Разработка и изучение химиотерапевтических и биологических препаратов для терапии и профилактики пневмоэнтеритов телят
На правах рукописи
ХАСАНОВ НАХТУЛЛО РАХМАТОВИЧ
РАЗРАБОТКА И ИЗУЧЕНИЕ
ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
ДЛЯ ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ ПНЕВМОЭНТЕРИТОВ ТЕЛЯТ
06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Душанбе – 2012
Работа выполнена в Институте ветеринарии Таджикской академии сельскохозяйственных наук и Таджикском аграрном университете им. Ш. Шохтемур
| Научный консультант: | доктор ветеринарных наук, профессор, академик И. Саттори |
| Официальные оппоненты: | доктор ветеринарных наук Муминов А. доктор медицинских наук, профессор Ходжаева Н.М. доктор ветеринарных наук, профессор Сидорчук А.А. |
Ведущая организация: НПП «Биологические препараты»
Таджикской академии сельскохозяйственных наук
Защита диссертации состоится 31 декабря 2012 г. в 10 ч на заседании диссертационного совета ДМ 050.001.01 при Ветеринарном институте Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, г. Душанбе, ул. Каххорова, 43, тел. (992-372) 27-39-95.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, г. Душанбе, ул. Каххорова, или на официальных сайтах ВИ ТАСХН www.tajnivi.tj и ВАКа России www.vak2.ed.gov.ru
Автореферат разослан 30 сентября 2012 г.
| Ученый секретарь диссертационного совета, доктор ветеринарных наук, профессор | Ярбаев Н.Я. |
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Для профилактики и терапии моно- и ассоциированных бактериальных болезней животных, наносящих значительный ущерб животноводству, используют широкий ассортимент антимикробных препаратов, в том числе комплексных, недостатками ряда которых являются узкий спектр противобактериальной активности, отсутствие обезболивающего и адсорбирующего действия (Гнатенко Г.В., 1990; Пивовар Л.М., 1990; Шахов А.Г. и др., 1995; Иноземцев В.П. и др., 1998).
Низкая лечебно-профилактическая эффективность ряда противомикробных лекарственных средств, применяемых при инфекционных желудочно-кишечных и респираторных болезнях молодняка сельскохозяйственных животных, обусловлена накоплением бактериальных токсинов в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ), для выведения которых могут быть использованы растительные и минеральные адсорбенты. Кроме того, для уменьшения действия раздражителей на слизистую оболочку ЖКТ и нормализации перистальтики кишечника больных животных целесообразно в состав комплексных препаратов вводить обезболивающие вещества (Червяков Д.К. и др., 1977; Александров И.Д. и др., 2004).
Поэтому с целью уничтожения патогенных микроорганизмов и выведения их токсинов из организма больных животных перспективным является применение рациональных сочетаний антибактериальных, обезболивающих, витаминно-минеральных препаратов и адсорбирующих веществ (Саркисов А.Х. и др., 1982; Парфенов И.С., 1983; Бальчюнайтис А. и др., 1990; Коваль М.П. и др., 1994; Naylor J.M. et al., 1995; Александров И.Д. и др., 2004).
Многочисленные исследования посвящены определению эффективности антибиотиков, однако многие вопросы рационального их применения в борьбе с болезнями телят остаются нерешенными. Одной из актуальных проблем ветеринарии является разработка комбинированных, пролонгированных, экономичных лекарственных средств и научно-обоснованных рекомендаций по рациональному их применению при моно- и ассоциированных бактериальных желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят (Подкопаев В.М. и др., 1967; Егоров Н.С., 1986; Пивовар Л.М., 1990; Куриленко А.Н., 1996; Сидоркин В.А. и др., 2003).
Желудочно-кишечные и респираторные болезни молодняка сельскохозяйственных животных наносят животноводческим хозяйствам Республики Таджикистан (РТ) значительный экономический ущерб, который выражается в снижении привеса, падеже, затратах на диагностику и терапию.
Широкое распространение желудочно-кишечных и респираторных болезней телят в хозяйствах Таджикистана и острый дефицит эффективных лечебных и профилактических препаратов, определяют актуальность наших исследований.
Целью настоящей работы явилось изучение роли патогенов в этологии желудочно-кишечных и респираторных болезней телят и разработка новых химиотерапевтических и биологических препаратов, методов их рационального применения при профилактике и лечении этих заболеваний.
Для решения поставленной цели решены следующие задачи:
1. Определить роль патогенных микроорганизмов в этиологии пневмоэнтеритов телят, клинико-гематологические и биохимические показатели крови больных животных, чувствительность патогенов к широко применяемым антибиотикам.
2. Разработать состав и технологию комплексного химиотерапевтического препарата (ДС-1100), изучить его физико-химические и биологические свойства для стандартизации, контроля качества и определения стабильности.
3. Изучить антимикробную активность и токсикологические свойства комплексного препарата ДС-1100.
4. Провести экспериментальные исследования и производственную проверку профилактической и терапевтической эффективности препарата ДС-1100, определить дозы и отработать оптимальную схему применения.
5. Исследовать в эксперименте и производственных условиях профилактическую и терапевтическую эффективность пробиотика Субтилбен в форме порошка.
6. Изучить влияние пробиотика Субтилбен на иммунологические показатели сыворотки крови телят.
7. Определить экономическую эффективность применения комплексного химиотерапевтического препарата ДС-1100 и пробиотика Субтилбен при профилактике и терапии пневмоэнтеритов молодняка КРС.
Научная новизна. Определена роль бактериальных агентов в возникновении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят в животноводческих хозяйствах Республики Таджикистан. С учетом совместимости и синергизма создан комбинированный противомикробный препарат ДС-1100, обладающих высокой эффективностью при пневмоэнтеритах молодняка КРС, разработаны состав и технология его изготовления, методы контроля, изучены физико-химические и биологические свойства, их стабильность.
Исследовано антибактериальное действие комбинированного химиотерапевтического препарата ДС-1100 в отношении референтных штаммов и изолятов условно-патогенной микрофлоры, имеющей этиологическое значение при пневмоэнтеритах телят. Установлено, что препарат обладает высокой антимикробной активностью.
Изучены основные токсикологические свойства разработанного лекарственного средства, в том числе определены параметры острой и хронической токсичности, исследовано влияние на кожный покров и слизистые оболочки; определены оптимальные лечебные и профилактические дозы препарата, предложена эффективная схема его применения при бактериальных желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят в производственных условиях.
В экспериментальных условиях исследована лечебно-профилактическая эффективность пробиотика Субтилбен, которая была подтверждена широкими производственными испытаниями в животноводческих хозяйствах Таджикистана.
Научная новизна проведенных исследований подтверждена патентами:
1) Патент TJ 405. Республика Таджикистан. Препарат Витагин для лечения эндометрита коров / Сатторов И.Т., Хасанов Н.Р., Сатторов Н.Р., Давлатмуродов Т.М.;
2) Патент TJ 406. Республика Таджикистан. Препарат Лактовит для лечения мастита коров / Сатторов И.Т., Хасанов Н.Р., Сатторов Н.Р., Давлатмуродов Т.М.
Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований ветеринарной практике предложены эффективные комплексный химиотерапевтический препарат ДС-1100 и пробиотик Субтилбен, обладающие этиотропным и патогенетическим действием и предназначенные для профилактики и терапии желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка КРС, вызываемых патогенной микрофлорой.
Разработанные лекарственное средство, успешно прошли широкие производственные испытания и внедрены в ветеринарную практику с высоким лечебно-профилактическим эффектом.
Разработана нормативная документация, регламентирующая технологический процесс производства, показатели качества и методы их контроля, наставление по применению в ветеринарной медицине, которая утверждена Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией (ГУВ) Министерства сельского хозяйства (МСХ) РТ:
1. Инструкция по изготовлению и контролю препарата ДС-1100 (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
2. Технические условия на препарат ДС-1100 (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
3. Наставление по применению препарата ДС-1100 для профилактики и лечения бактериозов животных и птиц (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
4. Хасанов Н.Р. Рекомендации об инфекционных болезнях животных и мерах борьбы с ними (на тадж. яз.) / Хасанов Н.Р., Сахимов М.Р.; Национальный центр сельскохозяйственного обучения. – Душанбе, 2006. – 15 с.
5. Дастур оид ба гузаронидани чорабинињои пешгирї ва барњамдињии сирояти ротавирусии гўсолањо // Ќонунгузории ветеринарї. – Душанбе, 2009. – Љилди 3. – С. 107.
6. Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом новорожденных животных «// Ветеринарное законодательство. – Душанбе, 2009. – Т. 3. – С. 711.
7. Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации колибактериоза новорожденных животных // Ветеринарное законодательство. – Душанбе, 2009. – Т. 3. – С. 705.
Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:
1. Результаты определения роли патогенных микроорганизмов в этиологии пневмоэнтеритов телят, изучения клинико-гематологических и биохимических показателей крови больных животных, чувствительности патогенов к широко применяемым антибиотикам.
2. Состав и технология комплексного химиотерапевтического препарата (ДС-1100), результаты изучения его физико-химических и биологических свойств, определения стабильности.
3. Результаты изучения антимикробной активности и токсикологических свойств комплексного препарата ДС-1100.
4. Результаты экспериментальных исследований и производственных испытаний профилактической и терапевтической эффективности препарата ДС-1100; дозы и схема применения этого препарата.
5. Результаты исследования в эксперименте и производственных условиях профилактической и терапевтической эффективности пробиотика Субтилбен в форме порошка.
6. Результаты изучения влияние пробиотика Субтилбен на иммунологические показатели сыворотки крови телят.
7. Результаты определения экономической эффективности применения комплексного химиотерапевтического препарата ДС-1100 и пробиотика Субтилбен при профилактике и терапии пневмоэнтеритов молодняка КРС.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук и Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура (2003 – 2012 гг.); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 2003 – 2012 гг.); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях», посвященной 60-летию ТаджНИВИ (Душанбе, 2003 г.); II Международной научной конференции «Мониторинг распространения и предотвращения особо опасных болезней животных» (Самарканд, 2004 г.).
Публикации. По результатам исследований опубликованы 29 научных работ, получены 2 патента Республики Таджикистан.
Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.
Диссертация изложена на 330 страницах текста, набранного на компьютере, иллюстрирована 35 таблицами и 20 рисунками. Список литературы включает 327 наименований. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Комплекс экспериментально-клинических исследований, положенный в основу диссертации, выполнен в 2004 – 2011 гг. в лаборатории вирусологии Институт ветеринарии ТАСХН и лаборатории микробиотехнологии ТАУ в соответствии с республиканской научно-технической программой «Разработка и внедрение эффективных и биологических средств в профилактике и терапии бактериозов и микоплазмоза животных» на 2005 – 2010 гг., зарегистрированной в Национальном патентно-информационном центре РТ (№ госрегистрации 0105 ТД 236).
Научно-производственные опыты, апробация и производственная проверка полученных результатов проведены в 15 животноводческих хозяйствах Таджикистана.
Диагностические исследования. Бактериальные болезни диагностировали на основании анализа эпизоотологических данных, с учетом клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов бактериологического исследования патологического материала от больных, павших и вынужденно убитых больных телят.
Учитывая, что желудочно-кишечные и респираторные болезни телят независимо от их этиологии во многом сходны по клиническим признакам и патологоанатомическим изменениям решающее значение в постановке этиологического диагноза имеют лабораторные исследования патологического материала.
Лабораторные исследования предусматривали:
- отбор и пересылку патологического материала в лабораторию или научно-исследовательское учреждение;
- подготовку патматериала для исследований;
- выделение возбудителей (антигенов), их идентификацию и ретроспективную диагностику.
Для лабораторных исследований от павших телят сразу после их гибели и убитых с диагностической целью животных в первые часы клинического проявления болезни, не подвергавшихся лечению антибактериальными препаратами, отбирали фекалии, ректальные смывы или соскобы слизистой оболочки прямой кишки (от больных), кусочки пораженных легких, участков тощей и подвздошной кишок (при исследовании на корона-, парво- рота- и энтеровирусную диарею), сычуг, трубчатую кость, головной мозг, а также мезентериальные лимфоузлы, почки, селезенку, кусочек печени с желчным пузырем, грудную или брюшную жидкость.
Кроме того, для исследований брали сыворотку крови животных-реконвалесцентов (парные – с интервалом 2 недели или однократные пробы, отобранные не ранее 10 – 14 дней после переболевания).
Пробы фекалий при жизни животных отбирали непосредственно из прямой кишки во время дефекации или с помощью стерильных тампонов. Тампоны с ректальными смывами помещали в пробирки или пенициллиновые флаконы с раствором Хенкса или среды для тканевых культур с антибиотиками.
Содержимое тонкого кишечника от убитых с диагностической целью животных отбирали с помощью шприца толстой иглой через кишечную стенку.
Посуду с патологическим материалом герметически укупоривали, наклеивали этикетку с указанием вида отобранного материала, возраста животного, даты, названия и адреса учреждения. К патологическому материалу, направляемому для исследований, прилагали сопроводительную записку.
Патологический материал доставляли в термосе со льдом. При необходимости материал консервировали 30% водным раствором глицерина.
Подготовку патматериала к исследованиям, направленным на выделение и идентификацию вирусов (антигенов), бактерий, хламидий, гельминтов, простейших, осуществляли в соответствии с утвержденными методическими указаниями и рекомендациями. Фекалии или содержимое подвздошной кишки от трупов для исследования на ооцист, криптоспоридий подготавливали флотационными или центрифужно-флотационными методами.
Определение антибиотикочувствительности выделенных культур патогенных бактерий проводили в соответствии с «Методическими указаниями по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных».
Животные. Эксперименты проводили на 650 белых мышах (массой 18 – 20 г), 280 кроликах породы шиншилла (массой 2,5 – 2,7 кг), 120 телятах черно-пестрой породы (массой 33 – 35 кг), производственные испытания – 1106 телятах черно-пестрой породы (массой 33 – 35 кг).
В работе применяли разработанный нами комплексный химиотерапевтический препарат ДС-1100 в форме порошка, гранул и таблеток, пробиотик Субтилбен, представляющий собой комплекс взвеси микробных клеток местных штаммов B. subtilis (BS TJ 09, BS TJ Д 24, BS TJ Д 26) и минеральных и растительного веществ.
Для стандартизации и контроля качества ДС-1100, а также изучения его стабильности при хранении разработаны методы качественного и количественного контроля препарата.
Физико-химические свойства ДС-1100
Внешний вид и цвет определяли визуально при рассмотрении отобранных образцов в белой фарфоровой чашке или ложке при хорошем естественном освещении на расстоянии 25 – 30 см от глаз.
Определение размера гранул проводили по ГФ XI (вып. 2, с. 139).
Определение размера таблеток проводили по ГФ XI (вып. 2, с. 156).
Определение массы таблеток проводили по ГФ XI (вып. 2, с. 156).
Определение времени распадаемости проводили по ГФ XI (вып. 2, с. 158).
Концентрацию водородных ионов (рН) 10% водной суспензии определяли потенциометрически (ГФ XI, вып. 1, с. 175).
Массовую долю влаги определяли по ГОСТу 24061-89.
Подлинность окситетрациклина гидрохлорида, левомицетина и сульфадимезина устанавливали методом тонкослойной хроматографии на пластинах с силикагелем.
Определение массовой доли окситетрациклина гидрохлорида, левомицетина и сульфадимезина проводили микробиологическим методом.
Биологические свойства ДС-1100
Стерильность препарата определяли по ГОСТу 28085-89.
Для исключения контаминации микоплазмами производили посевы проб на среду Эдварда (жидкую, полужидкую и твердую), обогащенную 20% сыворотки крови лошади, 10% дрожжевого экстракта, 0,5% глюкозы с добавлением фенол-рота в конечной концентрации 0,001%.
Определение антимикробной активности ДС-1100 проводили методом серийных двукратных разведений препарата в МПБ. Использовали суспензии односуточных тест-культур (музейные штаммы и изоляты E. coli, S. dublin, P. multocida, Pr. vulgaris, выделенные от больных диареей телят в животноводческих хозяйствах РТ) в изотоническом растворе натрия хлорида в количестве 2108 м.к. в 1 мл. Концентрацию, которая вызывала задержку роста культуры (прозрачный бульон), считали минимальной бактериостатической (МБсК). При пересеве на МПА определяли минимальную бактерицидную концентрацию (МБцК), которая вызывала гибель микроорганизмов (отсутствие роста в течение 48 – 72 ч). Параллельно ставили контроли (МПБ и МПА без препарата).
Токсические свойства ДС-1100
Безвредность ДС-1100 изучали в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (М., 1988).
Испытание на токсичность проводили по ГФ XI (вып. 2, с. 182).
Стабильность ДС-1100 для определения срока его годности изучали при естественном хранении. Оценку качества препарата проводили по основным показателям.
Ветеринарно-санитарную экспертизу мяса осуществляли согласно ГОСТу 202353.
Для изучения профилактической эффективности ДС-1100 вводили перорально (с водой / кормом) в дозе 0,2 – 0,3 г/кг массы тела один раз в сутки в течение 6 дней, лечебной – 0,2 – 0,5 г/кг массы тела 2 раза в сутки до выздоровления.
Профилактическую эффективности Субтилбена изучали на 200 телятах, которым вводили перорально с водой или молоком в дозе 0,3 г/кг массы тела один раз в сутки в течение 10 дней, лечебной (на телятах) – в тех же дозах 2 раза в сутки до выздоровления.
Экономическую эффективность научных разработок рассчитывали согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (утв. ГУВ МСХ СССР в 1982 г.), а также в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений» (утв. МСХ СССР в 1983 г.).
Методики отдельных экспериментов изложены в соответствующих разделах диссертации.
Цифровой материал диссертации обработан статистически по критерию Стьюдента для проверки достоверности различий. Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при p0,05 (Лакин Г.Ф., 1990).
За основу выводов и практических предложений взяты результаты контролируемых опытов в лабораторных и производственных условиях.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Эпизоотология пневмоэнтеритов телят
3.1.1. Роль патогенных возбудителей
в возникновении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят
Рядом исследований, проведенных в последние годы [ ], доказано, что возбудителями желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка КРС на молочно-товарных фермах Таджикистана являются E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida. Внешние факторы, влияющие на естественную резистентность и иммунологическую реактивность организма, определяют вероятность возникновения и тяжесть течения инфекционных пневмоэнтеритов, отход от которых в некоторых хозяйствах ежегодно доходил до 40% телят. У животных отмечали низкий прирост массы, они были подвержены заболеваниям органов пищеварения, дыхания, наблюдали нарушение минерального обмена и др.
Для определения этиологии заболевания осуществили эпизоотологические и бактериологические исследования, оценивая состояние коров-матерей, условия их содержания и кормления, выявляли предрасполагающие факторы инфекционных пневмоэнтеритов телят.
При изучении эпизоотической обстановки в исследованных хозяйствах районов республиканского подчинения (РРП), Хатлонской и Согдийской областей РТ установлено их благополучие по особо опасным заболеваниям (туберкулез, бруцеллез, сибирская язва, эмкар, лептоспироз), однако в этих хозяйствах регистрировали эндометрит и мастит коров.
При бактериологическом исследовании 420 проб патологического материала (фекалии, кровь, паренхиматозные органы) от новорожденных телят из 18 животноводческих хозяйств наибольшее количество больных инфекционными энтеритами и бронхопневмониями животных (42,5%) выявлено в хозяйствах РРП, наименьшее (25,0%) – Хатлонской области (табл. 1).
Таблица 1
Результаты бактериологического исследования
патологического материала от новорожденных телят (2006 – 2009 гг.)
| Кол-во | ||||
| хозяйств | Проб | |||
| всего | неблагополучных | всего | положительных | |
| РРП | 8 | 8 | 310 | 132 (42,5) |
| Согдийская область | 4 | 2 | 32 | 10 (31,0) |
| Хатлонская область | 6 | 5 | 78 | 19 (25,0) |
| ИТОГО | 18 | 15 | 420 | 127 (39,2) |
Примечание. В скобках указано процентное значение.
Моновозбудители выделены в 76,3% (97), ассоциации патогенов – 23,7% (30) случаев. В 59,8% (76) случаев возбудителем инфекционного энтерита была E. coli, в 10,2 (13) – Pr. vulgaris, 6,3 (8) – S. dublin (рис. 1), 14,2 (18) – ассоциации E. coli и Pr. vulgaris, 5,5 (7) – ассоциации E. coli и S. dublin, 4,0% (5) – ассоциации E. coli, S. dublin и Pr. vulgaris (рис. 2).
Таким образом, установлено, что основными возбудителями широко распространенных в хозяйствах РТ желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка КРС являются E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida как в отдельности, так и в ассоциации, что обусловливает актуальность разработки новых противобактериальных лекарственных средств и рациональных способов их применения.
3.1.2. Клинико-гематологические и биохимические показатели
у телят при пневмоэнтеритах
Для опытов использовали 120 телят черно-пестрой породы, разделенных на группы в зависимости от проявления и выраженности болезни.
Новорожденные телята первой группы (40 гол.) были с явно выраженными симптомами диареи и пневмонии, которая начиналась на 1 – 2 сутки после рождения, сопровождалась повышенной температурой в начале развития болезни, профузным поносом, кашлем. У животных резко снижалась масса тела, отмечалась дегидратация, учащения дыхания. В крови на 4 – 5 сутки увеличивалось количество ферментных элементов, концентрация гемоглабина, содержание общего белка и глюкозы на 20,6 и 16,2%, на 3,6, 10,5 и 18,4% (Р<0,05) соответственно (табл. 2).
У некоторых животных на 4 – 7 сутки развивался цианоз слизистых оболочек, происходило снижение температуры тела, ослабление пульса, частоты дыхания; 8 телят в группе пало. Нарушение энзематических и абсорбционных процессов в желудочно-кишечном тракте сопровождалось снижением концентрации глюкозы.
Таблица 2
Гематологические показатели у телят (1 группа, n=10)
с выраженными пневмоэнтеритами
| Сроки наблюдения, сут | |||
| 1 – 2 | 4 – 5 | 10 – 15 | |
| Эритроциты, 1012/л | 8,8±0,6 | 10,6±0,9 | 5,4±0,3 |
| Лейкоциты, 109/л | 11,7±0,9 | 13,6±1,1 | 9,3±0,5 |
| Гемоглобин, г/л | 137±8,7 | 142±9 | 106±7 |
| Глюкоза, г/л | 5,7±0,3 | 6,3±0,4 | 6,0±0,3 |
| Общий белок, г/л | 92±6 | 109±6 | 84±3 |
При патологоанатомическом вскрытии телят отмечен катаральный, катарально-гемморагический гастроэнтерит, пневмонии, неравномерное окрашивание печени, незначительная реакция со стороны лимфатических узлов, дегидратация.
При лабораторном исследовании шести павших телят и двух вынуждено убитых в первой группе выделены энтеротоксичные серотипы E. coli, продуцирующие адгезивные антигены К99, А20 и К88, S. dublin и P.multocida. У двух вынуждено убитых телят были выделены возбудители ринотрахеита.
У телят второй группы, признаки пневмоэнтеритов начинались также как и у животных первой группы на 1 – 2 сут после рождения. Однако интенсивность их была значительно менее выражена. Пневмоэнтериты не сопровождались повышением температуры тела, недостоверно изменялись частота пульса и дыхания. Количество гемоглобина, лейкоцитов и эритроцитов у телят этой группы, увеличивалось не так значительно как в первой группе (табл. 3).
Таблица 3
Клинико-гематологические показатели у телят второй группы (n=10)
| Сроки наблюдения, сут | |||
| 1 – 2 | 4 – 5 | 10 – 15 | |
| Эритроциты, 1012/л | 7,2±0,6 | 8,3±0,7 | 6,5±0,2 |
| Лейкоциты, 109/л | 8,0±0,9 | 8,9±0,9 | 7,3±0,4 |
| Гемоглобин, г/л | 113±11 | 128±9 | 111±7 |
| Глюкоза, г/л | 6,0±0,3 | 7,0±0,5 | 6,0±0,5 |
| Общий белок г/л | 58±4 | 69±6 | 60±6 |
| Среднесуточный прирост массы, г | 108,0±6,9 | 100,0 ±10,0 | 150,0±11,1 |
Так, на 4 – 5 сутки наблюдения содержание гемоглобина было на 13,74, лейкоцитов на 10,11, эритроцитов на 15,28% выше предыдущего срока наблюдения. На 10 – 12 сутки количество эритроцитов и гемоглобина уменьшилось на 27,69 и 13,28% соответственно, лейкоцитов – на 21,92%.
Содержание общего белка и глюкозы у телят увеличивалось на 5 сутки на 18,96 и 16,66%, на 12 сутки уменьшилось – на 13,04 и 14,29% соответственно. Признаки дегидратации у телят этой группы проявлялись слабо; животные все выжили.
При вскрытии убитых (2 гол.) с диагностической целью животных отмечены катаральный и слизисто-катаральный гастроэнтериты; печень неравномерно окрашена.
Возбудители колибактериоза, сальмонеллеза, пастереллеза, вирусных инфекций не выявлены.
У телят третьей группы признаки диареи возникали на 10 сутки после рождения, профузного поноса не отмечалось, однако признаки диареи сохранялись в продолжение 15 – 20 сут временами они усиливались. Животные теряли в весе, среднесуточный прирост массы не превышал 40,0 – 45,0 г.
У телят третьей группы, переведенных в группу откорма, был отмечен профузный понос, животных изолировали, у 3-х павших из внутренних органов, а также из фекалий остальных выделяли сальмонеллы. Были проведены специальные ветеринарно-санитарные мероприятия, принятые при сальмонеллезе.
До начала наших исследований при возникновении диареи у новорожденных телят и откормочников для лечения использовали антибиотики и химиотерапевтические препараты. Положительного эффекта в виде радикального улучшения состояния животных после применения указанных лекарственных средств, использования существующей схемы борьбы с диареей достичь не всегда удавалась – ежедневный прирост массы тела в откормочных поголовьях не достигал 30,0 – 60,0 г, сохранность животных была неудовлетворительной, почти 100% новорожденных телят переболевало в различной степени тяжести заболеваниями желудочно-кишечного тракта и респираторной системы.
3.1.3. Определение чувствительности выделенных культур
к антибактериальным препаратам
Одним из основных положений при выборе антибиотиков является чувствительность выделенных микроорганизмов к определенному препарату. Бесконтрольное применение антибиотиков маскирует развитие действительной инфекции, изменяет резидентную микрофлору, способствует развитию других, не свойственных организму микробов с большими болезнетворными возможностями, значительно увеличивает вероятность возникновения устойчивых микроорганизмов (Славко Нейчив, 1977).
Антибиотики создают селективный фон для отбора и распространения устойчивых к ним штаммов микроорганизмов и способствуют механизму генетической передачи факторов резистентности.
Чувствительность выделенных культур микроорганизмов к антибиотикам определяли, используя чистую культуру возбудителя. При выделении двух и более видов микробов, чувствительность к антибиотикам определяли у каждого микроорганизма в отдельности.
Для определения чувствительности к 10 антибиотикам применяли метод диффузии в агар. Для этого использовали суточную бульонную культуру или смывы физиологическим раствором с суточной агаровой культуры. Концентрация микробных клеток составляла 109/мл. Антибиотик из диска дифундирует в агар, вызывая гибель чувствительных бактерий, формируя вокруг диска зону отсутствия роста. Диаметр зоны отсутствия роста микроорганизмов измеряли с помощью линейки с точностью до 1 мм. Зона задержки роста до 14 мм говорит о малой чувствительности к антибиотику, от 15 до 25 мм – о достаточной чувствительности, свыше 25 мм – о высокой чувствительности.
В нашем исследовании применяли диски со следующими антибиотиками: пенициллины – амоксиклав, бициллин 5, левомицетин, тетрациклин, макролиды – азитромицин, лидекамицин, цефотаксим, эритромицин, гентамицин; нитрофуран – фуразидин.
Анализ результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам показал, что наибольшую активность по отношению к микроорганизмам, выделенным из желудочно-кишеного тракта (эшерихиям, сальмонеллам и протеям) и респираторной системы (пастереллам) проявляли левомицитин, цефотаксим, гентамицин, тетрациклин.
Высокий процент резистентных штаммов вышеперечисленных микроорганизмов отмечали к макролидным антибиотикам – эритромицину, лидекамицину, азитромицину.
Таким образом, изучение тенденций в изменении микробного «пейзажа» желудочно-кишечного тракта и респираторной системы у телят с бактериальным воспалением, а также чувствительности выделенной микрофлоры к антибактериальным веществам, позволяет обогатить существующие представления о роли нормальной, патогенной, условно-патогенной микрофлоры и их ассоциаций в патогенезе инфекционных энтеритов и респираторных болезней молодняка КРС, расширить возможности применение химиотерапевтических и биологических препаратов для лечение и профилактики этих болезней.
3.2. Комбинированный противомикробный препарат ДС-1100
Терапия желудочно-кишечных и респираторных болезней, вызываемых у телят патогенной микрофлорой, с использованием ранее предложенных лекарственных средств не всегда достаточно эффективна, а переход болезни в хроническую форму обусловливает преждевременную выбраковку большого количества животных в наиболее продуктивном возрасте и экономический ущерб вследствие недополучения значительного количества животноводческой продукции.
Не создано ни одного лекарственного средства, к которому у бактерий не возникает устойчивости. Кроме того, синтез новых оригинальных соединений – длительный и дорогостоящий процесс. Комбинированная химиотерапия рассчитана на максимально возможный охват потенциальных возбудителей болезни (каждый компонент активен в отношении определенного представителя микробной ассоциации). Достигать бактерицидного эффекта при инфекционном процессе, когда защитные силы организма ослаблены и не могут самостоятельно справиться с микроорганизмами, позволяет использование явления синергизма.
Одновременное применение нескольких препаратов уменьшает курсовую дозу каждого компонента, входящего в комплекс, снижает вероятность побочных реакций, сокращает длительность болезни, способствует более быстрому развитию репаративных процессов, резко снижает трудозатраты при проведении терапии.
Нами создан комплексный антибактериальный препарат ДС-1100, в состав которого входят антимикробные вещества (окситетрациклина гидрохлорид, сульфадимезин, левомицетин), аскорбиновая кислота, новокаин, пектин, силикат алюминия с примесью силикатов магния и кальция.
С целью изыскания наилучшего соотношения компонентов изготовили 3 серии препарата, масс.%:
1. Окситетрациклина гидрохлорид – 5,5; сульфадимезин – 3,0; левомицетин – 3,5; аскорбиновая кислота – 0,08; новокаин – 0,4; пектин – 15,0; силикат алюминия с примесью силикатов магния и кальция – остальное.
2. Окситетрациклина гидрохлорид – 6,0; сульфадимезин – 3,5; левомицетин – 4,0; аскорбиновая кислота – 0,09; новокаин – 0,45; пектин – 18,0; силикат алюминия с примесью силикатов магния и кальция – остальное.
3. Окситетрациклина гидрохлорид – 6,0; сульфадимезин – 4,0; левомицетин – 4,5; аскорбиновая кислота – 0,1; новокаин – 0,5; пектин – 20,0; силикат алюминия с примесью силикатов магния и кальция – остальное.
3.2.1. Антибактериальная активность
Противобактериальную активность ДС-1100 в сравнительном аспекте (контроль – левотетрасульфин) изучили в опытах in vitro в отношении музейных штаммов и изолятов (патогенных) микроорганизмов (E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida), типичных по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим и серологическим свойтвам для этой цели использовали односуточные культуры микроорганизмов в количестве 1108 м.к./мл.
Изучение противомикробной активности ДС-1100 проводили методом серийных разведений в жидкой питательной среде. Из основного раствора готовили последовательные двукратные разведения в МПБ в объеме 2 мл. Посевы инкубировали при 37оС в течение 24 – 48 ч. По истечении срока инкубации учитывали результат. Минимальной бактериостатической считали концентрацию, которая вызывала задержку роста культуры по сравнению с контролем. Для изучения бактерицидного действия препарата делали высевы из пробирок с прозрачной средой на плотные питательные среды. Минимальной бактерицидной считали концентрацию, при которой отмечали полное угнетение роста тест-культур при пересеве их на МПА, не содержащий препарата. Результаты проведенных исследований представлены в таблице 4.
Таблица 4
Антибактериальная активность ДС-1100
в сравнении с Левотетрасульфином, мкг/мл
| Препарат | Тест-культура | ||||
| E. coli | S. dublin | Pr. vulgaris | P. multocida | ||
| ДС-1100 | МБсК | 0,23 | 0,47 | 0,47 | 0,23 |
| МБцК | 0,47 | 0,94 | 0,94 | 0,47 | |
| Левотетрасульфин | МБсК | 0,94 | 0,94 | 0,94 | 0,94 |
| МБцК | 1,87 | 1,87 | 1,87 | 1,87 | |
Установлено, что ДС-1100 оказывает бактериостатическое и бактерицидное действия в отношении исследованных тест-культур. Наибольшую чувствительность к ДС-1100 проявляют E. coli и P. multocida (МБсК – 0,23 мкг/мл). В отношении S. dublin и Pr. vulgaris МБсК ДС-1100 составила 0,47 мкг/мл. МБсК левотетрасульфина для E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida– 0,94 мкг/мл (рис. 3).
ДС-1100 вызывает гибель исследованных тест-культур в концентрациях 0,47 – 0,94, левотетрасульфин – 1,87 мкг/мл (рис. 4).
Таким образом, установлено, что ДС-1100 обладает высокой антимикробной активностью, превышающей таковую у левотетрасульфина.
3.2.2. Токсикологические свойства
Безвредность ДС-1100 изучали на белых мышах (массой 18 – 20 г, n=10), кроликах породы шиншилла (массой 2,5 – 2,7 кг, n=5) и новорожденных телятах черно-пестрой породы (массой 33 – 35 кг, n=5). Опытным животным препарат вводили в ориентировочно-терапевтической дозе (0,5 г/кг массы тела) с водой перорально в объемах соответственно 0,2; 10 и 100 мл 2 раза в сутки в течение 7 дней.
О безвредности ориентировочно-терапевтической дозы ДС-1100 свидетельствуют результаты наблюдения за животными в течение 14 дней: не было ни одного случая падежа животных.
Острую токсичность ДС-1100 изучали на белых мышах (массой 18 – 20 г, n=10) и 14-дневных телятах черно-пестрой породы (массой 33 – 35 кг), из которых по принципу парных аналогов сформировали по 11 групп. Белым мышам ДС-1100 в виде суспензии на физиологическом растворе вводили однократно перорально в объеме 0,5 мл в дозах 0,25 г/кг массы тела (1-я группа), 0,5 (2-я), 0,75 (3-я), 1,0 (4-я), 1,25 (5-я), 1,5 (6-я), 1,75 (7-я), 2,0 (8-я), 2,25 (9-я), 2,5 г/кг массы тела (10-я); телятам – в объеме 100 мл в тех же дозах. Контрольным животным в соответствующих объемах вводили физиологический раствор.
При наблюдении (14 дней) за лабораторными животными и телятами учитывали общее состояние, внешний вид, поведенческие реакции, прием пищи и воды, ритм и частоту сердцебиения, количество дыхательных движений.
Гибели опытных животных не наблюдали, клиническое состояние опытных и контрольных животных не отличалось, патологоанатомические изменения острого отравления у животных отсутствовали.
Таким образом, по результатам токсикометрических исследований ДС-1100 отнесен к малотоксичным препаратам.
Опыты по изучению хронической токсичности ДС-1100 проводили в течение 20 суток на трех группах (n=10) белых мышей (массой 18 – 20 г) и трех группах (n=10) кроликов породы шиншилла (массой 2,5 – 2,7 кг), которым препарат вводили в 2-, 5- и 10-кратной ориентировочно-терапевтической дозе (0,5 г/кг массы тела). Животные контрольных групп препарат не получали. За лабораторными животными наблюдали в течение 30 дней.
Не установлено отрицательного влияния разных доз ДС-1100 (1,0; 2,5 и 5 г/кг массы тела). Поведение, аппетит, прием воды, состояние слизистых оболочек и шерстного покрова подопытных и контрольных животных не отличались.
Определено, что у опытных и контрольных животных динамика массы тела статистически не отличалась. При применении препарата не отмечали повышения температуры тела различий в характере локомоторной активности, стереотипном поведении и выносливости животных.
Методом однократной аппликации 10% суспензии на кожу мышей (массой 18 – 20 г) изучали влияние ДС-1100 на кожу и слизистые оболочки.
На белых мышах (самках, массой 18 – 20 г, n=8) и кроликах (самках, массой 2,5 – 2,7 кг, n=8), которым ежедневно на выстриженный участок кожи в межлопаточной области наносили соответственно по 1 и 2 капли 10% суспензии ДС-1100 в течение 14 и 21 дня исследовали повторное местное раздражающее действия препарата. Животным контрольных групп (n=8) по той же методике наносили подсолнечное масло. Наблюдение за белыми мышами вели в течение 30, кроликами – 60 дней.
В результате проведенных экспериментов установлено, что ДС-1100 не вызывает даже незначительных явлений гиперемии, отека, расчесов на месте аппликации. У животных не выявлено признаков токсикоза при накожной аппликации препарата.
Таким образом, у ДС-1100 не выявлено кожно-раздражающего и кожно-резорбтивного действия.
Действие ДС-1100 на слизистую оболочку глаза изучали на кроликах (самках, массой 2,5 – 2,7 кг), которых разделили на две группы (n=8).
Установлено, что местное раздражающее действие ДС-1100 на слизистые глаз при однократном введении выражено слабо.
3.2.3. Технология изготовления
Основные технологические стадии изготовления ДС-1100 в форме порошка:
1. Взвешивание компонентов.
2. Смешивание.
3. Упаковка и хранение.
4. Контроль серии.
Основные технологические стадии изготовления ДС-1100 в форме гранул:
1. Взвешивание компонентов.
2. Измельчение.
3. Увлажнение.
4. Гранулирование.
5. Упаковка и хранение.
6. Контроль серии.
Основные технологические стадии изготовления ДС-1100 в форме таблеток:
1. Взвешивание компонентов.
2. Измельчение.
3. Увлажнение.
4. Гранулирование.
5. Обработка скользящим веществом.
6. Высушивание.
7. Обработка гранул смазывающим веществом.
8. Таблетирование.
9. Сортировка таблеток.
10. Упаковка и хранение.
11. Контроль серии.
На основании полученных результатов разработаны инструкция по изготовлению и методы контроля, технические условия препарата ДС-1100.
3.2.4. Стандартизация и контроль качества
Результаты исследования 3 экспериментальных серий ДС-1100 в форме порошка, гранул и таблеток показали хорошую воспроизводимость и точность разработанных качественных и количественных методов контроля препарата, что обеспечивает оптимальный уровень качества стандартизируемого объекта в процессе его производства, хранения и применения.
Качество ДС-1100 характеризуется следующими физико-химическими и биологическими показателями:
1. Внешний вид и цвет – порошок (гранулы, таблетки) серовато-белого цвета.
2. Размер гранул – 0,2 – 0,3 мм.
3. Диаметр таблеток – 16,0±0,5 мм.
4. Масса таблеток – 2,0±0,1 г.
5. Время распадаемости таблеток – 30 мин.
6. Концентрация водородных ионов (рН) 10% водной суспензии – 5,0 – 6,0.
7. Массовая доля влаги – 3,0 – 6,0
8. Подлинность окситетрациклина гидрохлорида – выдерживает испытание.
9. Подлинность левомицетина – выдерживает испытание.
10. Подлинность сульфадимезина – выдерживает испытание.
12. Массовая доля окситетрациклина гидрохлорида – 55 – 60 мг/г.
13. Массовая доля левомицетина – 35 – 40 мг/г.
14. Массовая доля сульфадимезина – 30 – 40 мг/г.
16. Контаминация бактериальной и грибной микрофлорой – отсутствует.
17. Контаминация микоплазмами – отсутствует.
18. Антимикробная активность – 0,23 – 0,94 мкг/мл.
19. Токсичность в 10-кратной терапевтической дозе – нетоксичен.
Требования к качеству ДС-1100, предложенные на основании проведенных исследований, вошли в инструкцию по изготовлению и контролю и технические условия на препарат.
3.2.5. Стабильность
Физико-химические и биологические свойства препарата при естественном хранении оставались стабильными в течение 3 лет. При определении количественного содержания окситетрациклина гидрохлорида, левомицетина, сульфадимезина в ДС-1100 достоверных расхождений в полученных результатах не отмечалось (p0,05).
На основании проведенных исследований установлен срок хранения ДС-1100 по списку Б, в сухом, хорошо проветриваемом, защищенном от света и атмосферных осадков месте, при температуре не выше 30оС – 2 года.
3.2.6. Влияние ДС-1100 на качество мяса
Ветеринарно-санитарная экспертиза и бактериологические исследования свидетельствуют о доброкачественности мяса, полученного после убоя кроликов, обработанных ДС-1100.
Мясо кроликов после 5-кратной дачи препарата один раз в сутки не отличалось по качеству от мяса контрольных (интактных) животных, на разрезе мышечная ткань красноватого цвета, поверхность разреза влажная, эластичная, плотная; бульон прозрачный без посторонних запахов.
При бактериологическом исследованиями проб мяса и внутренних органов не обнаружено их обсемененности микроорганизмами из групп токсикоинфекций. Мазки-отпечатки из проб мяса контрольных и опытных животных окрашивались плохо.
В препаратах из поверхностных слоев обнаруживались отдельные колонии (по 1 – 3 в поле зрения микроскопа) кокковой микрофлоры. Микрофлора не выделялась в препаратах из глубоких слоев мышц.
3.2.7. Профилактическая эффективность
Своевременное применение комплексных антибиотиков для профилактики желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных позволяет эффективно предотвращать инфицирование новорожденных телят патогенными агентами.
Профилактическую эффективность ДС-1100 при инфекционных пневмоэнтеритах телят (колибактериоз, сальмонеллез, пастереллез и протейоз) исследовали в сравнительном аспекте (контроль – левотетрасульфин) в неблагополучных хозяйствах РРП и Хатлонской области Таджикистана.
Экспериментальное изучение эффективности препарата в разных формах проводили на 42 телятах черно-пестрой породы двух молочно-товарных ферм неблагополучных по инфекционным пневмоэнтеритам хозяйств РРП.
По принципу аналогов животных разделили на 2 группы (n=21). Телятам опытной группы с молоком выпаивали ДС-1100 в дозе 0,2 – 0,3 г/кг массы тела один раз в сутки в течение 6 дней. В контрольной группе применяли левотетрасульфин в соответствии с наставлением по применению препарата. За животными вели клиническое наблюдение в течение 30 дней, учитывая заболеваемость и сохранность.
Применение ДС-1100 не оказывает отрицательного влияния на физиологические показатели новорожденных телят и предупреждает их заражение патогенными бактериями в 96,0% случаев, тогда как профилактическая эффективность левотетрасульфина составляет 91,0%.
Производственные испытания ДС-1100 провели в 6 хозяйствах РРП и Хатлонской области РТ на 186 телятах черно-пестрой породы. Телятам опытной группы (n=100) с первого дня жизни ДС-1100 выпаивали с водой в дозе 0,2 – 0,3 г/кг массы тела один раз в сутки в течение 6 дней, в контрольной группе (n=86) применяли левотетрасульфин. За животными вели клиническое наблюдение в течение 30 дней, учитывая скорость роста, заболеваемость и сохранность.
Таблица 5
Профилактическая эффективность ДС-1100
в производственных условиях
| Показатель | Группа | |
| опытная | контрольная | |
| Кол-во телят, гол. | 100 | 86 |
| Заболело, гол. | 3 (3,0) | 10 (8,6) |
| Пало, гол. | 0 | 1 (1,2) |
| Стоимость 1 дозы препарата, сомони | 0,36 | 0,45 |
| Затраты на профилактику, сомони | 144,0 | 185,0 |
Примечание. В скобках указано процентное значение.
В опытной группе на 3 – 6 дни с клиникой диареи заболели 3 теленка, случаи падежа не отмечали в течение 14 дней, в контрольной – с клиникой диареи на 2 – 7 дни жизни заболели 10 телят, один из которых пал.
Таким образом, профилактическая и экономическая эффективность ДС-1100 выше соответствующих показателей применяемого в хозяйствах Таджикистана комплексного препарата левотетрасульфин.
3.2.8. Терапевтическая эффективность
Экспериментальное изучение лечебной эффективности ДС-1100 проведено в сравнении с левотетрасульфином на четырех группах телят (в возрасте 1 – 6 суток) с клиникой диареи. Животным первой группы (n=15) два раза в сутки до выздоровления в дозе 0,5 г/кг массы тела внутрь вводили ДС-1100 1-й, второй (n=20) – 2-й, третьей (n=20) – 3-й серии. Телят контрольной группы лечили левотетрасульфином в соответствии с наставлением по применению препарата.
За подопытными животными вели клиническое наблюдение, учитывая длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы тела.
До применения препаратов у подопытных телят отмечали угнетение общего состояния, анорексию, учащение пульса и увеличение интенсивности дыхания. Животные слабо реагировали на внешние раздражители, были малоподвижными, больше лежали. В первые сутки заболевания наблюдали выделение жидких каловых масс с примесью хлопьев казеина, на 2 – 3 сутки – профузный понос с примесью крови и пузырьков газа. При бактериологическом исследовании выделены моно- и ассоциированные патогенные возбудители – E. coli, P. multocida, S. dublin и Pr. vulgaris.
У телят первой опытной группы функции органов пищеварения нормализовались на 4,3, второй и третьей – 4, контрольной – 5,8 дня. Терапевтическая эффективность 1-й серии ДС-1100 составила 93,3%, 2 и 3-й серий – 100, левотетрасульфина – 86,6%.
С целью определения оптимальной лечебной дозы 5 группам (n=10) телят с клиникой диареи внутрь вводили ДС-1100 (2-я серия) в дозах 0,2; 0,25; 0,3; 0,4 и 0,5 г/кг массы тела 2 раза в сутки до выздоровления. Для терапии телят контрольной группы (n=10) использовали левотетрасульфин в соответствии с наставлением по применению препарата.
За подопытными животными вели клиническое наблюдение, учитывая длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы тела.
Установлено, что лечебная эффективность ДС-1100 в дозах 0,2; 0,25 и 0,3 г/кг массы тела составила 90,0%, в дозах 0,4 и 0,5 г/кг массы тела – соответственно 96,0 и 100%, против 80,0% при использовании левотетрасульфина.
Производственные испытания ДС-1100 провели в 10 хозяйствах РТ на 224 больных диареей телятах, которым ДС-1100 выпаивали с водой в дозе 0,3 – 0,5 г/кг массы тела 2 раза в сутки до выздоровления.
За подопытными животными вели клиническое наблюдение: учитывали длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы тела.
Применение ДС-1100 способствовало улучшению общего состояния животных, повышению аппетита, нормализации температуры тела. Более высокий терапевтический эффект отмечен в группе телят, получавших ДС-1100.
Результаты проведенных исследований свидетельствуют о высокой лечебной эффективности ДС-1100 при инфекционных пневмоэнтеритах телят. Установлено, что пероральное применение препарата в дозе 0,3 – 0,5 г/кг массы тела 2 раза в сутки до выздоровления в комплексе с ветеринарно-санитарными мероприятиями обеспечивает сохранность 96,6% больных телят.
В расчете на 1 сомони затрат экономическая эффективность ДС-1100 при лечении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят составила 1,7 сомони, что больше в 2 раза, чем соответствующий показатель у левотетрасульфина.
При терапии желудочно-кишечных и респираторных болезней телят ДС-1100 по суммарному индексу в 2 раза эффективнее известного препарата левотетрасульфин.
Таким образом, ДС-1100 обладает высокой лечебно-профилактической и экономической эффективностью при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят.
3.2.9. Экономическая эффективность
при терапии и профилактике пневмоэнтеритов телят
При оценке эффективности лечебно-профилактических мероприятий учитывали экономический ущерб, затраты на проведение ветеринарных мероприятий, коэффициенты заболеваемости и смертности животных при отдельных болезнях, суммарный экономический эффект, экономическую эффективность ветеринарных мероприятий на единицу затрат и суммарный индекс. Увеличение показателя суммарного индекса свидетельствует о снижении экономической эффективности анализируемых способов терапии больных животных.
Расчет и анализ экономической эффективности применения ДС-1100 при желудочно-кишечных и респираторных болезнях проведен в хозяйствах благополучных, скомпрометированных и неблагополучных по инфекционным пневмоэнтеритам.
ДС-1100 превосходит препарат-аналог левотетрасульфин по затратам на лечение, предотвращенному экономическому ущербу и экономическому эффекту в сомони, полученному в результате терапии.
В расчете на 1 сомони затрат экономическая эффективность ДС-1100 при лечении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят составила 5,6 сомони, что больше в 4 раза, чем соответствующий показатель у левотетрасульфина.
При терапии желудочно-кишечных и респираторных болезней телят ДС-1100 по суммарному индексу в 2,6 раза эффективнее известного препарата левотетрасульфин.
Таким образом, ДС-1100 обладает высокой экономической эффективностью при лечении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят.
3.3. Применения пробиотиков
при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят
Для терапии и профилактики пневмоэнтеритов широко применяют антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны и другие химиопрепараты, бесконтрольное использование которых имеет вредные последствия: отрицательное влияние на формирование иммунитета и характер иммунологических реакций, нефротоксическое и гепатотоксическое действия, неблагоприятное влияние на нервную и кроветворную системы, аллергия и дисбактериозы, возникновение устойчивости микроорганизмов к этим лекарственным средствам.
В результате развивающегося дисбактериоза изменяются процессы кишечного микробного пищеварения, усиливается перистальтика, меняются консистенция химуса и значения рН кишечного содержимого, нарушается водно-солевой обмен. Обезвоживание тканей и интоксикация организма приводят к гибели животных.
Накопление антибиотикорезистентных бактерий в организме животных и окружающей среде снижает эффективность лечебных и профилактических мероприятий и приводит к тяжелым экологическим последствиям.
В настоящее время для профилактики и терапии желудочно-кишечных болезней и повышения продуктивности молодняка сельскохозяйственных животных широко применяют различные симбиотические микроорганизмы, среди которых наиболее перспективными признаны молочнокислые, пропионовокислые, бифидобактерии, Bacillus subtilis и др., проявляющие избирательную антагонистическую активность в отношении патогенной кишечной флоры, эффективно и быстро восстанавливающие микробиоценоз кишечника (Антипов В. А., 1991; Панин А. Н. и др., 1993, 1999; Паршин П. А. и др., 1997; Малик Н. И. и др., 2000, 2001 и др.).
Исходя из вышеизложенного, нами была изучена профилактическая эффективность пробиотика Субтилбен на основе местных штаммов B. subtilis при пневмоэнтеритах телят и исследованы физико-химических и биологических свойства этого препарата.
3.3.1. Эффективность Субтибена в форме порошка
при профилактике пневмоэнтеритов телят
В настоящее время с целью профилактики пневмоэнтеритов и повышения продуктивности молодняка сельскохозяйственных животных широко используют различные симбиотические микроорганизмы, среди которых наиболее перспективными признаны молочнокислые, пропионовокислые, бифидобактерии, B. subtilis и др.
Нами на основе штаммов B. subtilis был изготовлен препарат Субтилбен в форме порошка, лечебно-профилактическая эффективность, которого изучена в животноводческих хозяйствах РТ.
В экспериментальных условиях профилактическая эффективность Субтилбена исследована в сравнении с препаратом-аналогом (биоспорин) на 4 молочно-товарных фермах, стационарно неблагополучных по пневмоэнтериту.
Субтилбен телятам выпаивали с молозивом (молоком) в дозах 0,2 (1-я группа, n=20), 0,3 (2-я группа, n=20) и 0,5 г/кг массы тела (3-я группа, n=20) в течение 10 дней 1 раз в сутки; биоспорин (4-я группа, n=20) использовали в соответствии с наставлением по применению препарата.
В течение месяца за животными вели клиническое наблюдение, учитывая общее состояние, заболеваемость и сохранность.
Результаты клинических наблюдений свидетельствуют о высокой профилактической эффективности Субтилбена, выразившейся в предотвращении колибактериоза (2 и 3-я группы), полной сохранности и хорошем общем состоянии телят, увеличении пророста массы тела.
В опытной группе, телятам которой Субтилбен выпаивали в дозе 0,2 г/кг массы тела в течение 10 дней 1 раз в сутки, заболело 1 (5%) животное; в контрольной группе заболели 3 (15%), пал 1 теленок (5%). Профилактическая эффективность Субтилбена в экспериментальных условиях составила 95 – 100%, что по сравнению с препаратом-аналогом (биоспорин) на 10 – 15% выше. В опытных группах телят среднесуточный прирост живой массы был выше по сравнению с контрольной на 4,0 – 28,8%.
При производственном испытании Субтилбена на 356 телятах в 5 хозяйствах районов республиканского подчинения, Согдийской и Хатлонской областей РТ в 2003 – 2005 гг. профилактическая эффективность препарата составила 95,5 – 96,0%. Профилактические мероприятия, проводившиеся по схеме принятой в хозяйствах, предотвращали колибактериоз телят (198 гол.) на 87 – 89%.
Таблица 6
Профилактическая эффективность Субтилбена и биоспорина
| Показатель | Группа | |||
| 1 | 2 | 3 | 4 (контроль) | |
| Кол-во телят, гол. | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Средняя масса тела в начале опыта, кг | 31,2±1,7 | 32,1±1,2 | 31,5±2,1 | 31,9±1,6 |
| Заболело, гол. | 1 (5) | – | – | 3 (15) |
| Пало, гол. | – | – | – | 1 (5) |
| Среднесуточный прирост массы тела, г | 130 | 150 | 161 | 125 |
| Стоимость 1 дозы препарата, сомони | 0,26 | 0,32 | 0,41 | 0,50 |
| Затраты на профилактику, сомони | 52 | 64 | 82 | 100 |
Примечание. В скобках указано процентное значение.
Таким образом, установлена профилактическая эффективность Субтилбена, которая в экспериментальных условиях составляет 95,0, в производственных – 95,5 – 96,0%.
3.3.2. Лечебная эффективность Субтилбена
Изучение терапевтической эффективности Субтилбена при пневмоэнтеритах телят провели в 8 хозяйствах РРП, Согдийской и Хатлонской областей РТ.
Пневмоэнтериты диагностировали на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов бактериологических исследований.
При изучении клинического состояния у больных животных с острой формой заболевания желудочно-кишечного тракта и респираторной системы отмечали кратковременное повышение температуры тела в начале болезни до 40 – 40,5оС, снижение аппетита, вялость, малоподвижность. Пульс становился частым, нитевидным (частота пульса доходила до 140 уд/мин). Дыхание было поверхностным, брюшистого типа (32 – 49/мин). Наблюдались истечения из носовой полости и кашель с хрипом. При желудочно-кишечных инфекциях на 2 – 3 дни болезни появлялся профузный понос. Испражнения были бело-желтого цвета, часто пенистые, с непереваренными сгустками казеина, иногда с примесью крови. Спустя 12 ч после инфицирования у больных телят начиналось обезвоживание организма. Глазные яблоки западали в орбиты. Состояние животных было угнетенным, реакция на окружающее – сниженной.
При патологоанатомическом вскрытии павших телят на эпикарде и под эпикардом наблюдали точечные кровоизлияния. Ткань печени перерождена. Селезенка незначительно увеличена, под капсулой – точечные кровоизлияния. Преджелудки содержали смесь серовато-желтого цвета. На слизистой оболочке, покрытой слизью, местами имелись кровоизлияния. Слизистая оболочка кишечника набухшая, гиперемированная, с кровоизлияниями. Мезентеральные лимфатические узлы увеличены и гиперемированы.
При бактериологическом исследовании паренхиматозных органов павших и вынужденно убитых с диагностической целью телят выделены патогенные культуры E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida.
Для опыта подобрали 4 группы больных телят 4 – 7-дневного возраста. Животным 1-й группы (n=16) Субтилбен, растворенный в 300 мл воды, в дозе 0,2 г/кг, 2-й (n=16) – 0,3, 3-й (n=16) – 0,5 г/кг массы тела выпаивали дважды в сутки. Контрольную группу телят (n=16) лечили биоспорином в соответствии с наставлением по применению препарата.
За животными в течение 14 дней вели клиническое наблюдение, учитывая длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы и температуру тела.
Проведенными исследованиями установлено, что применение Субтилбена способствовало улучшению общего состояния животных, повышению аппетита, нормализации температуры тела. Более высокий лечебный эффект отмечен в группе телят, получавших Субтилбен (табл. 7).
Таблица 7
Лечебная эффективность Субтилбена при пневмоэнтеритах телят
в экспериментальных условиях
| Показатель | Субтилбен | Контроль | ||
| Группа | ||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | |
| Кол-во больных телят, гол. | 16 | 16 | 16 | 16 |
| Выздоровело, гол. | 12 | 14 | 14 | 12 |
| Пало, гол. | – | – | – | – |
| Кол-во телят с повторными заболеваниями, гол. | 2 | 1 | 1 | 3 |
| Продолжительность терапии, сутки | 5,0 | 4,0 | 4,0 | 6,2 |
| Среднесуточный прирост, г | 130 | 146 | 150 | 120 |
Установлено, что терапевтическая эффективность Субтилбена в дозе 0,2 г/кг массы тела – 75,0% (соответствует таковой у биоспорина), а в дозах 0,3 и 0,5 г/ кг массы тела – 87,5%.
Продолжительность лечения Субтилбеном в дозе 0,2 г/кг массы тела составила 5,2, в дозах 0,3 и 0,5 г/кг массы тела – 4,0, в контрольной группе (биоспорин) – 6,2 дня.
Прирост живой массы животных в опытных группах был на 8,3 – 25,0% выше, чем в контрольной.
При производственном испытании Субтилбена на 234 больных телятах 4-х неблагополучных по пневмоэнтеритам хозяйств районов республиканского подчинения РТ терапевтическая эффективность препарата в комплексе с организационно-хозяйственными и ветеринарно-санитарными мероприятиями составила 92,0%.
Таким образом, лечебная эффективность Субтилбена в экспериментальных условиях составляет 75,0 – 87,5, в производственных – 92,0%.
3.3.3. Влияние Субтилбен
на иммунологические показатели сыворотки крови телят
Изменение иммунологических показателей сыворотки крови телят при применении Субтилбена исследовали общепринятыми методами. Экспериментальные исследования проводили на МТФ им. Л. Муродова Гиссарского района, где по принципу аналогов сформировано 4 группы (n=11) новорожденных телят черно-пестрого породы (массой 31 – 33 кг).
Первая, вторая и третья группа – опытные и четвертая – контрольная. В опытных группах Субтилбен применяли из расчета 0,3; 0,6; 0,9 г/кг массы тела (условно-терапевтическая, двух- и трехкратная доза от условно-терапевтической) в течение 20 суток согласно схеме опыта.
За опытными телятами наблюдали во время опыта и в течение 14 дней после него, учитывая общее состояние, внешний вид, поведенческие реакции, прием пищи и воды, ритм и частоту сердцебиения, количество дыхательных движений.
Перед проведением опыта, а также на 1, 3, 5, 10, 15 и 20-й дни применения Субтилбена провели биохимические исследования крови, в результате которых установлено, что в течение всего экспериментального периода ни одна из применявшихся доз Субтилбена не оказала отрицательного действия на организм телят, которые были активны и не отстаивали по развитию и приросту живой массы от своих сверстников из контрольной группы (табл. 8).
Таблица 8
Результаты изучение переносимости телятами пробиотика Субтилбен
| Показатель | Группа | |||
| 1 | 2 | 3 | 4 (контроль) | |
| Кол-во телят, гол. | 11 | 11 | 11 | 11 |
| Средняя масса тела в начале опыта, кг | 31,2±1,7 | 32,1±1,2 | 31,5±2,1 | 31,9±1,6 |
| Заболело, гол. | – | – | – | – |
| Пало, гол. | – | – | – | – |
| Среднесуточный прирост массы тела, г | 150 | 161 | 161 | 125 |
Ни в контрольной, ни в опытных группах гибели животных не наблюдали. За изучаемый период среднесуточный прирост телят в опытных группах превышал контрольные показатели на 2,5 и 3,6%, что свидетельствует о безвредности пробиотикаСубтилбен.
При наблюдении за животными во время опыта и в течение 14 дней после него установлено, что применение пробиотика Субтилбен не влияет отрицательно на организм телят (табл. 9).
Таблица 9
Клинические показатели телят (опытная группа)
при применении Субтилбена
(средние по группе, Р>0,05)
| Температура тела, оС | Пульс, уд./мин | Дыхание, дв./мин | ||
| До введени | 39,2±0,2 | 186±5 | 27±3 | |
| Во время введения, день | 1 | 39,3±0,4 | 185±4 | 27±3 |
| 3 | 39,2±0,2 | 190±3 | 27±3 | |
| 5 | 38,9±0,5 | 190±5 | 26±2 | |
| 10 | 39,1±0,4 | 187±3 | 22±5 | |
| 15 | 39,2±0,2 | 188±4 | 25±4 | |
| В конце наблюдения | 39,1±0,5 | 189±3 | 28±5 | |
Применение Субтилбена не вызывало повышения температуры тела и не влияло на характер локомоторной активности, стереотипное поведение и выносливость животных.
Проведенные нами исследования показали, что пробиотик Субтилбен позитивно влияет на динамику количества лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина и уровень гематокрита (табл. 10).
Как видно из таблицы, гематологические показатели крови телят как опытной, так и контрольной групп колебались в пределах физиологической нормы. Повышение количества гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов, уровня гематокрита в крови телят опытной группы в пределах верхних границ физиологических норм может свидетельствовать о том, что препарат стимулирует эритропоэз и лейкопоэз, не изменяя стабильности кроветворения и постоянства в составе и общем количестве периферической крови.
Таблица 10
Гематологические показатели телят при применении Субтилбена
(средние по группе, Р>0,05)
| Показатель | Время исследования | |||||||
| До введения | Во время введения, день | В конце наблюдения | ||||||
| 1 | 3 | 5 | 10 | 15 | ||||
| Опытная группа | ||||||||
| Эритроциты, 11012/л | 6,5 | 6,8 | 7,0 | 7,1 | 7,5 | 7,7 | 7,6±01 | |
| Лейкоциты, 1109/л | 12,5±0,05 | 13,5±0,2 | 14,5±0,03 | 10±0,05 | 12±0,03 | 15±0,1 | 16±0,05 | |
| Гемоглобин, г% | 14,7 | 14,7 | 15,7 | 18,9 | 15,2 | 14,8 | 14,5 | |
| Лимфоциты, % | 55 | 56 | 56 | 68 | 58 | 56 | 58 | |
| Билирубин, ммол/л | 13 | 12,0 | 12,0 | 12,0 | 10,0 | 12,0 | 12,0 | |
| Общей белок, г/л | 65 | 58 | 65 | 55 | 65 | 60 | 60 | |
| Аминотрансфераза, ммоль (чл) | АаАТ | 0,50 | 0,50 | 0,55 | 0,50 | 0,60 | 0,60 | 0,55 |
| АсАТ | 0,41 | 0,55 | 0,56 | 0,55 | 0,66 | 0,66 | 0,61 | |
| Скорость оседания эритроцитов, мм/ч | 0,7мм/ч | 1мм/ч | 0,7мм/ч | 1мм/ч | 0,7мм/ч | 1мм/ч | 1мм/ч | |
| Контрольная группа | ||||||||
| Эритроциты, 11012/л | 7,5 | 7,5±02 | 6,5±02 | 7±01 | 7±011 | 6,8±02 | 7,0±01 | |
| Лейкоциты, 1 109/л | 6 | 6,5±0,2 | 6±0,03 | 5,5±0,1 | 6±0,03 | 6±0,1 | 6±0,05 | |
| Гемоглобин, г% | 8 | 8,5 | 8,4 | 8,9 | 8,0 | 8,5 | 8,5 | |
| Лимфоциты, % | 50 | 55 | 50 | 55 | 55 | 55 | 50 | |
| Билирубин, ммол/л | 20 | 18,0 | 20,0 | 20,0 | 17,0 | 18,5 | 20,3 | |
| Общей белок, г/л | 60 | 65 | 67 | 70 | 60 | 55 | 60 | |
| Аминотрансфераза, ммоль (чл) | АаАТ | 0,40 | 0,40 | 0,45 | 0,40 | 0,46 | 0,45 | 0,50 |
| АсАТ | 0,45 | 0,45 | 0,45 | 0,46 | 0,50 | 0,50 | 0,47 | |
| Скорость оседания эритроцитов,мм/ч | 0,70 | 0,70 | 1 | 0,70 | 0,70 | 1 | 0,70 | |
Из полученных данных видно, что применение пробиотика Субтилбен во всех изучаемых дозах не оказало существенного влияния на биохимические показатели крови телят всех групп. При воздействии препарата на организм животных все изучаемые показатели не претерпевали существенных изменений и не имели значительной разницы с контролем, что свидетельствует об отсутствии у него токсического действия на организм животных.
3.3.4. Экономическая эффективность Субтилбена
при терапии пневмоэнтеритов телят
Для оценки эффективности лечебно-профилактических мероприятий при болезнях животных предложена система экономических показателей, включающая экономический ущерб, затраты на проведение ветеринарных мероприятий, коэффициенты заболеваемости и смертности животных при отдельных болезнях, суммарный экономический эффект, экономическую эффективность ветеринарных мероприятий на единицу затрат и суммарный индекс. Увеличение показателя суммарного индекса свидетельствует о снижении экономической эффективности анализируемых способов терапии животных.
Нами проведены расчеты и анализ экономической эффективности применения Субтилбена при колибактериозе в хозяйствах стационарно неблагополучных по колибактериозу.
Установлено, что Субтилбен превосходит препарат-аналог (биоспорин) по затратам на лечение, экономическому ущербу, предотвращенному экономическому ущербу и экономическому эффекту в сомони, полученному в результате терапии.
Экономическая эффективность Субтилбена в расчете на 1 сомони затрат при лечении колибактериоза телят составила 8,0 сомони, что больше в 2 раза, чем соответствующий показатель биоспорина.
Определение суммарного индекса показало, что при терапии пневмоэнтеритов телят Субтилбен эффективнее препарата-аналога в 4 раза.
Таким образом, Субтилбен обладает высокой экономической эффективностью при лечении пневмоэнтеритов телят.
ВЫВОДЫ
1. Установлена роль патогенных микроорганизмов в возникновении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят. При бактериологическом исследовании были идентифицированы E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida. Из 15 обследованных хозяйств желудочно-кишечные и респираторные болезни, обусловленные этими патогенными возбудителями, выявлены в 15 (83,3%).
2. Заболеваемость телят пневмоэнтеритами на молочно-товарных фермах РТ достигает 33,8%. Патогенные микроорганизмы выделены как в отдельности (7,2 – 33,8% случаев), так и в сочетании (6,0 – 13,4% случаев).
3. Разработанный комплексный препарат ДС-1100 на основе антимикробных, обезболивающего, витаминного и адсорбирующих веществ обладает высоким противобактериальным действием. Препарат проявляет бактериостатическую и бактерицидную активность в отношении E. coli, S. dublin, Pr. vulgaris и P. multocida в концентрациях 0,23 – 0,94 мкг/мл.
4. Установлено, что препарат ДС-1100 относится к категории малотоксичных препаратов, не оказывает местного раздражающего и аллергенного действий.
5. Отработаны технология производства и методы контроля препарата ДС-1100 в условиях Таджикистана с использованием преимущественно местного сырья.
6. Изучена стабильность физико-химических и биологических свойств препарата ДС-1100 при естественном хранении в течение 2 лет.
7. Профилактическая эффективность препарата ДС-1100 при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят в дозе 0,2 – 0,3 г/кг массы тела 1 раз в сутки в течение 7 дней составляет 96%.
8. Наилучший терапевтический эффект достигается при пероральном введении препарата ДС-1100 больным пневмоэнтеритами телятам в дозе 0,2 – 0,5 г/кг массы тела 2 раза в сутки до выздоровления.
9. Разработан иммунологический препарат Субтилбен в форме порошка на основе штаммов B. subtilis и установлена его эффективность при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят.
10. Установлено, что пробиотик на основе B. subtilis не оказывает отрицательного влияния на иммунологические показатели сыворотки крови телят.
11. Пероральное применение пробиотика Субтилбен 2 раза в день в течение 7 дней значительно снижает обсемененность кишечника патогенными возбудителями, предохраняет телят от пневмоэнтеритов.
12. Среднесуточный прирост живой массы телят, получавших пробиотик Субтилбен был выше на 150 г по сравнение с контрольными. Препарат способствует повышению аппетита, перевариваемости корма.
13. Экономический эффект от применение препаратов ДС-1100 и иммунобиотика Субтилбен при болезнях телят составляет 5,6 и 8 сомони на один сомони затрат, что в 4 раза выше, чем при использований аналогичных, известных препаратов.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Инструкция по изготовлению и контролю препарата ДС-1100 (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
2. Технические условия на препарат ДС-1100 (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
3. Наставление по применению препарата ДС-1100 для профилактики и лечения бактериозов животных и птиц (утв. ГУВ МСХ РТ 23.09.2005 г.).
4. Хасанов Н.Р. Рекомендации об инфекционных болезнях животных и мерах борьбы с ними (на тадж. яз.) / Хасанов Н.Р., Сахимов М.Р.; Национальный центр сельскохозяйственного обучения. – Душанбе, 2006. – 15 с.
5. Дастур оид ба гузаронидани чорабинињои пешгирї ва барњамдињии сирояти ротавирусии гўсолањо // Ќонунгузории ветеринарї. – Душанбе, 2009. – Љилди 3. – С. 107.
6. Инструкция о мероприятиях по борьбе с сальмонеллезом новорожденных животных «// Ветеринарное законодательство. – Душанбе, 2009. – Т. 3. – С. 711.
7. Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации колибактериоза новорожденных животных // Ветеринарное законодательство. – Душанбе, 2009. – Т. 3. – С. 705.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Сатторов Н.Р. Рациональный способ сушки иммунобиотика Субтилбен на минеральных и раcтительных адсорбентах / Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов // Матер. науч.-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию независимости РТ, 2700-летию г. Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода. – Душанбе 2006. – С. 40 – 41.
2. Хасанов Н.Р. Антимикробная активность препарата шодмон / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Н. Сатторов // Кишоварз. – Душанбе, 2006. – №4. – С. 31
3. Хасанов Н.Р. Диагностика, профилактика и терапия пневмоэнтеритов телят / Н.Р. Хасанов // Матер. науч.о-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию РТ, 2700-летию Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода Душанбе, 2006. – С. 18 – 19.
4. Хасанов Н.Р. Изучение стабильности Субтилбена / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, З.С. Каландаров, Д.А. Бобоев // Кишоварз. – Душанбе, 2006. – №3. – С. 16 –17.
5. Хасанов Н.Р. Иммунобиотик Субтилбен для лечения и профилактики болезней растений и животных/ Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Х.Д. Джуманкулов // Междунар. науч. конф., 2006. – С. 18 – 20.
6. Хасанов Н.Р. Использование микробных продуктов для защиты растений и животных от болезней / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Х.Д. Джуманкулов // Докл. ТАСХН. – Душанбе, 2006. – № 9 – 10. – С. 56.
7. Хасанов Н.Р. Истифодаи бентонити Точикистон дар тайёр намудани дорухои тибби ветеринарии // Матер. науч.о-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию РТ, 2700-летию Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода Душанбе, 2006. – С. 36 – 37.
8. Хасанов Н.Р. Подбор штаммов B. subtilis для изготовления пробиотиков / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, З.С. Каландаров, Н. Сатторов, А. Сафаралиев Кишоварз. – Душанбе, 2006. – №4. – С. 29 – 31.
9. Хасанов Н.Р. Способ получения иммунобиотика Субтилбен для защиты растений и животных от болезней / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Х.Д. Джуманкулов, М.Х. Султонова // Кишоварз / ТАУ. – Душанбе, 2006. С. 7 –9.
10. Хасанов Н.Р. Токсичность комплексного антибиотика шодмон / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, З.С. Каландаров, Н. Сатторов // Кишоварз. – Душанбе, 2006. – №3. – С. 15.
11. Хасанов Н.Р. Усули бо эътимоди пешгирии колибактериози гусолахои навзод / Н.Р. Хасанов, Н.Р. Сатторов // Матер. науч.-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию независимости РТ, 2700-летию г. Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода. – Душанбе 2006. – С. 36 – 37.
12. Хасанов Н.Р.Усули самарабахши парвариши B.subtilis / Н.Р. Хасанов, Н.Р. Сатторов // Матер. науч.-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию независимости РТ, 2700-летию г. Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода. – Душанбе 2006. – С. 37.
13. Хасанов Н.Р. Хосияти зидди бактериявии лактовит / Н.Р. Хасанов, Т.М. Давлатмуродов, З. Шарипов // Матер. науч.о-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию РТ, 2700-летию Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода Душанбе, 2006. – С. 42 – 44.
14. Хасанов Н.Р. Этиологияи беморихои омехтаи узвхои хозима ва нафаскашии гусолахо / Н.Р. Хасанов, Н.Р. Сатторов // Матер. науч.-производ. конф. молодых ученых, посвящ. 15-летию независимости РТ, 2700-летию г. Куляба, 75-летию ТАУ и 100-летию У. Рахматзода. – Душанбе 2006. – С. 38 – 39.
15. Хасанов Н.Р. Антибактериальная активность лаксубтила по отношению к патогенным возбудителям респираторно-кишечных болезней животных / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Х. Боронов // Пути устойчивого развития сельского хозяйства: Междунар. науч. конф. – Душанбе, 2007.
16. Хасанов Н.Р. Комбинированное использование комплексных антибиотиков и пробиотиков при лечении пневмоэнтеритов / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, М.М. Каримов // Пути устойчивого развития сельского хозяйства: Междунар. науч. конф. – Душанбе, 2007.
17. Хасанов Н.Р. Смешанное течение эндометритов и маститов у коров на молочно-товарных фермах республики / Н.Р. Хасанов, Т.М. Давлатмуродов, Н.Р. Сатторов // Пути устойчивого развития сельского хозяйства: Междунар. науч. конф. – Душанбе, 2007.
18. Хасанов Н.Р. Эффективность комплексных антибактериальных препаратов при смешанном течении эндометрита и маститов у коров / Н.Р. Хасанов, И.Т. Сатторов, Т.М. Давлатмуродов // Пути устойчивого развития сельского хозяйства: Междунар. науч. конф. – Душанбе, 2007.
19. Истифодаи штамхои мухталифи Bacillus subtilis барои тайёр намудани пробиотики Субтилбен / И.Т. Саттори, Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов, А. Сафаралиев // Кишоварз. – 2008. – №1. – С. 12 – 13.
20. Комплексные антибактериальные препараты и их эффективность при болезнях животных / И. Саттори, Ш.А. Турдиев, Н.Р. Хасанов, Н.Р. Сатторов, Н.Ф. Шеров // Доклады ТАСХН. – №1 (19). – Душанбе, 2009. – С. 40 – 43.
21.Хасанов Н.Р. Координационное соединение меди (II) с дибазолом, проявляющее противомикробную активность / Н.Р. Хасанов, И. Саттори, Н.Р. Сатторов., Н.Ф. Шеров [и др.] // Вестн Таджикского национального университета. – Душанбе, 2009. – №3 (59). – С. 200.
22. Хасанов Н.Р. Сравнительная оценка эффективности разных методов лечения маститов и эндометритов у дойных коров / Н.Р. Хасанов, Т. Давлатмуродов, Н. Сатторов, С. Баротов // Кишоварз. – Душанбе, 2009. – №4 (44). С. 21.
23. Хасанов Н.Р. Эффективность разных методов лечения при острых маститах и эндометритах у дойных коров / Н.Р. Хасанов, Н.Р. Сатторов, Т. Давлатмуродов // Кишоварз / ТАУ. – Душанбе, 2009. – №4 (44). С. 21 – 23.
24. Изменение морфологических и биохимических показателей крови коров в зависимости от применения оптимального способа и дозы пробиотика при лечении субклинического мастита / Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов, С.Т. Баротов // Кишоварз. – 2010. – №3. – С. 29 – 31.
25. Координационное соединение меди (II) с дибазолом, проявляющее противомикробную активность / Н.Р. Хасанов, И.Т. Саттори, Н.Р. Сатторов, З.Н. Юсупов, У.Р. Раджабов, Р.Б. Имомов // Вестн. Таджикского национального университета. – №3 (59). – Душанбе, 2010. – С. 200 – 204.
26. Саидов Ш. Х. Эффективность микробных препаратов при сальмонеллезе телят / Ш. Х. Саидов, Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов // Кишоварз. – 2012. – №3. – С. 31 – 32.
27. Сатторов Н.Р. Изучение острой токсичности пробиотичекого препарата лаксубтил / Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов, М. Каримов // Кишоварз. – 2012. – №3. – С. 32 – 34.
28. Сатторов Н.Р. Изучение хронической токсичности препарата лаксубтил / Н.Р. Сатторов, Н.Р. Хасанов // Кишоварз. – 2012. – №3. – С. 36 – 38.
29. Саидов Ш.Х. Технология изготовления Субтилбена в форме таблеток / Ш.Х. Саидов, Н.Р. Хасанов [и др.] // Кишоварз. – 2012. – №3. – С. 30 – 31.
