрально расположенным слабо базофильным ядром. На присутствие эндокриноцитов в эпителии слюнных желез домашних и диких млекопитающих также указывали ряд исследователей (Липовских А.А., 1984, Момот Н.В., 1996; Момот Ю.А., 2003 и др.).
Мнение о наличии исчерченных протоков в подъязычной слюнной железе у некоторых видов животных весьма противоречивы (Ильин П.А., 1968; Техвер Ю.Т., 1974; Голенкова В.Н., 1986; Tandler B., Poulson S.H., 1977; Жилякова Л.В., 2003; Ступин А.В., 2005; Требухова Е.Е., 2005). Мы отмечаем, что среди внутридольковых протоков подъязычной слюнной железы типичные исчерченные протоки, эпителий которых имеет характерную эозинофильную исчерченность базального полюса цитоплазмы, в подъязычной слюнной железе собаки домашней, енотовидной собаки, леопарда, а также в короткопротоковой части подъязычной железы яка, крупного рогатого скота и китайского водяного оленя отсутствуют.
В железах у названных видов животных хорошо развита внутрижелезистая сосудистая сеть. Сосуды постоянно кровенаполнены, что свидетельствует о том, слюнные железы находятся в состоянии рабочей гиперемии, лежащей в основе их фильтрационной функции. Особенно высоко васкуляризированны ацинусы околоушной слюнной железы жвачных, которая, в отличие от других видов животных, секретирует непрерывно.
Мы отмечаем присутствие большого количества лимфоцитов в междольковой и внутридольковой соединительной ткани (особенно у представителей плотоядных и всеядных). В эпителии внутридольковых протоков обнаружены интраэпителиальные лимфоциты.
Анализ результатов морфо-, цито- и кариометрических исследований структурно-функциональных единиц околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез представителей травоядных, всеядных и плотоядных свидетельствует о том, что концевые отделы желез хотя и однотипны, но диаметры и высота эпителия ацинусов, площади гландулоцитов, их ядер во вставочных и исчерченных протоках имеют ряд видовых специфических особенностей, обусловленных различиями в питании и средой обитания. Мы отмечаем, что у представителей дикой фауны (китайский водяной олень и енотовидная собака) морфометрические данные железистых структур достоверно уступают соответствующим показателям крупного рогатого скота, домашней свиньи, собаки. Это согласуется с данными Н.В. Зеленевского (1992), отмечавшего аналогичную закономерность у диких животных (зубр, благородный олень, европейская косуля, кабан) и противоречит данным Н.В.Момот (1996), указывающей на то, что слюнные железы диких животных обладают большей функциональной активностью, и соответственно характеризуются более крупными секреторными отделами и плотным расположением ядер.
Корреляционный анализ морфометрических показателей околоушной железы свидетельствует о наличии средней силы положительной связи между диаметром и высотой эпителия концевых отделов у всех представителей травоядных (крупный рогатый скот - r=+0,66, як - r=+0,75, китайский водяной олень - r=+0,61). Тесная положительная связь между этими показателями выявлена у представителей плотоядных (собака - r=+0,86, енотовидная собака - r=+0,92, снежный леопард - r=+0,88) и всеядных (домашняя свинья - r=+ 0,88).
В нижнечелюстной слюнной железе тесная положительная корреляция обнаруживается между диаметром и высотой эпителия концевых отделов у енотовидной собаки (r=+0,97) и снежного леопарда (r=+0,81). Существенная взаимосвязь этих показателей выявлена у яка и китайского водяного оленя, о чем свидетельствуют коэффициенты корреляции (r=+0,76 и r=+0,77). У крупного рогатого скота между диаметром и высотой эпителия концевых отделов выявлена слабая положительная связь (r=+0,48).
В подъязычной слюнной железе диаметр и высота эпителия концевых отделов находится в тесной взаимосвязи у яка (r=+0,83), енотовидной собаки (r=+0,78), леопарда (r=+0,88) и средней силы взаимозависимости у собаки (r=+0,69) и свиньи (r=+0,66). Слабая корреляция этих показателей выявлена у китайского водяного оленя (r=+0,35).
Рис.1 - Процентное соотношение внутридольковых протоков больших слюнных желез млекопитающих
Рис.2 - Процентное соотношение вставочных и исчерченных протоков в околоушной и нижнечелюстной слюнных железах млекопитающих
Исследования, проведенные с помощью ускоренного способа количественного сравнения, показали, что протоковая система наиболее развита в нижнечелюстной слюнной железе у всех изученных животных (рис.1). Менее развита протоковая система в околоушной железе (от 7 до 12%) и слабо – в подъязычной (от 1,8 до 5,4%). Вероятно, неравномерное развитие протоковой системы в слюнных железах является генетически детерминированным признаком.
Выраженность вставочных протоков варьирует среди разных видов животных во всех больших слюнных железах (рис.2). У китайского водяного оленя, например, существует значительная разница в удельной доле вставочных протоков в околоушной (8,0±1,56%) и нижнечелюстной (3,2±0,62%) железе. У енотовидной собаки разница небольшая (4,4±1,04 и 3,5±0,66 %, соответственно). В тоже время у яка доля протоков в околоушной и нижнечелюстной железах практически не различается (8,1±1,16 и 8,1±1,23%).
Морфометрическими исследованиями нами установлено, что для вставочных и исчерченных протоков у изученных видов характерен высокий коэффициент вариации их диаметров, особенно исчерченных протоков околоушной железы у представителей травоядных, что согласуется с данными Н.В.Момот (1996). По нашему мнению, это объясняется наличием хорошо развитой системой чередующихся вздутий и сужений, существующих в протоковой системе больших слюнных желез (Костиленко Ю.П. с соавт., 1986; Макарова Т.М., 2002; Гончаров А.Г.,2002б; Nawar S.M., El-Khaligi G.E.,1975). Эта система вместе с предклапанными депо, для которых характерен проксимально убывающий градиент емкости, и клапанами, содержащими гладкие миоциты, сокращение которых приводит к расширению протока, способствуют периодическому накоплению, хранению, выбросу и иллюминации секрета.
3.2. Видовые особенности электронно-микроскопического строения околоушной и нижнечелюстной слюнных желез
Околоушная слюнная железа яка, крупного рогатого скота, китайского водяного оленя, свиньи, собаки и леопарда, наряду с общими закономерностями строения секреторных клеток, имеет существенные видовые различия.
У всех названных видов животных железистые клетки, контактируя между собой, окаймляют центральный проток ацинуса, просвет которого сообщается с секреторными капиллярами, проходящими между боковыми поверхностями граничащих клеток.
У жвачных секреторные канальцы расширенные и ветвистые, у собаки, леопарда и свиньи канальцы расширены только в базо-латеральной области. В апикальной части плазмолеммы граничащих клеток сближены и образуют замыкающие контакты. В просвет ацинуса и секреторных канальцев обращены ворсинки апикального и латерального участков поверхности эпителиальных клеток концевых отделов. У собаки на апикальной поверхности клеток они короткие и редкие. У леопарда в этой области ворсинки не обнаружены. У свиньи микроворсинки отмечены на базо-латеральной поверхности гландулоцитов. У яка, крупного рогатого скота и китайского водяного оленя ворсинки апикальной, латеральной и базо-латеральной поверхностей клеток многочисленные и длинные. С помощью длинных и многочисленных ворсинок у жвачных осуществляется тесный контакт большой области внутриклеточного пространства и секреторных канальцев, что обеспечивает быстрое проникновение воды сквозь секреторные клетки ацинусов. Наши результаты согласуются с даными ряда авторов (van Lennep E.W. et al., 1977; Kim J.S. et al., 1994; Mansouri S.H., Atri A., 1994). Мы предполагаем, что возможная функция ворсинок заключается в продвижении серозного секрета из просвета концевого отдела во вставочный проток. Многочисленные микроворсинки и глубокие впячивания базальной плазматической мембраны, свидетельствуют о выработке концевыми отделами железы жвачных большого количества ионов. Последние обеспечивают довольно высокую щелочность (рН 8,1) и буферные свойства слюны жвачных, в рационе которых преобладает целлюлоза, что имеет большое значение для нейтрализации кислот, образующихся вследствие деятельности целлюлозолитических бактерий (сбраживание клетчатки и других углеводов).
Ядра гландулоцитов у яка и крупного рогатого скота полигональной формы, образуют много лопастей и располагаются в базальной части клеток. Многолопостная форма ядра увеличивает площадь ее поверхности для ядерно-цитоплазматических взаимодействий и, тем самым, оказывает влияние на скорость метаболических реакций (Свенсон К., Уэбстер П., 1980). У свиньи, собаки, леопарда, и китайского водяного оленя ядро овальной или несколько уплощенной формы и, в зависимости от секреторного цикла, может располагаться в центральной или базальной части клетки.
Железистые клетки околоушной железы яка, крупного рогатого скота содержат многочисленные митохондрии, разветвленные внутриклеточные канальцы и элементы агранулярной эндоплазматической сети. Пластинчатый аппарат развит слабо, а гранулярная эндоплазматическая сеть практически не выявляется. Это согласуется с характеристикой концевых отделов околоушной железы у овец (van Lennep E.W., 1977), коз (Kim J.S. et al., 1994), верблюда (Mansouri S.H., Arti A., 1994). Между тем, як, в отличие от крупного рогатого скота, получает корма с большим количеством клетчатки. Особенностью секреторных клеток околоушной железы у данного вида является наличие глубоких впячиваний базальной плазматической мембраны и мелких единичных секреторных гранул, а также многочисленных митохондрий. В рационе крупного рогатого скота содержится больше переваримого белка (Васильев К.А., 1991). Секреторные клетки околоушной железы этого вида содержат меньше митохондрий и больше секреторных гранул.
Одной из важных характеристик потребляемого корма китайским водяным оленем является высокое содержание лигнинов и таннинов (Tiexier H. et al., 1997), которые известны своей способностью, ингибировать процессы пищеварения, вызывая системную интоксикацию. Клетки ацинусов околоушной железы данного вида характеризуются хорошо развитыми гранулярной эндоплазматической сетью и пластинчатым аппаратом. Они вырабатывают большое количество секреторных гранул, которые, вероятно содержат белки, принимающие участие в нейтрализации танинов и лигнинов. Это является приспособительной реакцией организма, сформированной в процессе эволюционной адаптации. Характерной особенностью некоторых клеток ацинусов в околоушной железе китайского водяного оленя является сжатие ядра большими вакуолями, располагающимися в апикальной части клеток. Подобное явление было отмечено M.Stolte и Ito S. (1996) у косули, антилопы, тара, оленя-лира, благородного оленя, милу, европейского муфлона, африканского буйвола, черной лошадиной антилопы.
Железистые клетки околоушных желез плотоядных животных характеризуются сильным развитием гранулярного эндоплазматического ретикулума и пластинчатого аппарата. Им свойственна полярность, которая проявляется в базальном расположении основной массы цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума и надъядерной локализацией пластинчатого комплекса. Ядра располагаются в средней или базальной части клетки, а секреторные гранулы занимают надъядерную зону.
Гландулоциты околоушной железы свиньи характеризуются базальным расположением уплощенных ядер, сильным развитием пластинчатого аппарата, базально смещенной и слабо развитой гранулярной эндоплазматической сетью, обильным накоплением секрета, заполняющим почти всю клетку. Секреторные гранулы часто сливаются между собой.
Секреторные гранулы в околоушных железах изученных видов млекопитающих характеризуются видовой специфичностью. У яка они округло-овальной формы, мелкие, средней электронной плотности. У крупного рогатого скота секреторные гранулы гомогенные, округлой или овальной формы. Они заключены в электронно-плотную капсулу, различаются по размерам и электронной плотности. Крупные гранулы средней электронной плотности, мелкие характеризуются более высокой электронной плотностью. У китайского водяного оленя секреторный материал представлен округлыми гранулами двух типов – крупными с умеренной электронной плотностью и более мелкими – относительно высокой электронной плотности. Последние иногда содержат располагающиеся по периферии электронно-плотные включения. Мы считаем, что различная плотность секреторных гранул железы зависит от степени их зрелости. Оба типа гранул окружены узким электронно-прозрачным ободком. У свиньи большая часть гранул гомогенна и обладает низкой электронной плотностью. Обычно гранулы окружены мембраной.
Основу гранул другого типа составляет неплотный матрикс, в который вкраплен плотный материал. Секреторный материал в клетках ацинусов околоушной железы собаки представлен в виде округлых электронно-плотных гранул, которые окружены узким электронно-прозрачным ободком. Внутри большей части секреторных гранул содержатся сферические тельца высокой электронной плотности. Каждое тельце располагается чаще эксцентрично или в середине. У леопарда секреторные гранулы заполняют практически всю цитоплазму, в большинстве своем округлой формы, различной электронной плотности и размеров, заключены в электронно-плотную капсулу и окружены электронно-прозрачным ореолом. Среди них встречаются единичные гранулы палочковидной и полулунной формы. Некоторые гранулы содержат мелкие электронно-плотные тельца - включения, окруженные очень тонким ореолом слабой электронной плотности. Тельца располагаются чаще эксцентрично.
В серомукозных клетках нижнечелюстной слюнной железы изученных нами животных секреторные гранулы полиморфны: центральная часть их содержит участки более высокой электронной плотности.
В отличие от ацинарных клеток околоушных желез, зрелые гранулы которых обладают весьма высокой электронной плотностью, в мукоцитах нижнечелюстной железы зрелые секреторные гранулы, расположенные в апикальной части цитоплазмы, также имеют низкую электронную плотность.
Вставочные протоки у некоторых изученных нами видов животных характеризуются наличием микроворсинок на апикальной поверхности эпителиоцитов. Единичные и короткие микроворсинки покрывают апикальную поверхность эпителиальных клеток вставочных протоков околоушной железы собаки и леопарда. Длинные микроворсинки отмечены на апикальной и латеральной поверхности клеток вставочных протоков околоушной железы китайского водяного оленя. В тоже время, у крупного рогатого скота апикальная плазмолемма клеток вставочных протоков одноименной железы микроворсинок не образует. Местами отмечены небольшие округлой формы выпячивания апикальной плазмолеммы в просвет протока. У яка среди эпителиоцитов вставочных протоков присутствуют клетки, апикальная плазмолемма которых образует листообразные выпячивания в просвет протока.
Степень выраженности латеральных складок эпителиоцитов вставочных протоков неодинакова не только у разных видов, но и варьирует у различных клеток одного вставочного протока. В клетках вставочных протоков околоушной и нижнечелюстной слюнных желез у яка, крупного рогатого скота, свиньи, собаки и леопарда впячивания в базальной зоне плазматических мембран не выражены. Апикальные поверхности соседних клеток образуют тесные контакты – десмосомы.
Цитозоль эпителиоцитов вставочных протоков околоушной железы крупного рогатого скота, яка, свиньи, собаки, леопарда, а также нижнечелюстной слюнной железы жвачных, содержит цитофиламенты. Это согласуется с данными W.H. Wilborn, J.M. Shackleford (1969), C.D. Bloom, R. Carlc (1974), E.W. van Lennep et all. (1977), J.L. Boshell, W.H. Wilborn (1978).
Эпителиальные выстилки вставочных протоков у разных видов животных существенно различаются по наличию или отсутствию, а также качественному показателю секреторных гранул.
Секреторные гранулы обнаружены нами в эпителиоцитах вставочных протоков околоушной железы свиньи, собаки, а также леопарда и китайского водяного оленя, что согласуется с данными ряда исследователей (Boshell J.L., Wilborn W.H., 1978; Suzuki S. et al., 1975, 1980; Yamada K., 1977). Не выявлены секреторные гранулы в эпителиоцитах протоков околоушной железы крупного рогатого скота, что не противоречит данным J.M. Shackleford, W.H. Wilborn (1969), S. Suzuki et al., (1981e), E.W. van Lennep et al., (1977), E. Raubenheimer (1987).
В цитоплазме эпителиоцитов вставочных протоков присутствуют мелкие вакуоли.
Вставочные отделы переходят в исчерченные протоки. Базальная исчерченность эпителиоцитов исчерченных протоков, видимая в световой микроскоп, обусловлена многочисленными выростами базальной плазмолеммы, между которыми находятся ряды вертикально расположенных митохондрий, что согласуется с данными A. Tamarin, L.M. Sreebny (1965), В. Tandler (1963, 1993б).
Видовые различия организации базальной части эпителиоцитов исчерченных протоков, сводятся к количеству и глубине складок базальной плазмолеммы, форме и размерам базальных митохондрий. Степень базальной складчатости выражена неодинаково в исчерченных протоках околоушной и нижнечелюстной слюнной железы. Слабо развита складчатость базальной плазмолеммы эпителиоцитов исчерченных протоков околоушной слюнной железы у жвачных, что согласуется с данными S.H. Mansouri, A. Atri (1994).
Поверхность эпителиоцитов, обращенная в просвет протока, варьирует у разных видов млекопитающих. У китайского водяного оленя в околоушной железе она несет нечастые невысокие микроворсинки, на наличие которых у других видов указывает B.Tandler et al. (2001). У яка, апикальный полюс и цитоплазма эпителиоцитов исчерченных протоков этой железы на границах со смежными клетками образуют выросты, напоминающие листочки книжки многокамерного желудка (рис.3А). Сканирующая микроскопия, в свою очередь, показала, что данные складки-выпячивания возвышаются над апикальной поверхностью, граничащих друг с другом эпителиоцитов, образуя полость шестигранной формы, что придает внутренней поверхности протока вид, напоминающий соты (рис.3Б). По нашему мнению, данные рельефные образования в околоушной слюнной железе яка способствуют удержанию слюны на апикальной поверхности клеток исчерченных протоков. Тем самым они увеличивают функциональную поверхность эпителиоцитов, продлевают время контакта секрета с клетками протоков и облегчают уравновешивание солевого состава слюны и плазмы крови. Чем медленнее скорость движения слюны по вставочным и исчерченным протокам, тем больше времени остается для контакта секрета с эпителиальными покровами, что оказывает влияние на качественный состав слюны.
В апикальной части цитоплазмы клеток исчерченных протоков нами обнаружены секреторные гранулы в околоушной железе собаки, леопарда, рогатого скота и свиньи, что подтверждает данные S. Suzuki et al. (1975), T. Nagato, B. Tandler (1986a) и других. Наличие серозно-подобных гранул в апикальной зоне цитоплазмы эпителиоцитов исчерченных протоков у многих видов млекопитающих свидетельствует о том, что они вовлечены в секрецию органических продуктов.
Рис.3 А - Цитоплазматические выросты апикальной поверхности эпителиоцитов исчерченных протоков околоушной слюнной железы яка. ТЭМ, ув. 4000; Б – як. Исчерченный проток околоушной слюнной железы. SEM, ув.2000.
Помимо гранул, апикальная часть цитоплазмы клеток исчерченных протоков изучаемых нами видов млекопитающих содержит многочисленные мелкие везикулы, которые также встречаются и у других млекопитающих (Hand A.R. 1979, 1987; Sato A., Miyoshi S., 1998; Yamamoto-Hino M. et al., 1998). Функциональное значение везикул в литературе дискутируется.
В эпителии исчерченных протоков выявлено наличие пяти типов клеток. Первый тип клеток характеризуется широкой базальной частью и суженной апикальной, электронно-плотной цитоплазмой, центрально расположенными ядрами полигональной формы (что увеличивает их активную поверхность). Базальная плазмолемма их сильноскладчатая. Многочисленные митохондрии, расположенные между складками цитолеммы, характеризуются большим количеством параллельных крист. В перинуклеарной зоне сосредоточенно умеренное количество митохондрий.
Второй тип клеток характеризуется узкой базальной и расширенной апикальной частью, которая, зачастую, не достигает просвета протока. Базальная плазмолемма складок не образует. Ядра клеток округлые или округло-овальные, крупные. Цитоплазма клеток электронно-прозрачная, содержит умеренное количество округлых, иногда сильно набухших, митохондрий, часть из которых превращается в электронно-прозрачные вакуоли. Особенно крупные вакуоли наблюдаются в базальной части клеток.
Клетки первого и второго типов составляют основную массу эпителиальной выстилки стенки исчерченных протоков.
Третий тип – особые “светлые” клетки – грушевидной формы, узкая часть которых лежит на базальной мембране. В электронно-прозрачной цитоплазме располагаются органеллы и электронно-плотные округлые гранулы. Гранулы содержатся как в апикальной, так и в базальной части клеток. Как правило, эти клетки располагаются возле “темных”. Мембраны, выстилающие боковые поверхности смежных “светлых” и “темных” клеток, вместе с цитоплазмой образуют неглубокие складки, соответствующие по форме углублениям соседней клетки.
Четвертый тип клеток представлен так называемыми “темными” клетками – узкими, с электронно-плотной цитоплазмой, в которой содержатся органеллы. Ядра клеток узкие, вертикально-вытянутые. Апикальные полюса клеток снабжены мелкими единичными микроворсинками.
Пятый тип – базальные клетки – с электронно-прозрачной цитоплазмой, малым количеством элементов гранулярной эндоплазматической сети и многочисленными полисомами. Митохондрий в клетках мало, и они мелкие. Единичные митохондрии присутствуют в дистальной части эпителиального покрова исчерченных протоков. Наши результаты подтверждают полученные ранее данные об ультаструктуре базальных клеток у крыс, мышей, крупного рогатого скота, овец, свиньи, зубра, европейского благородного оленя, европейской косули, горного козла Урала, кабана, хоря золотистого (Бабаева А.Г., Шубникова Е.А., 1979; Зеленевский Н.В., 1992; Зеленевский Н.В. с соавт., 1994).
В экскреторных протоках базальные клетки располагаются в виде сплошной узкой линии.
Миоэпителиальные клетки окружают концевые отделы, вставочные и исчерченные выводные протоки больших слюнных желез млекопитающих.
В отношении расположения миоэпителиальных клеток мнение исследователей противоречиво. Большинство авторов считают, что миоэпителиоциты располагаются между секреторными клетками и базальной мембраной (Погодина Л.С. с соавт., 1974; Фоменкова Т.Е., 1975; Бабаева А.Г., Шубникова Е.А., 1979; Franke et al., 1980; Konig B.Jr., Masuko T.S., 1998). По данным Н.В. Зеленевского (1992), миоэпителиальные клетки располагаются кнаружи от базальной мембраны, а Д.Н.Зеленевский (2007) утверждает, что они находятся между листками базальной мембраны.
По нашим данным, миоэпителиальные клетки располагаются между секреторными клетками и базальной мембраной.
Миоэпителиоциты обнаружены нами вокруг серозных и слизистых концевых отделов, во вставочных, и в проксимальной части исчерченных протоков. Количество миоэпителиальных клеток вокруг концевых отделов зависит от вязкости слюны. В околоушной слюнной железе они располагаются в местах перехода концевых отделов во вставочные протоки, а в нижнечелюстной – они более многочисленны вокруг слизистых и смешанных ацинусов, чем серозных.
Среди миоэпителиоцитов присутствуют светлые и темные клетки. Светлые клетки малочисленны и характеризуются большим размером, электронно-прозрачной цитоплазмой, короткими и толстыми отростками, малым количеством неравномерно распределенных миофиламентов. Большинство миоэпителиоцитов представлено темными клетками с электронно-плотной цитоплазмой, содержащей многочисленные миофиламенты. Наши результаты не расходятся с данными Е.А. Шубниковой (1980), Y. Nagahsima и K. Ono (1985) о наличии темных и светлых миоэпителиальных клеток в больших слюнных железах млекопитающих. В отношении природы и функционального значения тех и других видов клеток мы склонны придерживаться мнения А.Л. Зашихина и др. (2004) о высоком уровне дифференциации, как темных, так и светлых миоэпителиоцитов и считаем их зрелыми клетками, находящимися в различной фазе функциональной активности.
3.3. Закономерности пространственной организации волоконных структур соединительной ткани больших слюнных желез млекопитающих по материалам сканирующей электронной микроскопии
В составе единого соединительнотканного остова больших слюнных желез у всех изученных видов млекопитающих присутствуют элементы оболочечного (капсула, оболочки долей, долек, стенки ацинусов), межоболочечного (междолевая, междольковая, межацинозная соединительная ткань), переходного (паравазальная, парадуктульная, параневральная соединительная ткань) типов, что согласуются с данными О.В.Куваевой (2002). Строение элементов определяется выполняемой ими функцией в составе соединительнотканного остова, а варианты изменчивости – характером взаимоотношений друг с другом и смежными образованиями.
Концевые отделы и протоковая система больших слюнных желез, окруженные миоэпителиальными клетками, окутаны тонкой фибриллярной или фибриллярно-волоконной сетью. Количество фибрилл, их организация, варьируют у изученных видов животных и не одинаковы в различных железах. Между тем, прослеживается определенная закономерность в организации соединительнотканных фибрилл вокруг концевых отделов:
- В железах, где гландулоциты ацинусов вырабатывают жидкий серозный секрет, миоэпителиальные клетки, окружающие концевые отделы, сосредоточены, главным образом, в местах перехода ацинусов во вставочные протоки. Фибриллы, налегая друг на друга в нескольких взаимно перпендикулярных направлениях, образуют узелковое переплетение (рис.4А);
- Вокруг концевых отделов, гландулоциты которых вырабатывают более густой мукозный секрет, миоэпителиальные клетки расположены вокруг концевых отделов. Фибриллы, плотно прилегая друг к другу, образуют тонкие, но широкие волокна с волнистым ходом (рис.4Б).
Соединительная ткань вокруг концевых отделов обеспечивает устойчивую силу противодействия сжимающему и растягивающему действию миоэпителиальных клеток во время продвижения секрета, а также упругость при механических движениях, вызванных жеванием или сосанием. Наличие тонкой филаментной сети вокруг ацинусов и протоков больших слюнных подтверждает существование обратной эпителиально- мезенхимальной связи, которая проявляется в способности эпителиальных тканей продуцировать коллаген и влиять на состояние самих фибробластов (Hosoyamada Y., Sakai T., 2003; Разумов В.В., 2006).
Концевые отделы и протоки, покрытые фибриллярной сетью, объединяются пластом компактно расположенных уплощенных и цилиндрических коллагеновых и эластических спирально-волнистых волокон. Основную массу волокнистого остова, окружающего группы ацинусов и протоковую систему составляют уплощенные слегка волнистые
Рис.4 А – фибриллы на поверхности ацинуса околоушной железы свиньи. SEM, ув. 10 000; Б - фибриллы на поверхности ацинуса нижнечелюстной железы свиньи. SEM, ув. 10 000.
Рис.5 А - межацинозная соединительная ткань околоушной железы собаки. SEM, ув. 10 000; Б – парадуктальная соединительная ткань околоушной железы яка: а – основные волокна; б – связочные волокна. SEM, ув. 3 000.
коллагеновые волокна, располагающиеся компактно в одной плоскости, параллельно друг к другу вдоль длинной оси либо в разных направлениях или в беспорядке. Волокнистость неодинаково выражена как по длине волокна, так и в разных волокнах. Это позволяет им выдерживать большое растяжение при нагрузке по направлению хода волокна.
Между тонкой фибриллярной сетью и волоконным пластом существует пространство, в котором иногда наблюдается наличие кровеносных капилляров. Оно может служить упругой «подушкой» против давления, создаваемого накоплением секреторных гранул и сжатием миоэпителиальных клеток во время секреции. По мнению ряда авторов (Schmalbruch, H. 1974; Ohtani О. et al., 1988; Watanable L. et al., 1997), оно необходимо также и для сократительной активности клеток.
Элементы межоболочечного (междолевая, междольковая, межацинозная соединительная ткань) типа представляют переходный остов, имеющий неориентированный тип строения, относительно большие межволоконные пространства и выраженную спиральность волокон цилиндрической формы (рис.5А). Переходный остов выполняет редукторную функцию между соседними структурными единицами с различной механической подвижностью.
В конструкции соединительнотканного остова больших слюнных желез млекопитающих мы выделяем две системы коллагеновых волокон, различных по своему функциональному значению. Первая включает в себя основную массу параллельных коллагеновых волокон, идущих в направлении основных механических напряжений, связанных с накоплением и продвижением секрета (рис. 5Б,а). Вторая система представлена тонкими связочными волокнами, расположенными поперечно по отношению к основным, и выполняет вспомогательную интегрирующую функцию, обеспечивая взаимосвязь основных коллагеновых волокон и других структурных элементов желез, и поддерживает их функциональную архитектонику (Рис. 5Б,б). Система связочных волокон описана и в других органах (Омельяненко Н.П. и др., 1977; Омельяненко Н.П., 1983, Омельяненко Н.П., Жеребцов Л.Д., 1983).
По нашим данным, в строме всех слюнных желез изученных видов животных присутствуют тканевые базофилы. Это согласуется с данными Н.В.Зеленевского (1992), А.Б.Денисова (2003), Д.Н.Зеленевского (2007). Мы не отмечали наличие тканевых базофилов в соединительнотканной капсуле. В большем количестве они наблюдаются в строме желез, где вырабатывается слизистый секрет. Тканевые базофилы располагаются преимущественно периваскулярно, но часть из них встречается и в межсосудистых участках соединительной ткани.
У представителей плотоядных и всеядных животных бросается в глаза обилие в железах плазматических клеток, что согласуется с данными А.Г.Бабаевой, Е.А.Шубниковой (1979), Н.В.Зеленевского (1992), в несколько меньшем количестве они присутствуют у представителей жвачных. Плазматические клетки располагаются как небольшими группами, так и раздельно, периваскулярно или в соединительной ткани.
В строме слюнных желез нами отмечено наличие лимфоцитов, особенно в большом количестве у всеядных и плотоядных животных. Лимфоцитам придается большое значение в иммуногенезе (Marsh M.N., 1975; Зуфаров К.А. с соавт., 1979).
Локализация лимфоцитов не ограничивается стромой желез, они находятся и внутриэпителиально. У всех изученных видов животных нами отмечены два типа внутриэпителиальных лимфоцитов. Первый тип клеток характеризуется эксцентрично расположенным ядром и широкой зоной цитоплазмы. Нуклеоплазма содержит довольно плотно располагающиеся зерна гетерохроматина под внутренней ядерной мембраной. Поверхность клеток неровная в виду наличия небольших углублений и выступов плазмолеммы. Цитоплазма содержит значительное число параллельных пластинок зернистой эндоплазматической сети, богата свободными рибосомами и полисомами. Для второго типа внутриэпителиальных лимфоцитов характерно высокое ядерно-протоплазматическое отношение. Ядро клеток крупное округло-овальное содержит большие скопления глыбок гетерохроматина под внутренней мембраной. Узкая цитоплазма богата свободными рибосомами и полисомами, содержит короткие единичные пластинки гранулярного эндоплазматического ретикулума и мелкие овальные митохондрии. Слабые выступы плазмолеммы придают поверхности клеток неровный вид. Данная морфология лимфоцитов соответствует описанию иммуноглобулиннесущих лимфоцитов клеток крови и костного мозга (Зуфаров К.А., Тухтаев К.Р., 1987).
Лимфоциты, находясь в эпителии и мигрируя периодически в просвет и строму, обеспечивают передачу информации об антигенных структурах, которые попадают на поверхность эпителия или проникают в него (Аруин Л.И., 1981). Они относятся к диффузной лимфоидной ткани (Зуфаров К.А., Тухтаев К.Р., 1987), которая входит в состав единой иммунной системы слизистых оболочек (Bienenstock J., 1974).
3.4. Анатомическое формирование, динамика роста и развития больших слюнных желез в пре- и постнатальном онтогенезе яка
У яка, согласно результатам наших исследований, все большие слюнные железы анатомически обособляются к концу раннеплодного периода развития (3-3,5 мес.) и принимают форму: околоушная - неправильную ромбовидную, нижнечелюстная - округло-овальную. В подъязычной железе к тому периоду четко различимы две ее части: однопротоковая - более компактная, ланцетовидной формы и многопротоковая - в форме узенькой полоски, состоящей из рыхло соединенных между собой долек. В отличие от яка, большие слюнные железы крупного рогатого скота (Бирих В.К., Удовин Г.М., 1972) анатомически формируются с 4-5-го месяца пренатального развития.
Такую разницу в сроках анатомического формирования больших слюнных желез мы склонны объяснять тем, что у яка, из-за скудного питания и суровых климатических условий горных мест обитания, зародышевый и предплодный период (как и беременность в целом) короче таковых у крупного рогатого скота, поэтому происходит более ранняя закладка органов и систем.
В плодный и позднеплодный периоды развития большие слюнные железы яка окружены хорошо развитыми соединительнотканными капсулами. Околоушная железа представляет собой плотный компактный орган со слабо заметной дольчатостью. Нижнечелюстная железа с ростом плода вытягивается, принимая форму удлиненного овала. Железа представляет собой более крупнодольчатый, но менее компактный орган, чем околоушная. Топография и форма подъязычной железы с возрастом плодов остается без изменений.
Во внутриутробном периоде развития железы яка растут неравномерно. Наибольшая интенсивность увеличения массы желез наблюдается у плодов от 1,5 до 2,5 месяцев, при этом масса околоушной слюнной железы увеличивается в 13,4, нижнечелюстной - в 6,7 и подъязычной - в 4,2 раза. К концу раннеплодного периода на долю околоушной железы приходится 41,3%, нижнечелюстной - 44,4% и подъязычной - 14,3% от массы всех больших слюнных желез (рис. 6).
Усиленно растут все железы в периоды от 3 до 4,5 и от 5 до 6,5 месяцев плодного развития (рис.7,8,9), при этом, в первый период по интенсивности роста на первом месте стоит нижнечелюстная, а на втором - околоушная железа. В то время как у крупного рогатого скота, околоушная слюнная железа имеет самые высокие показатели коэффициента и относительной скорости роста в период от 4 до 5 месяцев пренатального развития, нижнечелюстная в возрасте плодов 5,6 месяцев, а подъязычная – 6 месяцев (Гончаров А.Г., 2001, 2001а, 2001б, 2002). В указанные периоды развития у яка происходит интенсивный процесс формирования новых структурно-функциональных единиц желез. Наряду с периодами интенсивного роста и
Рис.6 - Относительная масса больших слюнных желез яка в разные периоды онтогенеза
Рис.7. - Интенсивность роста линейно-весовых показателей околоушной слюнной железы яка в пре- и постнатальном онтогенезе
Рис.8. - Интенсивность роста линейно-весовых показателей нижнечелюстной слюнной железы яка в пре- и постнатальном онтогенезе
развития слюнных желез яка наблюдаются периоды, характеризующиеся резким снижением интенсивности увеличения массы и умеренным снижением роста линейных показателей (2-3,5; 4-5,5 и 6-7,5 месяцев). Эти периоды сопровождаются интенсивным процессом дифференциации клеточных элементов структурно-функциональных единиц и заменой высокодифференцированных концевых отделов, претерпевающих атрофические и деструктивные изменения, на новые –
Рис.9. - Интенсивность роста линейно-весовых показателей подъязычной слюнной железы яка в пре- и постнатальном онтогенезе
малодифференцированные. По нашему мнению, эти периоды являются "критическими" в развитии больших слюнных желез яка. На наличие таких периодов в развитии слюнных желез у 2; 5 и 7-месячных плодов крупного рогатого скота указывал П.А.Ильин (1972).
В утробном периоде развития наибольшей скоростью роста обладает околоушная, наименьшей - подъязычная слюнные железы. За весь утробный период масса околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез увеличивается, соответственно в 1380, 720 и 308 раз. К концу утробного периода развития на долю околоушной железы приходится 40,77%, нижнечелюстной - 47,86%, подъязычной - 11,4 процента. Масса околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез яка к концу позднеплодного периода развития составила 2,76; 3,24 и 0,77г, соответственно. По абсолютной величине у яка первые две железы, в сравнении с таковыми крупного рогатого скота (Бирих В.К., Удовин Г.М.,1972), меньше в 2 раза, а подъязычной - в 9 раз.
Масса слюнных желез новорожденного яченка значительно ниже массы соответствующих желез крупного рогатого скота. Так, по данным многих авторов, обобщенных в монографии В.К.Бириха и Г.М.Удовина (1972), масса околоушной железы новорожденного теленка составляет 8,7, нижнечелюстной - 8,3, а подъязычной - 2,5-3,5 г. Масса названных желез у новорожденного яченка составила, соответственно, 5,98 ± 0,060, 8,55 ± 0,130 и 1,64 ± 0,070 граммов. За последние 2,5 месяца утробного развития прирост массы каждой из рассмотренных желез яка составил, соответственно, 53,8, 88,8 и 53,1% от общего прироста массы за весь период пренатального онтогенеза. Это согласуется с данными К.А.Васильева (1991), указывающего на то, что 81% от общего прироста массы плода яка приходится на последние 2,5 месяца развития.
В период постнатального онтогенеза интенсивность роста околоушной слюнной железы почти в 2 раза превышает таковую нижнечелюстной и подъязычной желез. У взрослых животных на долю околоушной железы приходится 51,28, нижнечелюстной - 40,88 и подъязычной - 7,86 процента от массы всех больших слюнных желез.
Большие слюнные железы взрослого яка имеют ряд анатомических особенностей. Околоушная железа имеет неправильную ромбовидную форму. Главный выводной проток ее отходит с медиальной поверхности нижней трети железы, не доходя до сосудистой вырезки, поднимается ростродорсально по переднему краю массетора. Проток прободает щеку на уровне третьего премоляра верхней челюсти и тупоконусным сосочком открывается в защечное преддверие ротовой полости. Масса околоушной железы взрослых особей яка составляет 83,0 ± 2,87 грамма.
Нижнечелюстная слюнная железа яка крупнодольчатая, имеет форму вытянутого овала, простирается от основания ушной раковины, налегая медиальной стороной на яремный отросток затылочной кости, до сосудистой вырезки. Выводной проток отходит с медиальной поверхности передней трети железы. На уровне первого премоляра проток проникает под подъязычную железу, идет параллельно ее протоку и открывается в подъязычной бородавке одним отверстием с протоком подъязычной железы. Масса нижнечелюстной железы яка составляет 66,6 ± 4,50 грамма.
Многопротоковая часть подъязычной слюнной железы яка лентовидной формы, простирается от небно-язычной дуги до одной четвертой длины беззубого края нижней челюсти.
Однопротоковая часть ланцетовидной формы, располагается ростровентральнее многопротоковой и простирается от подбородочного угла до середины второго премоляра. Масса подъязычной железы взрослого яка равна 12,7 ± 1,44 граммам.
3.5. Гистогенез околоушной, нижнечелюстной и подъязычной слюнных желез яка в разные периоды онтогенеза
В раннеплодный период развитие слюнных желез яка происходит путем отпочковывания от эпителиального тяжа, врастающего в подлежащую мезенхиму, новых выростов. Причем, деление основного тяжа в околоушной железе, по нашим данным, происходит дихотомически, а в нижнечелюстной - одновременно на несколько ветвей. Аналогичную картину описали С.Н. Касаткин (1949), Е.Ш. Герловин (1978) в развитии слюнных желез человека. По мере отпочковывания от тяжа эпителиальных выростов, в нем появляется просвет. Подобно развиваются слюнные железы у крыс, мышей, кошек, крупного рогатого скота, свиней, маралов (Чунаева М.З., Шубникова Е.А., 1969; Ильина Л.И., 1970; Кричевская И.Е., 1972; Герловин Е.Ш., 1978; Момот Н.В., 1983; Требухова Е.Е., 2005).
К концу раннеплодного периода в больших слюнных железах яка (кроме короткопротоковой части подъязычной железы) морфологически различимы протоковая часть и проацинарные выросты. Выводные протоки дифференцируются на междольковые и внутридольковые. Первые выстланы 2-3-слойным, а местами - многослойным кубическим эпителием, а вторые – двухслойным кубическим. Эпителий протоков секретирует по апокриновому типу. Короткопротоковая часть подъязычной железы состоит к этому времени из эпителиальных тяжей и почек.
Большая часть клеток соединительной ткани к этому периоду дифференцируется в единичные фиброциты и фибробласты. Формируются междольковые соединительнотканные перегородки. К концу раннеплодного периода слюнные железы яка окружены развитой соединительнотканной капсулой. Аналогичную картину наблюдала Н.В. Момот (1996) к концу раннего плодного периода развития у свиней, между тем, Л.И. Ильина (1970) отмечает наличие развитой капсулы лишь у 5-месячных плодов крупного рогатого скота.
В плодном периоде развития в нижнечелюстной и подъязычной длиннопротоковой слюнных железах появляются серозные полулуния. Наличие серозных полулуний в железах отмечают Л.И.Ильина (1970), Н.В. Момот (1983, 1996), П.А. Ильин и др. (1986) в плодный и позднеплодный периоды развития крупного рогатого скота и свиней.
К концу позднеплодного периода развития у яка концевые отделы желез находятся на разных стадиях развития. Однако абсолютное большинство ацинусов слюнных желез образованы клетками, морфологически напоминающими высокодифференцированные гландулоциты взрослых животных. Ацинусы подразделяются на слизистые, серозные и смешанные.
У 4-4,5-месячных плодов яка в эпителии междольковых протоков слюнных желез дифференцируются бокаловидные клетки. Наличие этих клеток в данном возрасте у человека отмечает Е.Ш. Герловин (1978), а у крупного рогатого скота - В.Н. Голенкова (1986).
К 5-5,5 месяцам плодного развития в околоушной, нижнечелюстной и подъязычной однопротоковой слюнных железах яка внутридольковые протоки дифференцируются на вставочные и исчерченные. В околоушной железе первые выстланы простым низкостолбчатым, а вторые - однослойным двухрядным низкостолбчатым эпителием; в нижнечелюстной, соответственно, простым кубическим и простым столбчатым; в подъязычной однопротоковой - однослойным одно- двухрядным кубическим и однослойным двухрядным низкостолбчатым эпителием. Дифференциацию внутридольковых выводных протоков на вставочные и исчерченные в позднеплодный период развития у крупного рогатого скота и свиней отмечают Л.И. Ильина (1970), Н.В. Момот (1983,1996), Н.В. Голенкова (1986,1990), дикого кабана - Ю.А. Момот (2003). Е.Ш. Герловин (1961), Е.А. Шубникова, М.З. Чунаева (1966), И.Е. Кричевская (1969), V. Pospisilova-Zuzakova (1970, 1973) отрицают дифференциацию внутридольковых выводных протоков на вставочные и исчерченные у крыс, мышей и кошек в пренатальном периоде развития.
Каждая из вышеназванных желез, начиная с раннеплодного периода, секретирует. Процессы секреторной активности больших слюнных желез усиливаются во второй половине утробного развития, что согласуется с данными J.M. Shackleford, C.E. Klapper (1962), Е.А.Шубниковой, М.З. Чунаевой (1966), П.А. Ильина (1970), Н.В. Момот (1996) и др.
С возрастом плодов нарастает васкуляризация желез, формирование в них нервных ганглиев, ускорение процессов дифференциации соединительной ткани.
К периоду новорожденности все железы яка имеют дефинитивную форму в морфологическом отношении: в них различимы концевые и вставочные отделы, исчерченные, междольковые и главные выводные протоки. Однако эпителий структурно-функциональных единиц желез не достигает окончательного уровня дифференциации, а у крупного рогатого скота, по данным Н.В. Голенковой и А.А. Симкина (1987), к периоду новорожденности ни одна из больших слюнных желез не имеет дефинитивных форм их морфологической и гистохимической организации.
Результаты наших морфометрических исследований показали, что каждая из больших слюнных желез яка развивается асинхронно, гетерохронно и генетически детерминировано, что согласуется с данными Н.В. Момот (1996), Е.Е. Требуховой (2005а).
В Ы В О Д Ы
1. Структурно-функциональные единицы околоушных, нижнечелюстных и подъязычных желез у изученных видов животных имеют общую морфологическую организацию и видовые органотипические и тканеспецифические особенности структуры, высоты эпителиальной выстилки, диаметра, площади гландулоцитов, их ядер в ацинусах, вставочных и исчерченных выводных протоках, долевого соотношения структурных компонентов, обусловленные различиями в питании и среды обитания. Морфометрические данные железистых структур у представителей дикой фауны (китайский водяной олень и енотовидная собака) уступают соответствующим показателям крупного рогатого скота, яка, домашней свиньи, собаки.
2. Околоушная слюнная железа у крупного рогатого скота, яка, китайского водяного оленя, свиньи, собаки, енотовидной собаки и леопарда является сложной альвеолярной. По характеру выделяемого секрета у крупного рогатого скота и яка она серозная, у китайского водяного оленя, свиньи, собаки, енотовидной собаки и леопарда – смешанная (серозно-мукозная). Секреторные единицы желез выстланы одним слоем железистых клеток.
3. Нижнечелюстная и подъязычная слюнные железы у представителей травоядных, всеядных и плотоядных сложные трубчато-альвеолярные со смешанным характером секрета. Секреторные единицы желез выстланы однослойным железистым эпителием, состоящим из серозных, слизистых и серозно-слизистых гландулоцитов. Варианты их комбинаций, а также количественное соотношение имеют видовые особенности:
3.1. Нижнечелюстная железа.
А) Травоядные животные: у крупного рогатого скота в железе присутствуют в большом количестве слизистые и окруженные серозными полулуниями ацинусы. Серозные секреторные единицы немногочисленны. У яка в железе среди смешанных концевых отделов с широкими серозно-мукозными полулуниями присутствуют единичные чисто слизистые и серозные ацинусы. У китайского водяного оленя мукозные концевые отделы окружены узкими серозно-мукозными полулуниями. Небольшое количество серозных ацинусов располагается в непосредственной близости к исчерченным выводным протокам. В эпителии исчерченных протоков имеются единичные бокаловидные клетки, количество которых значительно возрастает в эпителии междольковых протоков.
Б) Всеядные животные: у свиньи среди смешанных секреторных единиц с узкими серозными полулуниями имеются единичные серозные концевые отделы.
В) Плотоядные животные: у собаки абсолютное большинство ацинусов слизистые и лишь единичные из них окружены широкими серозными полулуниями, которые выстланы серозно-мукозными гландулоцитами. Присутствуют в паренхиме и единичные серозные концевые отделы. У енотовидной собаки слизистые концевые отделы окружены интенсивно базофильно-эозинофильными узкими серозно-мукозными полулуниями. Многочисленные концевые отделы, образованные серозно-мукозными гландулоцитами, присутствуют в непосредственной близости к исчерченным выводным протокам. У леопарда среди слизистых концевых отделов, окруженных широкими серозно-мукозными полулуниями, в значительном количестве располагаются секреторные единицы, образованные серозно-мукозными гландулоцитами.
3.2. Подъязычная слюнная железа.
А) Травоядные животные: у крупного рогатого скота в однопротоковой части железы абсолютное большинство ацинусов выстланы как слизистыми, так и серозными гландулоцитами без серозных полулуний. Единичные серозные секреторные единицы располагаются около исчерченных выводных протоков. Выявляются единичные слизистые концевые отделы с узкими серозными полулуниями. В многопротоковой части железы абсолютное большинство секреторных единиц – слизистые. Крайне редко отмечаются единичные серозные и смешанные с узкими серозными полулуниями концевые отделы. У яка в однопротоковой части железы основная масса концевых отделов слизистая, имеются слизистые ацинусы, окруженные узкими серозными полулуниями и единичные серозные секреторные единицы. Многопротоковая часть железы образована только слизистыми концевыми отделами. У китайского водяного оленя многочисленные слизистые ацинусы с широкими просветами. Единичные концевые отделы окружены узкими серозными полулуниями. Серозные секреторные единицы образуют целые дольки.
Б) Всеядные животные: у свиньи в однопротоковой части железы основная масса концевых отделов выстлана серозными гландулоцитами с небольшим количеством слизистых эпителиоцитов. В многопротоковой части большая часть слизистых ацинусов имеет узкие серозные полулуния. Белковые концевые отделы встречаются реже, чем слизистые.
В) Плотоядные животные: абсолютное большинство секреторных единиц у собаки и енотовидной собаки образовано серозно-мукозными гландулоцитами. Небольшое количество ацинусов имеет немногочисленные мукоциты. У леопарда значительная часть концевых отделов выстлана серозно-мукозными гландулоцитами и немногочисленными мукоцитами. Имеются ацинусы с серозными полулуниями и единицы, образованные только серозно-мукозными клетками.
4. Внутридольковая протоковая система больших слюнных желез представлена вставочными и исчерченными выводными протоками. Она наиболее развита в нижнечелюстной слюнной железе (от 9 до 18%), в меньшей степени в околоушной (от 7 до 12%) и слабо – в подъязычной (от 0,8 до 5,4%) железе.
Эпителий вставочных протоков варьирует от низкого кубического, плоского во вставочных протоках околоушной (жвачные) и подъязычной (жвачные и леопард) слюнных железах, до столбчатого эпителия в нижнечелюстной. В эпителии вставочных протоков у представителей плотоядных (собака) присутствуют слизистые клетки.
Количество вставочных отделов в околоушной железе у крупного рогатого скота, китайского водяного оленя, собаки, енотовидной собаки и леопарда превалирует над исчерченными протоками (от 4 до 9% паренхимы). У свиньи вставочные протоки нижнечелюстной железы лучше развиты (8%), чем нижнечелюстной (5%), у яка они развиты равномерно.
Исчерченные протоки выстланы простым однослойным однорядным столбчатым эпителием, цитоплазма эпителиоцитов имеет характерную эозинофильную исчерченность базального полюса, которая хорошо выражена в нижнечелюстной железе и слабо – в околоушной. Типичные исчерченные протоки отсутствуют в подъязычной слюнной железе собаки домашней, енотовидной собаки, леопарда, а также в короткопротоковой части подъязычной железы яка, крупного рогатого скота и китайского водяного оленя.
Среди типичных эпителиоцитов, присутствуют единичные «темные» клетки и эндокриноциты.
5. Железистые клетки ацинусов околоушной железы яка, крупного рогатого скота имеют ультраструктуру, характерную для клеток, синтезирующих в большом количестве ионы. Они содержат многочисленные митохондрии, разветвленные внутриклеточные канальцы, элементы агранулярной эндоплазматической сети, слабо развитый гранулярный ретикулум и пластинчатый аппарат. У яка сероциты содержат более многочисленные митохондрии и единичные секреторные гранулы, а у крупного рогатого скота наоборот.
Гландулоциты околоушной железы китайского водяного оленя и плотоядных животных имеют структуру, характерную для клеток, синтезирующих белок. Они характеризуются субнуклеарным расположением основной массы хорошо развитых цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума и надъядерной локализацией пластинчатого комплекса. Ядра располагаются в средней или базальной части клетки, а секреторные гранулы занимают среднюю и апикальную зоны.
Эпителиоциты ацинусов околоушной железы свиньи характеризуются базальным расположением уплощенных ядер, сильным развитием пластинчатого комплекса, базально смещенным и слабо развитым гранулярным эндоплазматическим ретикулумом, обильным накоплением секрета, заполняющим почти всю клетку.
6. Мукоциты нижнечелюстной слюнной железы у изученных видов млекопитающих имеют типичную структуру, характерную для клеток, синтезирующих слизистый секрет. На апикальном полюсе клеток имеются микроворсинки. Ядро располагается в базальной части мукоцита. Хорошо развитый пластинчатый комплекс обнаруживается в надъядерной зоне. Гранулярный эндоплазматический ретикулум развит слабо, располагается парануклеарно, вблизи него локализуются немногочисленные митохондрии. Секреторные гранулы слабой электронной плотности. Отдельные из них содержат эксцентрично расположенные округлые электронно-плотные тельца.
7. Клетки полулуний смешанных концевых отделов нижнечелюстной слюнной железы у представителей травоядных, всеядных и плотоядных серозно-слизистые. В надъядерной зоне цитоплазмы хорошо развит пластинчатый аппарат, а гранулярный эндоплазматический ретикулумом – субнуклеарно. Секреторные гранулы полиморфны: в материале слабой электронной плотности обнаруживаются участки высокой плотности, плотность и конфигурация которых имеют видовую специфичность.
8. В эпителии исчерченных протоков выявлено 5 типов клеток: клетки с электронно-прозрачной цитоплазмой, клетки с электронно-плотной цитоплазмой, специфические светлые и темные эпителиоциты, базальные клетки. Апикальные полюса эпителиоцитов исчерченных протоков снабжены редкими короткими микроворсинками. У яка апикальная плазмолемма эпителиоцитов в околоушной железе формирует листообразные своеобразные выпячивания, образуя полость шестигранной формы, что придает внутренней поверхности протока вид, напоминающий соты.
Базальная плазмолемма образует многочисленные выросты, между которыми находятся ряды вертикально расположенных митохондрий. Форма митохондрий и складчатость в исчерченных протоках околоушной и нижнечелюстной слюнной железы отличаются у разных видов животных.
9. Миоэпителиальные клетки располагаются между секреторными клетками и базальной мембраной вокруг серозных и слизистых концевых отделов, вставочных и проксимальной части исчерченных протоков. В околоушной слюнной железе они располагаются в местах перехода концевых отделов во вставочные протоки. В нижнечелюстной железе миоэпителиоциты более многочисленные вокруг слизистых и смешанных, чем серозных ацинусов. Миоэпителиоциты представлены светлыми и темными клетками. Светлые клетки малочисленны и характеризуются большим размером, электронно-прозрачной цитоплазмой, короткими и толстыми отростками, малым количеством неравномерно распределенных миофиламентов. Большинство миоэпителиоцитов представлено темными клетками с электронно-плотной цитоплазмой, содержащей многочисленные миофиламенты.
10. Концевые отделы и протоковую систему больших слюнных желез изученных видов животных окружает тонкая фибриллярная сеть. Количество фибрилл и их организация варьирует у разных видов и неодинакова в различных железах. Несколько концевых отделов, покрытых фибриллярной сетью, объединяются компактно расположенными уплощенными и цилиндрическими коллагеновыми и эластическими волокнами. Ход волокон спирально-волнистый. Между тонкой фибриллярной сетью и волоконным пластом существует пространство, в котором наблюдается наличие кровеносных капилляров.
В конструкции волокнистого остова, окружающего группы ацинусов и протоковую систему существует две системы коллагеновых волокон, различных по своему функциональному значению. Первая система включает в себя основную массу параллельных коллагеновых волокон, идущих в направлении основных механических напряжений, связанных с накоплением и продвижением секрета. Вторая система представлена тонкими связочными волокнами, расположенными поперечно по отношению к основным и выполняет вспомогательную интегрирующую функцию, обеспечивая взаимосвязь основных коллагеновых волокон и структурно-функциональных элементов желез, а также поддерживает их рабочую архитектонику.
Между различными смежными структурными единицами желез существует переходный остов, имеющий неориентированный тип строения, относительно большие межволоконные пространства и выраженную спиральность волокон цилиндрической формы. Он выполняет редукторную функцию между соседними структурными единицами с различной механической подвижностью.
11. К концу раннеплодного периода развития (3-3,5мес.) яка все большие слюнные железы анатомически обосабливаются и принимают дефинитивную форму: околоушная – неправильную ромбовидную, нижнечелюстная – округло-овальную. В подъязычной железе хорошо дифференцируются две ее части: однопротоковая – более компактная, ланцетовидной формы и многопротоковая – в форме узенькой полоски. В плодный и позднеплодный периоды онтогенеза большие слюнные железы яка окружены хорошо развитыми соединительнотканными капсулами. Околоушная железа представляет собой плотный компактный орган со слабо заметной дольчатостью. Нижнечелюстная железа крупнодольчатая, но менее компактная, чем околоушная, с ростом плода она вытягивается, принимая форму удлиненного овала.
В утробном периоде развития наибольшей скоростью роста обладает околоушная железа, наименьшей – подъязычная. К концу утробного периода на долю околоушной железы приходится 40,77%, нижнечелюстной – 47, 86% и подъязычной – 11,37%. В постнатальный период развития интенсивность роста околоушной железы почти в 2 раза превышает таковую нижнечелюстной и подъязычной желез. У взрослых животных на долю первой приходится 51,28%, нижнечелюстной – 40,88%, а подъязычной – 7,86%.
12. Околоушная железа взрослого яка имеет неправильную ромбовидную форму. Главный выводной проток ее отходит с медиальной поверхности нижней трети железы. Не доходя до сосудистой вырезки, он поднимается ростродорсально по переднему краю массетора. Проток прободает щеку на уровне третьего премоляра верхней челюсти и тупоконусным сосочком открывается в защечное преддверие ротовой полости. Масса околоушной железы взрослых особей яка составляет 83,00 ± 2,870г.
Нижнечелюстная слюнная железа крупнодольчатая, имеет форму вытянутого овала. Она простирается от основания ушной раковины, налегая медиальной стороной на яремный отросток затылочной кости, до сосудистой вырезки. Выводной проток отходит с медиальной поверхности передней трети железы. На уровне первого премоляра проток проникает под подъязычную железу, идет параллельно ее протоку и открывается в подъязычной бородавке одним отверстием с протоком подъязычной железы. Масса нижнечелюстной железы яка составляет 66,6 ± 4,50 г.
Короткопротоковая часть подъязычной слюнной железы яка лентовидной формы, простирается от небно-язычной дуги до одной четвертой длины беззубого края нижней челюсти. Длиннопротоковая часть ланцетовидной формы, располагается ростровентральнее короткопротоковой и простирается от подбородочного угла до середины второго премоляра. Масса подъязычной железы взрослого яка равна 12,7 ± 1,44 г.
13. Гистологически к концу раннеплодного периода околоушная, нижнечелюстная и подъязычная однопротоковая железы яка представлены морфологически различимыми проацинарными выростами, а также междольковыми и внутридольковыми выводными протоками, стенки которых выстланы секретирующим эпителием. Многопротоковая часть подъязычной железы к этому времени представлена эпителиальными тяжами и почками. К 3-4,5 месяцам плода в нижнечелюстной и подъязычной слюнных железах появляются серозные полулуния. У 4-4,5-месячных плодов яка в эпителии междольковых протоков дифференцируются бокаловидные клетки. К 5,5 месяцам плода в околоушной, нижнечелюстной и подъязычной однопротоковой железах яка внутридольковые протоки дифференцируются на вставочные и исчерченные.
14. Периоды от 2-3,5, 4-5,5 и 6-7,5 месяцев пренатального онтогенеза, а также неонатальный период жизни являются в развитии слюнных желез яка «критическими». Они характеризуются интенсивным процессом дифференциации клеточных элементов структурно-функциональных единиц и заменой высокодифференцированных концевых отделов, претерпевающих атрофические и деструктивные изменения, на новые – малодифференцированные, сопровождаются снижением интенсивности увеличения массы и умеренным снижением роста линейных показателей. К концу позднеплодного периода и в период новорожденности все большие слюнные железы яка принимают гистологически дефинитивное строение и приобретают относительно высокий уровень дифференциации. Каждая из слюнных желез яка развивается асинхронно, гетерохронно и генетически детерминировано.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Статьи в ведущих научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ для публикации основных результатов диссертации
- Чекарова, И.А. Пренатальные органно- и гистогенез больших слюнных желез яка /И.А. Чекарова // Морфология. - 1998. - N3. – Т. 113. - С.127.
- Чекарова, И.А. Ультраструктура околоушной слюнной железы собаки / И.А. Чекарова, C. W.Lim //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2006. - №6. - С. 50 - 56.
- Чекарова, И.А. Сравнительная морфология околоушной слюнной железы самок и самцов-кастратов свиньи / И.А. Чекарова //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2007. - №1. - С. 68 - 71.
- Чекарова, И.А. Пространственная организация коллагеновых волокон околоушной слюнной железы свиньи / И.А.Чекарова, Chae Woong Lim, Р.Н. Цыбикова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2007. - №1(169). - С.50-55.
- Чекарова, И.А. Электронно-микроскопическая характеристика околоушной слюнной железы крупного рогатого скота / И.А. Чекарова, П.П. Бердников. //Аграрный вестник Урала. - №7. - 2009. - С.71-73.
- Чекарова, И.А. Сравнительная морфометрическая гистология околоушной слюнной железы жвачных и всеядных / И.А. Чекарова, П.П. Бердников //Аграрный вестник Урала. - №9. - 2009. - С. 70 - 71.
- Чекарова, И.А. Морфометрия аденомеров околоушной железы яка и крупного рогатого скота / И.А. Чекарова, Р.З. Сиразиев //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2010. - №3. - С.55 - 58.
- Чекарова, И.А. Структурная организация соединительной ткани cлюнных желез некоторых млекопитающих. / И.А. Чекарова, Р.З. Сиразиев. //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2009. -№12. - С.43-47.
- Чекарова, И.А. Особенности апикальной зоны цитоплазматической мембраны эпителиоцитов исчерченных протоков околоушной слюнной железы яка. /И.А. Чекарова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2010. - №4. - С.121-123.
Статьи в сборниках научных трудов, материалах международных и региональных научно-практических конференций, научно-практических журналах
- Чекарова, И.А. К вопросу морфологии слюнных желез яка в онтогенезе. Сообщ.2.Данные массы и линейных показателей слюнных желез в предплодный и раннеплодный периоды онтогенеза /И.А. Чекарова, А.В. Степанов //Тр. Бурят.СХИ.-1994.-Вып.40. – С. 38-41.
- Чекарова, И.А. Анатомическое строение слюнных желез яка в предплодный и раннеплодный периоды развития / И.А. Чекарова, А.В. Степанов //Сб.тр. Бурят.ГСХА. – Улан-Удэ. - 1994. – С.124 – 125.
- Чекарова, И.А. Гистологическое строение околоушной слюнной железы яка в позднеплодном периоде развития / И.А. Чекарова //Сб.тр.Бурят. ГСХА. - 1995. - Вып.38. - С.166.
- Чекарова, И.А. Анатомическое строение околоушной железы взрослого яка / И.А.Чекарова //Актуал. пробл. ветеринарии: Материалы междунар. конф., 25-30 июня 1995г.- Барнаул. - 1995. - С.62.
- Чекарова, И.А. Гистологическое строение околоушной железы взрослого яка / И.А. Чекарова, А.В. Степанов //Актуал. пробл. ветеринарии: Материалы междунар. конф., 25-30 июня 1995г. - Барнаул. -1995. - С.62.
- Чекарова, И.А. Анатомо-гистологическая характеристика околоушной слюнной железы яка в раннеплодный период развития / И.А.Чекарова //Актуал. пробл. патологии животных и человека: материалы науч. практич. конф. (14-16 мая 1996г.). - Барнаул. - 1996. - С.82.
- Чекарова, И.А. Морфология околоушной слюнной железы яка в раннеплодном периоде развития / И.А. Чекарова //Актуал. пробл. вет. образования. - Барнаул. -1998. - С.84-85.
- Чекарова, И.А. Особенности анатомо-гистологического развития больших слюнных желез яка в пренатальный период онтогенеза / И.А.Чекарова //Актуал. вопр. видовой и возрастной морфологии животных и пути совершенствования преподавания морф. дисциплин: мат. междунар. конф. ветерин. морфологов. - БГСХА им.В.Р.Филиппова, Бурят. Отд-ние ВрНОАГЭ. - Улан-Удэ. - 1998. - С.270-272.
- Чекарова, И.А. Анатомические особенности больших слюнных желез новорожденного яка / И.А.Чекарова //Тр./БГСХА им. В.Р.Филиппова. - 1999. - Вып.39, Ч.1. - С. 16-17.
- Чекарова, И.А. Анатомо-гистологическая характеристика нижнечелюстной слюнной железы взрослого яка / И.А.Чекарова // Тр. БГСХА им. В.Р.Филиппова. - 1999. - Вып.39, Ч.1. - С. 17-19.
- Чекарова, И.А. Морфология нижнечелюстной слюнной железы яка в плодный период развития / И.А.Чекарова // Мат.межрег.науч.конф. «Теоретические и практические аспекты ветеринарии и медицины» - Улан-Удэ. - 2001. - С.125-128.
- Чекарова, И.А. Гистоморфология подъязычной слюнной железы новорожденного яка / И.А.Чекарова, С.Д. Саможапова // Труды 2-го Всероссийского симпозиума «Морфологические и экол. пробл. Пульмунологии» Труды Всероссийской науч.конф. «XXI век: актуальные задачи морфологии». - 2001. - Вып.1. - С. 86-87.
- Чекарова, И.А. Особенности роста и развития больших слюнных желез яка в онтогенезе / И.А.Чекарова // Сарлаг судлар 2 азийн бyс рутгийн сарлаг судлал олон улсын эрдэм шинжилгээний бага хурлын бутээл. - Улаанбаатар хот. - 2002. - С.17.-21.
- Чекарова, И.А. Динамика роста диаметра и высоты эпителия концевых отделов и внутридольковых выводных протоков нижнечелюстной слюнной железы яка в связи с возрастом / И.А. Чекарова // Мат. междунар. науч. конф. “Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных”, посвящ. 90-летию проф. В.Р.Филиппова (25-27 июня 2003г.). - Улан-Удэ. - Ч. 1. - С.109-110.
- Чекарова, И.А. Микроморфология околоушной слюнной железы водяного оленя / И.А. Чекарова // Мат. Межвуз. конф. «Молодые ученые – агропромышленному комплексу Дальнего Востока» (01-02 ноября 2005г.). - Уссурийск. - 2005. - С. 66-69.
- Чекарова, И.А Микроморфология околоушной слюнной железы енотовидной собаки / И.А.Чекарова // Мат. Межвуз. конф. «Молодые ученые – агропромышленному комплексу Дальнего Востока» (01-02 ноября 2005г.). - Уссурийск. - 2005. - С. 69 -72.
- Чекарова, И.А. Морфологическая, морфометрическая и ультраструктурная характеристика структурно-функциональных единиц околоушной слюнной железы свиньи / И.А.Чекарова, Р.Н. Цыбикова // Труды II Междунар. научно-практич. конф. молодых ученых. « Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых». - Новосибирск. - 2006. - С.477-482.
- Чекарова, И.А. Ультраструктура околоушной слюнной железы крупного рогатого скота / И.А.Чекарова, Р.Н. Цыбикова // Труды II Междунар. научно-практич. конф. молодых ученых. « Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых». - Новосибирск. - 2006. - С.472 - 476.
- Чекарова, И.А. Морфологическая и морфометрическая характеристика нижнечелюстной слюнной железы енотовидной собаки / И.А. Чекарова, К.А. Васильев //Аграрная наука – сельскому хозяйству: сборник статей. В 3 кн. Международная научно-практическая конференция. - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2006. - Кн. 2. - С.463-466.
- Чекарова, И.А. Сравнительная морфология нижнечелюстной слюнной железы некоторых плотоядных / И.А.Чекарова, К.А.Васильев // Аграрная наука – сельскому хозяйству: Сборник статей. В 3 кн. Международная научно-практическая конференция. - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2006. - Кн. 2. - С.466-468.
- Чекарова, И.А Морфология околоушной слюнной железы собак. / И.А. Чекарова // Вестник БГСХА, 2007. - Вып.6. - С.16-31.
- Чекарова, И.А Морфологическая и морфометрическая характеристика структурно-функциональных единиц нижнечелюстной слюнной железы плотоядных / И.А.Чекарова, Р.Н. Цыбикова //Мат-лы междунар. научно-практич.конф. «Актуальные проблемы аграрной науки и образования», Чита, 24 ноября 2006г. – Чита.: Поиск, 2007. - С.280 -285.
- Чекарова, И.А Околоушная железа свиньи / И.А. Чекарова, Р.Н. Цыбикова // Мат-лы научно-практич.конф. «Актуальные проблемы аграрной науки и образования», Чита, 24 ноября 2006г. – Чита.: Поиск, 2007. - С.285 - 290.
- Чекарова, И.А. Морфологическая и морфометрическая характеристика околоушной слюнной железы снежного леопарда / И.А. Чекарова, Р.Н. Цыбикова // Мат-лы международной научно-практической конференции «Роль физиологии в современном естествознании». - Чита, 2007. - С.81-83.
- Чекарова, И.А. Морфометрическая характеристика структурно-функциональных единиц околоушной слюнной железы яка / И.А. Чекарова, Р.Н. Цыбикова // Аграрная наука – сельскому хозяйству: сборник статей. В 3 кн. Международная научно-практическая конференция. - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2007. - Кн. 2. - С.481 - 483.
- Чекарова, И.А. Ультраструктура околоушной слюнной железы свиньи / И.А.Чекарова, Chae Woong Lim, Р.Н. Цыбикова // Мат-лы междунар. нау.-практич. конференции «Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии», посвящ. 100-летию проф. И.А. Спирюхова, 2007. - С.12 - 14.
- Чекарова, И.А. Электронно-микроскопическая характеристика структурно-функциональных единиц околоушной слюнной железы крупного рогатого скота. / И.А. Чекарова //Мат-лы междунар.нау.-практич. конференции, посвящ. 45-летию ГНУ НИИ ветеринарии Восточной Сибири СО Россельхозакадемии (15-16 сентября 2008 г). - Чита, 2008. - С.243-250.
- Чекарова, И.А. Об организации внутридольковой соединительной ткани околоушной и нижнечелюстной слюнных желез собаки / И.А. Чекарова, Chae Woong Lim, Р.Н. Цыбикова. // Материалы XVI Московского международного ветеринарного конгресса, 26-28 апреля 2008 г. – Москва, 2008. – С.272 – 275.
- Чекарова, И.А. Морфометрическая характеристика структурно–Функциональных единиц нижнечелюстной слюнной железы яка и крупного рогатого скота. / И.А. Чекарова, Р.З. Сиразиев // Аграрная наука сельскохозяйственному производству Монголии, Сибири и Казахстана: сб.науч.докладов XIII междунар. науч. - практич. конф. Ч. I «Растениеводство и животноводство». - Монгольская академия аграрных наук. - Улаанбаатор, 2010. - С.135 - 139.
