Клинико-прогностическое значение оценки функционально-метаболической активности лейкоцитов, среднемолекулярных пептидов, системы про-антиоксидантной защиты крови у больных вич-инфекцией

На правах рукописи

САБАНЧИЕВА ЖАНЕТА ХУСЕЙНОВНА

КЛИНИКО-ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОЦЕНКИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ, среднемолекулярных пептидов, СИСТЕМЫ ПРО-АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ КРОВИ

У БОЛЬНЫХ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

14.00.10-инфекционные болезни

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук

Москва – 2007

Работа выполнена в Кабардино-Балкарском Государственном университете им. Х.М. Бербекова Федерального агентства по образованию и науки Российской Федерации

Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор

Нагоев Беслан Сафарбиевич

Официальные оппоненты:

Член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор

Богомолов Борис Павлович

заведующий отделением ФГУ "Центральная

клиническая больница при Управлении

делами Президента РФ"

Доктор медицинских наук Ермак Татьяна Никифоровна

ведущий научный сотрудник ФГУН «ЦНИИ

эпидемиологии» Роспотребнадзора

Доктор медицинских наук, профессор Токмалаев Анатолий Карпович

заведующий кафедрой инфекционных болезней

ГОУ ВПО «Российский университет Дружбы

народов» Минобразования РФ

Ведущая организация – ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский

университет» Росздрава.

Защита состоится «____»__________2007 г. в______ часов на заседании диссертационного совета Д 208. 114.01 в ФГУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора (111123, г. Москва, ул. Новогиреевская, д.3а).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.

Автореферат разослан «____»________________2007г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Горелов Александр Васильевич

Актуальность проблемы. Прогноз развития эпидемии ВИЧ-инфекции на сегодняшний день крайне неблагоприятен (В.И. Покровский, С.Г. Пак с соавт., 2004; В.В. Малеев, 2004; В.В.Покровский, 2006, В.В. Покровский, Г.Г. Онищенко с соавт., 2006). По оценкам ВОЗ и ЮНЭЙДС, в 2005-2006 годах около 45 млн. людей на планете инфицированы ВИЧ-инфекцией. ВИЧ-инфекция, как в России, так и во всем мире, занимает первое место по уровню психологического стресса (В.В. Беляева, 2003, В.В. Покровский, Н.Н. Ладная с соавт. 2004; В.В. Покровский, 2004-2006). На конец 2006 года общее число зарегистрированных случаев ВИЧ-инфекции в Российской Федерации составило 358918. Однако, по мнению ученых, истинное число ВИЧ-инфицированных примерно в 5 раз больше, чем зарегистрировано (Е.С. Белозеров и соавт., 2003; Г.Г. Онищенко 2004, 2005; В.В. Покровский с соавт., 2004, 2006). Почти 90 % вновь выявляемых случаев заражения составляют потребители инъекционных наркотиков (А.Г. Рахманова с соавт., 2000; В.В. Покровский с соавт., 2005). Распространение вируса у больных наркоманией не только способствует росту заболеваемости ВИЧ-инфекций, но и усугубляет ее течение. В патогенезе ВИЧ-инфекции, наряду с его основными – патогенными свойствами вируса и способностью иммунной системы противостоять ему, принимают участие множество ко-факторов, определяющих развитие тех или иных звеньев патогенеза (А.В. Кравченко, 2001; А.Г. Рахманова с соавт., 2001; J. Bidvell, L. Keen et al., 1999). Одними из таких ко-факторов, по-мнению ряда исследователей, являются пути и способы передачи ВИЧ, сочетание вирусных гепатитов и ВИЧ, туберкулеза и ВИЧ (Е.Г. Корейво, 2001; К.И. Волкова с соавт., 2001; О.А. Чернявская, 2003; В.Р. Хабирова 2004; А.В. Кравченко с соавт., 2005; Р. Ш. Валиев с соавт., 2005).

Известно, что основой невосприимчивости к инфекционным агентам являются реакции неспецифической резистентности организма (В.И. Покровский с соавт., 1983; А.Н. Маянский, О.И. Пикуза, 1993). Противомикробная защита осуществляется благодаря совокупности влияния, как клеточных, так и гуморальных факторов (M. Baggiolini, 1984; M. Alam, 1987). Фоновое состояние неспецифической резистентности организма во многом определяет развитие и исход любого инфекционного процесса. (Б.С. Нагоев, 1987). Нейтрофильные гранулоциты осуществляют первую линию антимикробной защиты, и от их функционального потенциала во многом зависят течение и исход воспалительного процесса (Б.С. Нагоев, 1986; В.И. Покровский с соавт., 1987; Е.Б. Губжокова, 2004). Нейтрофилы занимают одну из наиболее активных позиций в системе гуморально-клеточной кооперации крови и соединительной ткани. Поэтому эти клетки являются универсальной мишенью и, соответственно, индикатором различных нарушений гомеостаза и гомеокинеза (В.Е. Пигаревский, 1978; Б.С. Нагоев, 1986; Л.М).

В настоящее время не вызывает сомнений, что процессы свободнорадикального окисления (СРО) играют чрезвычайно важную роль в жизнедеятельности клеток, так как протекают в нормально метаболизирующих клетках. При нарушении механизмов регулирования процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) происходит избыточное накопление свободных радикалов, которые вызывают нарушение проницаемости, структуры и функции биомембран, повреждение липидов, белков, нуклеиновых кислот, изменения биоэнергетики, регуляторных и защитных функций, иммунитета (М.Р. Иванова, 2002; З.Ф. Хараева, 2002; Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2003; М.Ю. Маржохова, 2004).

Синдром эндогенной интоксикации сопутствует многим заболеваниям и патологическим состояниям, определяя их тяжесть течения и прогноз (Н.П. Метальникова с соавт., 1990). Значение определения в биологических жидкостях уровня олигопептидов с молекулярной массой 300-5000 Д, известных как среднемолекулярные пептиды (СМП), при различных заболеваниях общепризнано (В.В. Малеев с соавт., 1986; Н.Д. Ющук с соавт.,1990; В.В. Николайчик с соавт., 1991; С.Г. Пак с соавт., 1994; Б.С. Нагоев, М.И. Габрилович, 2000; Е.А. Лужников с соавт., 2002; Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2003; Д.И. Джуртубаева, 2003; М.Ю. Маржохова, 2004; З.А. Камбачекова, 2006). Однако, несмотря на большое внимание к проблеме эндогенной интоксикации при различных патологических состояниях при ВИЧ-инфекции остаются недостаточно изученными.

В связи с этим представляет значительный интерес комплексное изучение сложных патогенетических механизмов неспецифической резистентности организма, выяснение роли и значения показателей СРО, а также антиоксидантной защиты у больных ВИЧ-инфекцией, в зависимости от стадии, глубины патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний, а также предпринята попытка рациональной коррекции выявленных нарушений антиоксидантными препаратами.

Цель работы. Целью работы явилось проведение клинико-лабораторной оценки функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов, состояния среднемолекулярных пептидов и системы про-антиоксидантной защиты крови у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от стадии и степени тяжести патологического процесса, характера сопутствующих заболеваний, наличия наркомании, ко-инфекции, а также результатов лечебных мероприятий.

Задачи исследования. В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией:

1. изучить основные показатели микробицидной системы нейтрофильных лейкоцитов (активность миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз, содержание катионного белка, гликогена и липидов);
2. выявить состояние фагоцитарно-метаболической функции лейкоцитов с помощью проведения спонтанного НСТ-теста;
3. установить значение уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови как показателя эндогенной интоксикации, диагностического, прогностического критерия в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний и осложнений;
4. исследовать содержание перекисного окисления липидов плазмы крови;
5. выявить закономерность изменений антиоксидантной системы крови в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний;
6. провести сопоставление между цитохимическими показателями лейкоцитов, среднемолекулярых пептидов, свободнорадикальных систем крови и основными параметрами лабораторного исследования крови (количество лейкоцитов, палочкоядерный сдвиг, СОЭ), а также выявить корреляционную связь с основными показателями иммунной системы (CD4-, CD8-лимфоцитов, CD4/CD8)
7. установить диагностическую и прогностическую информативность полученных показателей функционально-метаболической активности лейкоцитов, среднемолекулярных пептидов в плазме крови и про-антиоксидантных систем крови;
8. обосновать и оценить эффективность лечения у больных ВИЧ-инфекцией с применением в комплексной терапии иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата – тамерит.

Работа проводилась в соответствии с комплексным планом НИР Кабардино-Балкарского государственного университета Минобразования РФ по программе «Университеты России», раздел II «Медицина». Тема: «Изучение показателей микробицидной системы лейкоцитов и среднемолекулярных пептидов в плазме крови организма в норме и при инфекционных заболеваниях различной этиологии», зарегистрирована в ВНТИ-центре, государственная регистрация № 01.9.50003849, а также по проблеме «Состояние прооксидантной и антиоксидантной системы организма при инфекционных заболеваниях различной этиологии и методы ее коррекции». Номер государственной регистрации во ВНТИ-центре 0120.0 501781.

Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые при ВИЧ-инфекции установлено закономерное угнетение активности миелопероксидазы лейкоцитов, содержания катионного белка и липидов в цитоплазме нейтрофильных гранулоцитов при одновременном возрастании активности щелочной и кислой фосфатаз, а также уровня гликогена в нейтрофильных лейкоцитах и возрастание показателя НСТ-теста у больных ВИЧ-инфекцией. Впервые у больных ВИЧ-инфекцией выявлено закономерное возрастание средних молекул в плазме крови с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний. Обнаружена активация процессов перекисного окисления липидов на фоне истощения антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией. Установлена патогенетическая значимость изменения малонового диальдегида, церулоплазмина, общей антиокислительной активности, супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Получена зависимость выраженности сдвигов функционально-метаболической активности нейтрофилов, состояния среднемолекулярных пептидов и про-антиоксидантных систем крови в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний, а также от полноты лечебных мероприятий. Впервые апробирована эффективность применения иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного действия препарата тамерита в процессе терапии ВИЧ-инфекции.

Практическая значимость. Цитохимическое определение интралейкоцитарных компонентов и показателя спонтанного НСТ-теста может служить самостоятельным критерием состояния неспецифической резистентности организма, определяющим степень тяжести воспалительного процесса у больных ВИЧ-инфекцией, прогнозирование осложнений и возможного неблагоприятного исхода заболевания. Значительно выраженные изменения уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови, как показателя эндогенной интоксикации свидетельствует о тяжелом течении болезни, возможном присоединении осложнений или возникновении новых очагов воспаления. Впервые проведено комплексное исследование показателей перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты крови больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от стадии, глубины патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и при обострении сопутствующих заболеваний. Обнаружена активация процессов перекисного окисления липидов на фоне истощения антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией. Впервые установлен и предложен эффективный иммуномодулирующий, противовоспалительный и антиоксидантный препарат тамерит в лечении ВИЧ-инфекции.

Положения, выносимые на защиту:

1. В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией наблюдаются закономерные сдвиги основных компонентов вирулоцидной системы лейкоцитов, зависящие от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний, а также от полноты лечения, что имеет дополнительное клинико-диагностическое значение.
2. Проведение исследований спонтанного НСТ-теста у больных ВИЧ-инфекцией дает информацию о состоянии функционально-метаболической активности лейкоцитов и может служить критерием нарушения фагоцитарной функции, а также для оценки прооксидантной системы организма. У больных с ВИЧ-инфекцией изменения функционально-метаболической активности лейкоцитов носят неспецифический характер, являясь объективным критерием состояния резистентности организма.
3. Выраженность изменений средних молекул в плазме крови зависит от стадии, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующей патологии и может быть использован в качестве дополнительного критерия тяжести процесса, прогноза развития тяжелых форм заболевания, присоединения осложнений, а также в качестве критерия эффективности лечения.
4. В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией происходит повышение активности перекисного окисления липидов, зависящие от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний.
5. Изученные показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма при ВИЧ-инфекции можно использовать в качестве дополнительного критерия тяжести процесса, прогноза развития осложнений, а также от полноты лечения, что имеет дополнительное клинико-диагностическое значение.
6. Возможность использования иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата тамерита у больных ВИЧ-инфекцией в комплексной терапии.

Внедрение в практику.

Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Центра по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями МЗ КБР. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе кафедр инфекционных болезней, микробиологии, вирусологии и иммунобиологии, дерматовенерологии, факультетской и госпитальной терапии медицинского факультета КБГУ при прохождении тем: «Инфекция и инфекционный процесс», «ВИЧ-инфекция», «Неспецифическая реактивность и иммунитет».

Публикации: По материалам диссертационной работы опубликовано 56 научных работ, в том числе 1 монография, 6 статей в центральных ВАКовских журналах: «Инфекционные болезни», «Эпидемиология и инфекционные болезни» и «Аллергология и иммунология» и 10 работ на конференциях с международным участием.

Апробация диссертационного материала: основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных итоговых научных конференциях сотрудников и молодых ученых Кабардино-Балкарского госуниверситета (г. Нальчик, 2004-2007), на заседаниях Кабардино-Балкарского научного общества инфекционистов (г. Нальчик, 2005, 2006), на Российской научно-практической конференции Узловые вопросы борьбы с инфекцией» (Санкт-Петербург, 2004), на VI Общероссийской научной конференции с международным участием «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Кисловодск, 2005), на II и III международных конференциях молодых ученых и специалистов (Турция, 2005; Тунис, 2005), на Российской научной конференции «Диагностика, терапия, профилактика социальнозначимых заболеваний человека» (Иркутск, 2005г.), на VI Общероссийской научной конференции с международным участием «Успехи современного естествознания» (Догомыс, Сочи, 2005), на IV Российской конференции «Проблемы морфологии. Теоретические и клинические аспекты» (Астрахань, 2005), на научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (о.Тенерифе, 2005), на III международной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (Греция, 2005), на юбилейной конференции «Современные проблемы науки и образования» (Москва, 2005), на Российской научно-практической конференции посвященной 110-летию кафедры инфекционных болезней (Санкт-Петербург, 2006), на Международной научно-практической конференции «Сепсис: проблемы диагностики, терапии и профилактики» (Харьков, 2006), на V-й межвузовской международной биохимической научно-практической конференции «Обмен веществ при адаптации и повреждении» (Ростов-на-Дону, 2006)., на II-ой региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы инфекционной патологии Юга России (г. Майкоп, 2006), на Всероссийской научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Перспектива - 2006», «Перспектива - 2007», (Приэльбрусье, 2006, 2007), на 6-м Российском съезде аллергологов и иммунологов СНГ (Санкт-Петербург, 2006), на VII Российском съезде инфекционистов (Нижний Новгород, 2006), на V-м Всемирном конгрессе по иммунопатологии (Москва, 2007), на юбилейной Российской научно-практической конференции с международным участием, посвященная 175-летию со дня рождения С.П. Боткина (Санкт-Петербург, 2007). Диссертационная работа апробирована на научной конференции кафедр инфекционных болезней, дерматовенералогии, микробиологии вирусологии и иммунобиологии и кафедры последипломного образования, с врачами Республиканского центра по профилактике и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями МЗ КБР (г. Нальчик, 26 июня 2007г.).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 247 страницах машинописного текста и содержит: введение, 7 глав, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 276 отечественных и 144 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 87 таблицами, 30 рисунками и 10 примерами из клинических наблюдений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Клинико-лабораторная характеристика больных. За период с 2000-2006гг. под наблюдением находилось 123 больных ВИЧ-инфекцией находившихся на стационарном лечении и диспансерном учете поликлинического отделения Центра по профилактике и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями Кабардино-Балкарской Республики г. Нальчика и во 2-ой городской инфекционной больнице г. Краснодара, а также госпитализированных в стационаре. Среди пациентов было 82 мужчин и 41 женщин. Средний возраст больных составил 33,5 года. У ВИЧ-инфицированных диагноз выставлен на основании эпидемиологических, клинических данных и был подтвержден обнаружением в крови специфических антител к белкам вируса иммунодефицита человека I типа методами иммуноферментного анализа (Эколаб Вероностика IV) и иммунного блотинга (NEWLAV BLOT I). В группе больных с половым путем заражения было 34 женщины (27,6%) и 26 мужчин (21,1%). Группу пациентов с парентеральным путем заражения составили 52 мужчин (42,2%) и 11 женщин (8,9%). Парентеральный путь заражения регистрировался с частотой 51,2%, при этом значительный удельный вес составили инфицированные парентерально при внутривенном употреблении наркотиков (48,7% от всех пациентов). В данной группе больные продолжали вводить наркотические препараты, поэтому данную группу больных мы рассматривали как влияние ко-фактора наркомании на ВИЧ-инфекцию.

Заболевание диагностировалось на различных стадиях болезни, но у большинства больных (69,9%) ВИЧ-инфекция выявлялась в стадию первичных проявлений (IIБ, IIВ). Согласно клинической классификации В.И. Покровского (2001) у 49 больных была диагностирована стадия первичных проявлений 2Б (острая ВИЧ-инфекция без вторичных заболеваний), у 37 стадия 2В (острая ВИЧ-инфекция с вторичными заболеваниями) и у 37 пациентов стадия 3 (латентная). За период наблюдения из 123 человек у 73 отмечалось прогрессирование инфекционного процесса, утяжеление общего состояния и переход в стадию вторичных заболеваний. Так, 4А стадия выявлена у 34 больных, 4Б стадия у 20 и 4В у 19 больных. При углубленном изучении стадии вторичных заболеваний установлены следующие СПИД-маркерные заболевания: распространенная герпетическая инфекция 1 и 2 типа у 47 пациентов, кандидоз слизистых полости рта, пищевода– у 10 пациентов, криптоспоридиоз с диарейным синдромом – у 7, генерализованная цитомегаловирусная инфекция у 4, волосатая лейкоплакия языка у 2, саркома Капоши у одного больного, туберкулезный сепсис с поражением легких, лимфоузлов, печени, селезенки - у 4. Кроме того, у 24 пациентов наблюдалась ВИЧ-кахексия с потерей массы тела на 33,0%, пневмония бактериальной этиологии – у 19 больных, частые острые респираторные вирусные инфекции – у 18, повторные бронхиты бактериальной этиологии - у 10, себорейный дерматит - у 8, периферическая полинейропатия – у 11, фурункулез кожи – у 9, стептодермия – у 8 пациентов. У больных ВИЧ-инфекцией выявлены следующие отягощающие заболевания: сифилис (9,7%), хронический алкоголизм (14,6%), наркомания (48,7%), что может, объясняется их социальным образом жизни обследуемых больных.

В соответствии с целями и задачами настоящей работы больные обследовались в динамике заболевания и делились на периоды: I- период включал 86 больных в нее вошли больные в стадию первичных проявлений (IIБ, IIВ); II-й период составили 77 больных у которых диагностирована латентная стадия; III-й период составили 73 человек, у которых развилась стадия вторичных заболеваний; IV-й и V-й периоды через 1 и 6 месяцев от начала базис-терапии.

Больные ВИЧ-инфекцией получали базис-терапию, которая включала антиретровирусную, антибактериальную, дезинтоксикационную терапию, витоминотерапию и симптоматическую. В качестве антиретровирусной терапии ВИЧ-инфицированным в стадию вторичных проявлений, применяли отечественный препарат тимозид (Азидотимидин, АЗТ, Россия) по 0,6 г в сутки в течение 3 месяцев; битерапию 20 больным (тимозид+невирапин по 0,2 г 1 раз в день) и тритерапию 4 больным (тимозид+невирапин+видекс по 0,2 г 2 раза в день). Критериями эффективности лечения являлось клиническое улучшение, повышение CD4-лимфоцитов и снижение РНК ВИЧ. Группе больным из 25 человек помимо базис-терапии проведено противовоспалительное и иммуномодулирующее лечение с помощью нового иммуностимулятора «Тамерит» из группы аминофталгидрозидов.

Среди обследованных 123 пациентов у 67 ВИЧ-инфекция протекала при ко-инфекции парентеральных вирусных гепатитов В, С и микст В+С. Диагноз устанавливался на основании эпидемиологического анамнеза, клинических данных (наличие симптомокомплекса хронического гепатита, увеличение и уплотнение печени), результатов биохимических-серорлогических исследований (пигментные, ферментные, белковые тесты) и при выявлении маркеров HCV, HBV методом ИФА. С учетом клинико-биохимической характеристики, серологического профиля у 29 больных зарегистрирована латентная фаза хронических гепатитов, а у 38 – фаза репликации. Начало наблюдения в I группе больных с парентеральными вирусными гепатитами совпало с выявлением ВИЧ-инфекции.

Среди 123 пациентов у 36 ВИЧ-инфекция протекала при ко-инфекции ВИЧ и туберкулеза. Было выделено 2 группы больных: I-у группу больных составили 17 человек, у которых заболевание туберкулеза было выявлено до ВИЧ-инфицирования; II-ую группу -19 человек, составили больные, где ВИЧ-инфекция предшествовала туберкулезу. Диагноз туберкулеза основывался на клинико-рентгенологических данных, бактериологически подтвержден у 26 больных. Туберкулез выявлялся часто с поражением органов дыхания: инфильтративный туберкулез был выявлен у 4 человек (11,1%); очаговый туберкулез — у 6 человек (16,7%); фибринозно-кавернозный - у 3 (8,3%); кавернозный — у 2 (5,5%); туберкулома — у 1 (2,8%); диссеминированный туберкулез — у 3 (8,3%); генерализованный туберкулез — у 1 больного (2,8%). У 17 больных (15 мужчин и 2 женщин в возрасте от 19 до 49 лет) развился туберкулез легких с осложнениями, такими, как экссудативный плеврит (15) или абсцесс (2). Для проведения клинико-лабораторных исследований под наблюдение была взята I-я группа больных, у которых туберкулез был выявлен до ВИЧ-инфекции и расценивался как сопутствующая инфекция.

Методы исследования. Для решения поставленных в работе задач нами использовались следующие методы исследования:

1. Активность миелопероксидазы определяли, используя метод Sato (1928),
2. Активность кислой фосфатазы – реакция азосочетания по Goldberg и Barka (1962) в модификации В.И. Дудецкого (1970),
3. Активность щелочной фосфатазы определяли с использованием варианта метода азосочетания, предложенного М.Г. Шубич (1965),
4. Содержания катионного белка проводилось по методу М.Г. Шубича (1974) в прописи Б.С. Нагоева (1983),
5. Содержание гликогена определяли по А.Л. Шабадашу (1947) с применением реактива Шиффа,
6. Содержание липидов определяли суданом III по методу Гольдмана по прописи Г.И. Раскина и Л.Б. Левинсона (1957),
7. Для изучения активности нейтрофильных лейкоцитов был использован тест спонтанного восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по методике Stuart с соавторами (1975) в модификации Б.С. Нагоева (1983),
8. Содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови скриниговым методом по В.В. Николайчику с соавт. (1991) в модификации М.И. Габриловича (1998).
9. Уровень малонового диальдегида оценивали по Ushiyma M. at al (1983) в реакции с тиобарбитуровой кислой,
10. Содержание непрямого антиоксиданта церулоплазмина оценивали по методу Раввина (2000),
11. Определение уровня внутриклеточного антиоксиданта каталазы эритроцитов проводили по рекомендации А.И. Карпищенко (1999),
12. Определение активности супероксиддисмутазы оценивали по В.А. Гусеву (1974),
13. Общую антиокислительную активность плазмы крови определяли по Е.Б. Спектор (1984).

Количественное определение активности ферментов, цитохимических компонентов и показателей НСТ-теста в лейкоцитах крови осуществляли по методу Kaplow (1955) и выражали показатели в условных единицах.

С целью объективизации оценки полученных результатов, а также для определения степени достоверности диссертационной работы весь материал подвергался математической обработке. Она проводилась на компьютере с использованием статистических функций редактора электронных таблиц Excel из пакета Microsoft Office. При этом придерживались основных законов и положений описательной статистики. Степень достоверности определяли согласно критериев Стьюдента, которые позволяют работать с относительно небольшой выборкой клинического материала (Л.С. Каминский, 1964; Р.Н. Бирюкова, 1965; Б.Ю. Урбах, 1975; Г.Г. Автандилов, 1990).

Показатели функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов, молекул средней массы и системы про-антиоксидантной защиты крови у здоровых людей

Для оценки изменений в ферментативной активности лейкоцитов, в содержании катионного белка, гликогена, липидов и средних молекул плазмы крови, а также показателей спонтанного НСТ-теста и про-антиоксидантных систем крови при патологических состояниях необходима стандартизация физиологических компонентов у здоровых людей. Она сводится к нахождению с помощью использованных методик пределов колебаний указанных показателей, то есть, к установлению «собственной нормы», как это принято в цитохимии (М.Г. Шубич, Б.С. Нагоев, 1980; Б.С. Нагоев, 1986).

Таблица 1

Показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов, среднемолекулярных пептидов и свободнорадикальных систем крови

у здоровых людей

Исследуемый компонент	n	Xmin-Xmax	X±m	±S	X±2S
Миелопероксидаза (усл.ед.)	62	182-230	203±1,3	10,3	183-225
Щелочная фосфатаза (усл.ед.)	50	4-76	25±2,3	16,0	0-57
Кислая фосфатаза (усл.ед.)	62	30-84	62±1,5	11,6	39-85
Катионный белок (усл.ед.)	50	88-154	123±1,8	14,2	96-152
Гликоген (усл.ед.)	68	152-207	179±1,6	11,9	155-205
Липиды (усл.ед.)	50	216-300	249±2,6	18,7	212-286
Спонтанный НСТ-тест (усл.ед.)	30	3-24	12±0,9	5,3	2-22
СМП в плазме крови (опт.ед.)	50	0,881-1,889	1,15±0,02	0,21	0,73-1,57
Малоновый диальдегид, (мкмоль/л)	30	0,4-1,9	1,3±0,08	0,3	0,3-2,1
Каталаза эритроцитов, моль/(мин·л)	36	30,1-42,8	41,1±0,07	16,0	48,3-59,3
Церулоплазмин, (мг/л)	33	345-501	403±4,8	21,1	341-499
СОД, усл.ед.	45	0,9-1,5	1,35±0,02	16,0	0,8-1,9
Обща антиокислительная активность, %	30	36,4-59,2	49,7±1,6	7,2	35,7-60,4

Исследование функционально-метаболической активности лейкоцитов, содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови и активность свободнорадикальных систем крови проведено у 62 практически здоровых людей в возрасте от 18 до 64 лет, из числа доноров проходивших медицинский осмотр в Республиканской станции переливания крови. Обследованные лица предварительно прошли клинико-лабораторное обследование. Большой объем используемых исследований, апробированность, специфичность, воспроизводимость используемых методик позволили считать полученные результаты как критерий нормы при проведении клинико-лабораторных исследований и сопоставлений.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Состояние функционально-метаболической активности

нейтрофильных лейкоцитов при ВИЧ-инфекции

Проведенные цитохимические исследования в динамике ВИЧ-инфекции выявили важные закономерности. У больных ВИЧ-инфекцией обнаружены значительные разнонаправленные сдвиги функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов. Так в стадию первичных проявлений (стадию 2Б, 2В) происходит угнетение активности миелопероксидазы, снижение содержания интралейкоцитарного катионного белка и липидов. Активность кислой и щелочной фосфатаз и содержание гликогена, напротив, повышаются (табл. 2). Такая же динамика обнаруживается и в латентную стадию.

Таблица 2

Функционально-метаболическая активность лейкоцитов в динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией

Исследуемый компонент	Периоды исследования	n	Xmin-Xmax	X±m	±S	P
Миелопероксидаза	Здоровые	62	182-230	203±1,3	10,3	-
	I	85	167-202	195±1,1	5,2	<0,001
	II	77	154-192	183±0,8	3,7	<0,001
	III	75	126-183	151±0,9	1,1	<0,001
	IV	68	142-198	172±1,6	15,0	<0,001
	V	52	164-206	191±0,3	2,3	<0,001
Щелочная фосфатаза	Здоровые	50	4-76	25±2,3	16,0
	I	27	26-69	33±1,9	11,8	<0,05
	II	25	52-111	69±1,2	7,5	<0,001
	III	25	120-142	135±1,3	6,2	<0,001
	IV	23	78-123	98±2,2	11,2	<0,001
	V	18	30-84	56±1,6	13,4	<0,001
Кислая фосфатаза	Здоровые	62	30-84	62±1,5	11,6	-
	I	58	45-91	68±1,7	10,6	>0,05
	II	57	53-99	75±1,3	9,1	<0,001
	III	57	123-156	138±0,9	7,2	<0,001
	IV	49	88-132	110±1,3	9,5	<0,001
	V	45	62-104	81±1,2	9,1	<0,001
Катионный белок	Здоровые	50	88-154	123±1,8	14,2	-
	I	85	110-142	119±1,2	7,4	>0,05
	II	76	91-130	113±1,0	7,3	<0,001
	III	72	72-110	87±1,1	8,2	<0,001
	IV	68	80-118	97±1,1	8,2	<0,001
	V	52	96-126	111±0,9	6,5	<0,001
Гликоген	Здоровые	68	152-207	179±1,6	11,9	-
	I	76	162-200	182±1,4	8,8	>0,05
	II	75	165-206	184±1,9	9,2	<0,001
	III	72	178-240	209±1,8	13,4	<0,001
	IV	68	169-219	196±1,4	10,8	<0,001
	V	52	168-207	185±1,1	8,5	<0,001
Липиды	Здоровые	50	216-300	249±2,6	18,7	-
	I	73	220-269	246±1,8	8,7	>0,05
	II	73	208-251	238±1,9	9,0	<0,001
	III	72	176-216	189±1,1	9,8	<0,001
	IV	68	187-232	209±1,3	8,7	<0,001
	V	52	206-246	234±1,1	11,3	<0,001

Примечание в табл. 2-8: периоды обследования соответствуют – I-стадии первичных проявлений; II-латентной стадии; III-стадии вторичных заболеваний; IV-угасанию клинических симптомов; V- через 6 месяцев от начала базис-терапии; P –достоверность различия по отношению к здоровым.

В стадию вторичных заболеваний у всех больных отмечено максимальное угнетение активности миелопероксидазы, снижение содержания интралейкоцитарного катионного белка и липидов. Активность кислой и щелочной фосфатаз и содержание гликогена, напротив, повышаются. При угасании клинических симптомов (через 1 месяц), когда в процессе лечения происходило улучшение общего самочувствия, отмечалась нормализация температуры тела, уменьшение симптомов интоксикации, выявлено постепенное повышение активности миелопероксидазы, содержания катионного белка и липидов, тогда как фосфатазная активность и уровень гликогена снижались. Через 6 месяцев от начала комплексного лечения наблюдается дальнейшее повышение активности миелопероксидазы, содержания катионного белка и липидов, тогда как фосфатазная активность и уровень гликогена снижались, но не достигала нормы.

Выявлена зависимость степени изменения функциональной метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов от наличия наркомании. При этом, более выраженное увеличение активности кислой и щелочной фосфатаз, повышение содержания гликогена, напротив с более значительным угнетением активности миелопероксидазы, и содержания катионного белка и липидов обнаружено у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией по сравнению с группой больных без наркомании и наблюдается как в стадию первичных проявлений, так и в стадию вторичных заболеваний.

Аналогичное соотношение между исследуемыми показателями нейтрофильных гранулоцитов в зависимости от наличия наркомании сохраняется и при угасании клинических симптомов. В стадию вторичных заболеваний, через 6 месяцев от начала базис-терапии исследуемые показатели у больных ВИЧ-инфекцией без наркомании приближаются к норме, в то время как у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией существенно отличаются от нормальных показателей (таблица 3, 4).

Изучена активность функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов в зависимости от наличия ко-инфекции ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитов В, С, В+С. Выявлено, что более выраженные изменения важнейших интралейкоцитарных компонентов вирулоцидной системы и активности ферментов было обнаружено при наличии ко-инфекции вирусных гепатитов и ВИЧ, как в стадию первичных проявлений, так и в стадию вторичных заболеваний. Причем, даже через 6 месяцев от начала базис-терапии указанные показатели не нормализуются у больных при ко-инфекции ВИЧ и вирусных гепатитов (табл.3, 4).

Таблица 3

Показатели интралейкоцитарных компонентов вирулоцидной системы лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия наркомании, вирусных гепатитов В, С и микст В+С и туберкулеза легких

Группа обследов.	Период иссл.	n	Исследуемый показатель
			Миелопероксидаза		Катионный белок		Гликоген
			X±m	Р	X±m	Р	X±m	Р
ВИЧ-инфекция без наркомании	З	50	203±1,3	-	123±1,8	-	179±1,6	-
	I	32	195±0,2	<0,001	116±1,4	>0,05	181±1,9	>0,05
	II	31	182±1,3	<0,001	109±1,5	<0,001	185±2,1	<0,001
	III	27	151±0,9	<0,001	92±1,3	<0,001	200±2,5	<0,001
	IV	26	172±0,8	<0,001	102±1,3	<0,001	190±2,0	<0,001
	V	24	191±0,7	<0,001	116±1,2	<0,001	181±1,3	>0,05
ВИЧ-инфекция с наркоманией	З	50	203±1,3	-	123±1,8	-	179±1,6	-
	I	55	190±1,1	<0,001	109±1,8	>0,05	189±2,1	>0,05
	II	51	171±1,2	<0,001	98±1,6	<0,001	193±2,2	<0,001
	III	49	147±0,9	<0,001	80±1,2	<0,001	221±2,7	<0,001
	IV	43	162±0,8	<0,001	90±1,1	<0,001	210±2,4	<0,001
	V	33	188±0,9	<0,001	104±1,1	<0,001	198±2,0	<0,001
ВИЧ-инфекция с вирусным гепатитом В, С, В+С	З	50	203±1,3	-	123±1,8	-	179±1,6	-
	I	28	188±2,0	<0,001	112±1,1	>0,05	188±2,0	>0,05
	II	27	169±1,8	<0,001	94±1,5	<0,001	190±1,9	<0,001
	III	21	139±1,4	<0,001	78±0,8	<0,001	222±2,3	<0,001
	IV	19	159±1,3	<0,001	89±0,9	<0,001	209±2,1	<0,001
	V	18	178±1,5	<0,001	102±0,9	<0,05	197±1,6	<0,05
ВИЧ-инфекция с туберкулезом легких	З	50	203±1,3	-	123±1,8	-	179±1,6	-
	I	16	193±3,1	<0,001	113±2,3	<0,05	187±3,2	<0,05
	II	16	170±1,9	<0,001	91±1,9	<0,001	192±2,1	<0,001
	III	14	142±1,6	<0,001	76±1,2	<0,001	225±2,8	<0,001
	IV	14	164±2,4	<0,001	85±1,5	<0,001	209±2,9	<0,001
	V	13	181±2,0	<0,001	100±1,3	<0,001	197±2,9	<0,001

Примечание: Р – достоверность различия по отношению к больным ВИЧ-инфекцией без наркомании; без ко-инфекции с вирусными гепатитами В,С и микст В+С и без обострения туберкулеза легких

В динамике заболевания изучена группа больных зависимости от наличия обострения сопутствующей патологии, такой как туберкулез легких. Так, выявлено достоверно более выраженные разнонаправленные сдвиги в содержании показателей неспецифической резистентности крови у больных ВИЧ-инфекцией при наличии обострения туберкулеза легких по сравнению с группой больных, у которых ВИЧ-инфекция протекала без туберкулеза легких, как в стадию первичных проявлений, так и в стадию вторичных заболеваний.

Таблица 4

Функционально-метаболическая активность лейкоцитов в динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией

Группа обследов.	Период иссл.	n	Исследуемый показатель
			Кислая фосфатаза		Щелочная фосф-за		Липиды
			X±m	Р	X±m	Р	X±m	Р
ВИЧ-инфекция без наркомании	З	50	62±1,5	-	25±2,3	-	249±2,6	-
	I	32	71±1,2	<0,001	29±1,6	>0,05	245±1,4	<0,001
	II	28	79±1,1	<0,001	68±0,9	<0,001	240±1,9	<0,001
	III	27	133±1,0	<0,001	123±0,7	<0,001	216±1,5	<0,001
	IV	26	106±1,5	<0,001	71±1,6	<0,001	232±0,7	<0,001
	V	25	61±1,8	>0,05	33±1,3	<0,001	241±1,7	>0,05
ВИЧ-инфекция с наркоманией	З	50	62±1,5	-	25±2,3	-	249±2,6	-
	I	54	76±2,1	<0,001	31±1,8	>0,05	226±1,9	<0,001
	II	53	89±1,9	<0,001	86±1,4	<0,001	205±2,1	<0,001
	III	48	146±1,6	<0,001	135±1,3	<0,001	182±2,6	<0,001
	IV	45	116±1,9	<0,001	97±2,6	<0,001	199±2,1	<0,001
	V	44	88±1,8	<0,001	55±3,0	<0,001	238±2,4	<0,001
ВИЧ-инфекция с вирусным гепатитом В, С, В+С	З	50	62±1,5	-	25±2,3	-	249±2,6	-
	I	27	80±1,3	<0,001	39±1,9	<0,001	235±2,1	<0,001
	II	27	102±1,5	<0,001	91±1,1	<0,001	203±1,8	<0,001
	III	25	148±1,0	<0,001	141±1,3	<0,001	179±2,0	<0,001
	IV	23	119±1,4	<0,001	104±2,2	<0,001	196±1,5	<0,001
	V	18	74±1,9	<0,001	62±2,6	<0,001	223±1,5	<0,001
ВИЧ-инфекция с туберкулезом легких	З	50	62±1,5	-	25±2,3	-	249±2,6	-
	I	16	76±2,5	<0,001	48±1,5	<0,001	234±1,9	<0,001
	II	16	109±1,7	<0,001	90±1,2	<0,001	201±2,0	<0,001
	III	15	157±1,8	<0,001	139±1,4	<0,001	178±2,7	<0,001
	IV	14	123±1,7	<0,001	100±2,4	<0,001	194±2,4	<0,001
	V	13	92±1,5	<0,001	57±2,9	<0,001	221±2,4	<0,001

Примечание: Р – достоверность различия по отношению к больным ВИЧ-инфекцией без наркомании; без ко-инфекции с вирусными гепатитами В,С и микст В+С и без обострения туберкулеза легких

Через 6 месяцев от начала базис-терапии в группе больных ВИЧ-инфекцией без обострения туберкулеза исследуемые показатели приближаются к здоровой группе, а при наличии обострения туберкулеза легких не нормализуются (табл.2,3,4).

Показатели НСТ-теста у больных ВИЧ-инфекцией

Изучение функционально-метаболической активности лейкоцитов с помощью спонтанного НСТ-теста нейтрофилов у больных ВИЧ-инфекцией показало повышение активности спонтанного НСТ-теста с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний (42±0,7; р<0,001). При исследовании в периоде угасания клинических симптомов выявлено снижение способности нейтрофильных лейкоцитов восстанавливать нитросиний тетразолий (30±0,6; р<0,001). Через 6 месяцев от начала базис-терапии нормализация активности НСТ-теста лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией не происходила, однако средний показатель активности НСТ-теста приближался к показателю здоровой группы (21±0,6 усл.ед; р<0,01). Показано, что НСТ-тест отражает итоговую реакцию одной из ключевых ферментативных систем, ответственных за цитохимический потенциал нейтрофильных лейкоцитов. Нарушение способности лейкоцитов к восстановлению НСТ совпадают с патологией кислородзависимых механизмов вирулоцидности (В.И. Покровский, Б.С. Нагоев, 1983; Б.С. Нагоев, 1986; Д.Н. Маянский, 1989; А.Н. Маянский, О.И.Пикуза, 1993).

Таким образом, комплексное исследование вирулоцидной системы нейтрофильных лейкоцитов при ВИЧ-инфекции выявило неспецифический характер изменений их цитохимического статуса. Во всех группах обследованных выявлено значительное угнетение активности миелопероксидазы, снижение содержания катионного белка и липидов, в то время, как активность щелочной и кислой фосфатаз, так же, как и содержание гликогена, были существенно повышены. При чем, у больных ВИЧ-инфекцией в латентную стадию, при отсутствии клинических проявлений, но нарастающем иммунодефиците исследуемые показатели продолжали ухудшаться. Максимальные отклонения цитохимических показателей от нормы наблюдались на высоте патологического процесса. В динамике заболевания, параллельно стиханию воспалительного процесса, угасанию клинических симптомов происходило постепенное повышение активности миелопероксидазы, увеличение содержания катионного белка и липидов, снижение активности щелочной и кислой фосфатаз, уровня гликогена и показателя НСТ-теста.

Степень изменения ферментативной активности лейкоцитов и содержания интралейкоцитарных компонентов зависели от стадии заболевания, тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний, а также от полноты проводимых лечебных мероприятий. Так, максимальные сдвиги в содержании всех компонентов вирулоцидной системы нейтрофилов отмечено у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией, у больных при наличии ко-инфекции ВИЧ и хронических вирусных гепатитов В, С, и микст В+С, у больных ВИЧ-инфекций сопутствующей патологией, как туберкулез легких с легочными осложнениями.

Вышеперечисленные факторы влияли как на глубину сдвигов в содержании интралейкоцитарных компонентов, так и на скорость восстановления. Показано, что НСТ-тест отражает итоговую реакцию одной из ключевых ферментативных систем, ответственных за цитохимический потенциал нейтрофильных лейкоцитов. Нарушение способности лейкоцитов к восстановлению НСТ совпадает с патологией кислородзависимых механизмов бактерицидности (В.И. Покровский, Б.С. Нагоев, 1983; А.Н. Маянский, О.И.Пикуза, 1993).

Среднемолекулярные пептиды в плазме крови больных

ВИЧ-инфекцией

Уровень веществ средней молекулярной массы являются общепринятым маркером эндогенной интоксикации, позволяет оценивать тяжесть и прогноз заболевания и является критерием эффективности проводимого лечения (М.Я. Малахова, 1995; А.А. Николаев с соавт., 1999; В.Б. Гаврилова с соавт., 1999). Спектрофотометрическое изучение содержания среднемолекулярных пептидов в динамике заболевания ВИЧ-инфекцией выявило закономерное возрастание уровня активности содержания СМП в плазме крови с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний. В периоде угасании клинических симптомов, на фоне проводимой базис-терапии наблюдалось существенное снижение уровня СМП в плазме крови. В процессе лечения, параллельно положительной динамике заболевания, происходит ступенеобразное и существенное снижение уровня содержания СМП, однако, не доходящее до нормы даже через 6 месяцев после начатой базис-терапии, отличие от среднего показателя содержания СМП здоровых лиц остается существенным.

Отмечены отличия изменений уровня СМП в плазме крови в зависимости от наличия наркомании. Так, у больных ВИЧ-инфекцией без наркомании наблюдалось умеренное повышение содержания СМП (1,34±0,02; р<0,001), в то время как у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией содержания СМП были более выражены (1,43±0,04; p<0,001). При угасании клинических симптомов и через 6 месяцев от начала базис-терапии в группе больных без наркомании приближаются к норме (1,24±0,03), однако у больных с наркоманией СМП в плазме крови остается достоверно высоким (1,28±0,02; p<0,01).

Установлено закономерные отличия содержания СМП в плазме крови в зависимости от наличия ко-инфекции ВИЧ и вирусных гепатитов В, С, и микст В+С. У больных при ко-инфекции ВИЧ и вирусных гепатитов В, С и микст В+С наблюдаются более выраженные изменения СМП в плазме крови по сравнению с больными ВИЧ-инфекцией без ко-инфекции (1,69±0,03:1,61±0,02 соответственно; р<0,05).

Рисунок 1. Содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови у больных ВИЧ-инфекцией

Установлена зависимость отличия содержания уровня СМП в плазме крови больных ВИЧ-инфекцией, с сопутствующим туберкулезом легких. Так, в группе больных ВИЧ-инфекцией у больных ВИЧ-инфекцией с туберкулезом легких в стадиях первичных проявлений, в латентную и вторичных заболеваний уровень СМП был достоверно выше, чем у больных без сопутствующей патологией (1,35±0,04 и 1,66±0,03: 1,32±0,02 и 1,61±0,03 соответственно). При этом через 6 месяцев от начала базис-терапии уровень СМП в группе больных ВИЧ с туберкулезом легких был значительно выше и не возвращался к норме (1,29±0,02) (рис. 1).

Указанные динамические изменения СМП плазмы крови при ВИЧ-инфекции носят однонаправленный и неспецифический характер с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний. Выраженные сдвиги СМП плазмы крови в группах больных с наркоманией, ко-инфекцией ВИЧ и вирусных гепатитов, при обострении сопутствующих заболеваний вероятно связанно с эффектом суммарного воздействия текущего инфекционного процесса.

Наблюдаемые динамические изменения СМП в плазме крови при ВИЧ-инфекции свидетельствуют об уровне эндогенной интоксикации, углубляют представления о патогенезе ВИЧ-инфекции и позволяют использовать исследование показателей СМП в плазме крови как диагностический и прогностический критерий.

Состояние систем про-антиоксидантной защиты крови у больных ВИЧ-инфекцией

Перекисное окисление липидов. Интенсивность липидной пероксидации при ВИЧ-инфекции мы оценивали по содержанию конечного продукта перекисного окисления липидов – малонового диальдегида. Было установлено закономерное возрастание содержания МДА в сыворотке крови с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний.

При угасании клинических симптомов, в результате проводимого лечения наблюдалось достоверное снижение уровня малонового диальдегида, который оставался достоверно выше нормальных показателей даже через 6 месяцев от начала базис-терапии (табл. 5).

Изучение содержания МДА в сыворотке крови у обследованных больных в зависимости от наличия наркомании выявило определенную закономерность. Так, у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией уровень малонового диальдегида был выше, чем у больных без наркомании. Содержание МДА в плазме крови зависело от наличия ко-инфекции. Так, в группе больных ВИЧ-инфекцией и вирусных гепатитов В, С, микст В+С наблюдались более высокие показатели МДА во всех периодах заболевания по сравнению с группой больных ВИЧ-инфекцией протекающей без ко-инфекции вирусных гепатитов.

Изучая содержание МДА в плазме крови у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия туберкулеза легких установлено, что у больных ВИЧ-инфекцией при наличии туберкулеза легких наблюдались более высокие показатели МДА во всех периодах по сравнению с группой больных, у которых ВИЧ-инфекция протекала без обострения туберкулеза.

Таблица 5

Содержание про-антиоксидантных систем крови у больных ВИЧ-инфекцией

Исслед. компонент	Периоды исслед.	n	Xmin-Xmax	X±m	±S	P
МДА	Здоровые	30	0,4-1,9	1,3±0,08	0,3	-
	I	87	1,2-1,8	1,4±0,02	14,2	>0,05
	II	76	1,0-2,8	2,3±0,04	9,7	<0,001
	III	76	3,9-4,9	4,7±0,03	6,5	<0,001
	IV	69	3,8-4,4	4,1±0,03	15,4	<0,001
	V	58	1,1-2,9	2,5±0,02	16,9	<0,001
ЦП	Здоровые	50	345-501	403±4,8	21,1	-
	I	63	388-541	401±3,1	14,2	<0,001
	II	61	343-471	392±2,7	9,2	<0,001
	III	61	302-430	347±2,2	6,7	<0,001
	IV	59	330-469	381±3,7	15,1	<0,001
	V	50	334-504	402±4,6	16,8	>0,05
Каталаза	Здоровые	50	30,1-42,8	41,1±0,07	8,6	-
	I	58	30,1-42,5	40,9±1,03	9,1	>0,05
	II	53	29,8-40,4	39,9±0,84	11,3	<0,001
	III	52	27,9-38,1	36,5±0,93	13,8	<0,001
	IV	48	29,5-40,5	39,8±0,93	15,3	>0,05
	V	33	29,9-42,1	40,2±0,86	16,0	>0,05
СОД	Здоровые	50	0,9-1,5	1,35±0,02	16,0	-
	I	58	0,8-1,6	1,2±0,03	14,2	<0,001
	II	53	0,2-1,3	0,8±0,01	9,1	<0,001
	III	52	0,2-1,0	0,7±0,02	6,5	<0,001
	IV	48	0,3-1,4	0,9±0,02	15,4	<0,001
	V	33	0,5-1,3	1,0±0,03	16,9	<0,001
АОА	Здоровые	30	31,9-57,3	49,1±0,21	7,2	-
	I	58	28,1-39,5	33,6±0,34	11,0	<0,001
	II	53	25,1-35,2	29,1±0,42	10,1	<0,001
	III	52	20,1-31,6	22,4±0,51	9,2	<0,001
	IV	48	24,3-33,1	28,7±0,72	6,9	<0,001
	V	33	26,2-35,8	30,5±0,67	4,1	<0,001

Примечание: P –достоверность различия по отношению к здоровым.

Таким образом, в результате проведенных исследований обнаружено, что при ВИЧ-инфекции происходит повышение интенсивности процессов липидной пероксидации, степень которой зависела от стадии болезни, наличия наркомании, ко-инфекции и обострении сопутствующих заболеваний (табл. 6).

Антиоксидантная система. Скорость свободнорадикального окисления и концентрация свободных радикалов у человека в норме поддерживается на определенном физиологически оправданном уровне антиоксидантной системой, противодействующей процессам запуска и развития свободнорадикальных реакций. При достаточно высоком содержании антиоксидантов в организме образуется лишь небольшое количество продуктов перекисного окисления липидов, участвующих в регуляции сложных физиологических процессов, уменьшение же содержания антиоксидантов в тканях приводят к тому, что продукты перекисного окисления липидов начинают производить вместо физиологического «патологический эффект» (Б.С.Нагоев, М.Ю.Маржохова, 2002). С целью оценки состояния антиоксидантной системы у больных ВИЧ-инфекцией определяли уровень церулоплазмина в плазме крови, активность каталазы эритроцитов, супероксиддисмутазы и общую антиокислительную активность.

Таблица 6

Состояние показателей про- и антиоксидантной систем крови

у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия наркомании, вирусных гепатитов В, С и микст В+С и туберкулеза легких

Группа обследов.	Период иссл.	n	Исследуемый показатель
			МДА, (мкмоль/л)		ЦП, (мг/л)		КА, (мг/л)
			X±m	Р	X±m	Р	X±m	Р
ВИЧ-инфекция без наркомании	З		1,3±0,08	-	403±4,8	-	41,1±0,07	-
	I	32	1,8±0,03	<0,001	400±2,2	>0,05	40,7±1,03	>0,05
	II	31	2,3±0,04	<0,001	392±2,1	<0,001	39,9±0,85	<0,05
	III	27	3,1±0,04	<0,001	355±2,0	<0,001	40,1±1,04	>0,05
	IV	26	2,9±0,02	<0,001	371±0,6	<0,001	39,8±0,93	>0,05
	V	24	2,5±0,03	<0,001	401±4,0	>0,05	40,9±0,86	>0,05
ВИЧ-инфекция с наркоманией	З	50	1,3±0,08	-	403±4,8	-	41,1±0,07	-
	I	55	2,0±0,05	<0,001	396±2,1	>0,05	39,9±1,01	>0,05
	II	49	2,9±0,03	<0,001	381±2,0	<0,001	38,4±0,79	<0,001
	III	49	4,3±0,02	<0,001	342±2,4	<0,001	36,1±0,93	<0,001
	IV	43	3,9±0,06	<0,001	365±1,7	<0,001	38,4±0,91	<0,01
	V	33	3,2±0,02	<0,001	394±3,1	>0,05	40,1±0,86	<0,001
ВИЧ-инфекция с вирусным гепатитом В, С, В+С	З	50	1,3±0,08	-	403±4,8	-	41,1±0,07	-
	I	28	1,9±0,02	<0,001	389±2,3	<0,001	38,7±1,03	<0,05
	II	21	3,1±0,04	<0,001	370±2,1	<0,001	37,1±0,84	<0,001
	III	21	5,3±0,03	<0,001	305±2,0	<0,001	34,5±0,93	<0,001
	IV	19	5,0±0,03	<0,001	362±1,6	<0,001	36,9±0,82	<0,001
	V	18	3,9±0,02	<0,001	393±3,2	>0,05	39,2±0,94	<0,05
ВИЧ-инфекция с туберкулезом легких	З	50	1,3±0,08	-	403±4,8	-	41,1±0,07	-
	I	16	1,9±0,03	<0,001	388±4,3	<0,05	38,7±1,02	<0,05
	II	14	2,8±0,05	<0,001	379±2,5	<0,001	37,0±0,87	<0,001
	III	14	4,7±0,08	<0,001	307±2,1	<0,001	34,5±0,91	<0,001
	IV	14	4,1±0,03	<0,001	372±1,6	<0,001	36,9±0,93	<0,001
	V	13	3,2±0,03	<0,001	398±3,6	>0,05	39,2±0,85	<0,05

Примечание: Р – достоверность различия по отношению к больным ВИЧ-инфекцией без наркомании; без ко-инфекции с вирусными гепатитами В,С и микст В+С и без обострения туберкулеза легких

Церулоплазмин. Было обнаружено снижение исследуемого показателя во всех периодах, с максимальными значениями в стадию вторичных заболеваний.

При проведении комплексных лечебных мероприятий происходит угасание клинических симптомов, а исследуемый показатель повышается, однако даже через 6 месяцев от начала базис-терапии не достигает нормальных величин. Уровень церулоплазмина зависел от наличия наркомании. Так, у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией в период первичных проявлений, в латентную и в стадию вторичных заболеваний снижение содержания церулоплазмина было более выражено, чем без наркомании. В периоде угасания клинических симптомов уровень содержания церулоплазмина нарастал, однако при наличии наркомании изменения были ниже, чем без наркомании, с отсутствием нормализации и через 6 месяцев от начала базис-терапии.

У больных при ко-инфекции ВИЧ и вирусных гепатитов В, С и микст В+С наблюдаются более выраженные изменения содержания церулопдазмина в плазме крови по сравнению с больными ВИЧ-инфекцией без ко-инфекции (табл. 6).

Изучая активность церулоплазмина у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия туберкулеза легких выявлено достоверно более выраженное понижение показателя при наличии обострения туберкулеза легких, по сравнению с группой больных, у которых ВИЧ-инфекция протекала без туберкулеза легких во все периоды исследования, в том числе и через 6 месяцев от начала лечения, когда в группе больных без туберкулеза содержание церулоплазмина было выше, чем у больных при наличии обострения туберкулеза, у которых оставался достоверно пониженным.

Каталаза эритроцитов. Антиоксидантное действие каталазы направлено на разложение перекиси водорода, обладающей мощным цитотоксическим эффектом и интенсифицирующей свободнорадикальное (А.И. Карпищенко, 1999; L.W.Hartz, 1973). Изучая активность внутриклеточного антиоксиданта каталазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией отмечено достоверное снижение активности изучаемого фермента с минимальным значением в стадию вторичных заболеваний.

Изменения активности каталазы в эритроцитах крови больных ВИЧ-инфекцией зависели от наличия наркомании. При этом, более выраженное снижение активности каталазы было у больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией по сравнению без наркомании, что установлено во всех обследуемых стадиях. Через 6 месяцев от начала базис-терапии активность фермента в обеих группах значительно повышается, однако не доходит до нормы и существенно отличается друг от друга.

При исследовании каталазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия ко-инфекции вирусного гепатита В, С, В+С и ВИЧ-инфекции без ко-инфекции наиболее выраженные изменения были в группе больных с ко-инфекцией. В группе больных при наличии сопутствующей патологии такой, как туберкулез легких наблюдалось более выраженные изменения в содержании каталазы эритроцитов (табл. 6).

Супероксиддисмутаза эритроцитов. Изучая активность внутриклеточного антиоксиданта супероксиддисмутазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от периода болезни отмечено достоверное снижение активности изучаемого фермента с минимальным значением в стадию вторичных заболеваний (0,7±0,02; р<0,001). При угасании клинических симптомов активность супероксиддисмутазы повышается (0,9±0,02; р<0,001), однако не нормализуется и остается значительно сниженной даже через 6 месяцев от начала комплексного лечения (1,0±0,03; р<0,001).

Изменения активности супероксиддисмутазы в эритроцитах крови больных ВИЧ-инфекцией зависели от наличия наркомании. При этом, более выраженное снижение активности СОД было при наличии наркомании по сравнению с группой больных без наркомании, что установлено, как в стадию первичных проявлений (1,0±0,03:1,3±0,02; р<0,001), так и стадию вторичных заболеваний (0,5±0,04:0,9±0,03; р<0,001). В стадию субклинических проявлений активность супероксиддисмутазы также была снижена (0,8±0,02:0,9±0,03; р<0,001), что свидетельствовало о прогрессирующем снижении антиоксидантной защиты организма.

Активность СОД у больных ВИЧ-инфекцией зависела от наличии ко-инфекции вирусного гепатита В, С, В+С и ВИЧ-инфекции Так, исследовании СОД у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от наличия ко-инфекции вирусного гепатита В, С, В+С и ВИЧ-инфекции без ко-инфекции наиболее выраженные изменения были в группе больных с ко-инфекцией (рис. 2).

Рисунок 2. Содержание СОД у больных ВИЧ-инфекцией

При исследовании зависимости активности СОД эритроцитов от наличия сопутствующей патологии, такой как туберкулез легких, выявлено достоверно более значительное угнетение активности фермента при наличии туберкулеза легких по сравнению с группой больных, у которых ВИЧ-инфекция протекала без туберкулеза легких во все периоды исследования, в том числе и через 6 месяцев от начала базис-терапии, когда в группе больных без осложнений показатель активности фермента был выше, чем у больных при наличии обострения сопутствующего заболевания, у которых оставался достоверно пониженным.

Антиокислительная активность плазмы крови. Антиоксидантная способность ферментных систем плазмы крови является отражением антиокислительной обеспеченности всего организма, исследовалась общая антиокислительная активность (АОА). У больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от стадии заболевания отмечено достоверное снижение антиокисительной активности с минимальным значением в стадию вторичных заболеваний, что свидетельствовало о прогрессирующем снижении антиоксидантной обеспеченности организма. Через 1 месяц, когда в процессе лечения происходило улучшение общего самочувствия, отмечалась нормализация температуры тела, уменьшение симптомов интоксикации, выявлено повышение АОА по сравнению с предыдущим исследованием, однако даже через 6 месяцев от начала базис-терапии были значительно снижены в сравнении с уровнем здоровых лиц (табл.5).

Таким образом, у обследованных больных ВИЧ-инфекцией наблюдается закономерное повышение активности процессов перекисного окисления липидов на фоне снижения антиоксидантной защиты организма, зависящее от стадии заболевания, тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний, а также полноты проводимых лечебных мероприятий. Максимальные сдвиги отмечены у больных при наличии наркомании, у больных при ко-инфекции ВИЧ и хронических вирусных гепатитов В, С, и микст В+С, у больных ВИЧ-инфекций при обострении сопутствующей патологией, такой как туберкулез легких. Вышеперечисленные факторы влияли как на глубину сдвигов – так и на скорость восстановления.

Применение в комплексном лечении больных ВИЧ-инфекцией антиоксидантного, иммуномодулирующего препарата тамерит

С учетом этих свойств препарата была поставлена цель определить эффективность тамерита в комплексном лечении больных ВИЧ-инфекцией. 25 больным ВИЧ-инфекцией на фоне общепринятой терапии назначали препарат тамерит, обладающий противовоспалительным, иммуномодулирующим и антиоксидантным действием. Исследования проведены в период первичных проявлений (стадию 2А, 2Б, 2В), в стадию вторичных заболеваний (4А, 4Б, 4В), угасания клинических симптомов и в стадию вторичных заболеваний на фоне проводимой базис-терапии (через 6 месяцев от начала АРВ терапии) и тамерита (табл. 7). Его основные функционально-метаболические эффекты обусловлены способностью воздействовать на функционально-метаболическую активность макрофагов, а также нейтрофильных гранулоцитов. Препарат обратимо, на 10-12 часов, ингибирует избыточную продукцию нитросоединений, активных форм кислорода, снижает генерацию свободных радикалов и других противовоспалительных факторов, определяющих степень местных и общих воспалительных реакций и выраженность интоксикации (М.Т. Абидов, 2002; Б.С. Нагоев, 2002), чем объясняется его противовоспалительное и антиоксидантной действие. Тамерит назначали больным по 200 мг 1 раз в день первые 2 дня, затем по 100 мг внутримышечно ежедневно или через день в течение 2 недель. Эффективность препарата оценивали по клинико-биохимическим и иммунологическим показателям, а также при исследовании внутриклеточной вирулоцидной системы лейкоцитов.

Таблица 7

Уровень цитохимических показателей у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от метода лечения (в усл. ед.)

Обследованные	1-я				2-я
	Период исслед.	n	X±m	P	Период исслед.	n	X±m	P	P1
Здоровые		50	179±1,6	-		50	179±1,6	-	-
ГЛ	I	76	181±1,4	>0,05	I	22	180±1,3	>0,05	>0,05
	II	72	189±1,5	<0,001	II	21	185±1,7	<0,001	<0,001
	III	72	209±1,8	<0,001	III	18	194±1,2	<0,001	<0,001
	IV	68	196±1,4	<0,001	IV	17	187±1,5	<0,001	<0,001
	V	52	185±1,1	<0,001	V	16	180±1,0	<0,001	<0,001
Здоровые		50	123±1,8	-		50	123±1.8	-	-
КБ	I	85	121±1,2	>0,05	I	22	122±1,0	>0,05	>0,05
	II	72	101±1,3	<0,001	II	21	109±1,4	<0,001	<0,001
	III	72	87±1,1	<0,001	III	18	91±1,6	<0,001	<0,05
	IV	68	97±1,1	<0,001	IV	17	103±1,7	<0,001	<0,01
	V	52	111±0,9	<0,001	V	16	116±1,1	<0,001	<0,001
Здоровые		50	203±1,3	-		50	203±1,3	-	-
МП	I	85	192±0,5	<0,001	I	22	195±1,9	<0,001	>0,05
	II	77	179±1,1	<0,001	II	21	184±1,4	<0,001	<0,001
	III	72	151±0,6	<0,001	III	18	153±0,7	<0,001	<0,01
	IV	68	172±1,4	<0,001	IV	17	179±0,9	<0,001	<0,001
	V	52	191±0,3	<0,001	V	16	194±1,0	<0,001	<0,01
Здоровые		50	62±1,5	-		50	62±1,5	-	-
КФ	I	58	74±1,7	>0,05	I	22	65±1,9	<0,001	<0,001
	II	57	80±1,54		II	21	73±1,6	<0,001	<0,001
	III	57	138±0,9	<0,001	III	18	125±2,0	<0,001	<0,001
	IV	49	110±1,3	<0,001	IV	17	92±2,1	<0,001	<0,001
	V	45	81±1,2	<0,001	V	16	76±1,9	<0,001	<0,05
Здоровые		50	25±2,3	-		50	25±2,3	-	-
ЩФ	I	58	33±2,9	<0,05	I	22	26±1,9	>0,05	>0,05
	II	58	47±2,0	<0,001	II	21	39±1,8	<0,001	<0,001
	III	57	135±1,3	<0,001	III	18	123±1,7	<0,001	<0,001
	IV	49	98±2,2	<0,001	IV	17	77±2,1	<0,001	<0,001
	V	45	56±2,6	<0,001	V	16	48±2,0	<0,001	<0,05
Здоровые		50	12±0,9	-		50	12±0,9	-	-
НСТ-тест	I	58	16±0,9	<0,001	I	22	13±1,0	>0,05	<0,05
	II	58	23±0,8	<0,001	II		19±0,9	<0,001	<0,001
	III	57	42±0,7	<0,001	III	18	37±0,9	<0,001	<0,001
	IV	49	34±0,6	<0,001	IV	17	30±1,1	<0,001	<0,001
	V	45	28±0,6	<0,001	V	16	21±1,3	<0,001	<0,001

Примечание:1-я группа – больные получившие базис терапию; 2-я группа – больные получившие базис терапию + тамерит. Р- достоверность различия по отношению к группе здоровых, Р1-по отношению к получившим только базисную терапию;

Иммуномодулирующие свойства тамерита проявляются в восстановлении нормальной антиген-презентирующей функции клеток моноцито-макрофагального ряда, стимуляции микробицидной системы нейтрофилов и цитотоксической активности естественных киллеров, иммунокоррегирующим действием в отношении клеточного и гуморального иммунитета. По данным некоторых авторов (М.Т. Абидов, С.Г. Пак и др. 2002; В.И. Лучшев, Л.И. Созданова, 2002; Б.С. Нагоев с соавт., 2002) препарат повышает резистентность организма к инфекционным заболеваниям.

В результате клинических наблюдений мы отметили сокращении продолжительности клинических симптомов, интоксикации. Соответственно у больных ВИЧ-инфекцией, получивших в комплексной терапии тамерит, восстановление содержания внутриклеточного катионного белка, активности миелопероксидазы происходило быстрее, чем при использовании базис+терапии (табл.7).

Таблица 8

Уровень про-антиоксидантных систем у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от метода лечения (в усл. ед.)

Обследованные	1-я				2-я
	Период исслед.	n	X±m	P	Период исслед.	n	X±m	P	P1
Здоровые		50	1,3±0,08			50	1,3±0,08	-	-
МДА	I	58	1,7±0,02	>0,05	I	22	1,5±0,03	>0,05	<0,05
	II	57	2,3±0,04	<0,001	II	18	1,9±0,02	<0,001	<0,001
	III	57	4,7±0,03	<0,001	III	18	3,7±0,07	<0,001	<0,001
	IV	49	4,1±0,03	<0,001	IV	17	3,1±0,03	<0,001	<0,001
	V	45	2,5±0,02	<0,001	V	16	1,8±0,05	<0,001	<0,001
Здоровые		50	41,1±0,07	-		50	41,1±0,07	-	-
КА	I	58	39,9±1,03	<0,001	I	22	39,9±1,01	<0,001	>0,05
	II	57	38,5±0,91	<0,001	II	18	38,9±0,83	<0,001	<0,001
	III	57	36,5±0,85	<0,001	III	18	36,9±0,87	<0,001	>0,05
	IV	49	38,2±0,93	<0,001	IV	17	38,6±0,82	<0,001	>0,05
	V	45	39,0±0,86	<0,05	V	16	39,9±0,91	<0,05	>0,05
Здоровые		50	1,35±0,02	-		50	1,35±0,02	-	-
СОД	I	58	1,1±0,03	<0,001	I	22	1,3±0,04	<0,001	<0,001
	II	57	0,8±0,04	<0,001	II	18	0,9±0,03	<0,001	<0,001
	III	57	0,6±0,02	<0,001	III	18	0,7±0,07	<0,001	>0,05
	IV	49	0,8±0,02	<0,001	IV	17	0,9±0,03	<0,001	<0,05
	V	45	0,9±0,03	<0,05	V	16	1,1±0,04	<0,05	<0,05

Примечание: Р- достоверность различия по отношению к группе здоровых, Р1-по отношению к получившим только базисную терапию.

Такие же данные были получены при исследовании гликогена, активности кислой и щелочной фосфатаз лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Сравнение показателей спонтанного НСТ-теста нейтрофильных лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекций в зависимости от проведенного лечения показало, что у больных ВИЧ-инфекцией получивших тамерит уменьшение показателей наступало раньше, чем у тех лиц, которые получали только базисную терапию.

Содержание СМП в плазме крови снижалось значительно в более ранние сроки. При угасании клинических симптомов в опытной группе мы зарегистрировали нормализацию показателей эндогенной интоксикации в плазме крови, тогда как в контрольной они оставались достоверно выше нормы.

У больных получивших тамерит, происходила более быстрая нормализация уровня МДА, СОД, КА эритроцитов и иммунологических показателей по сравнению с контрольной (табл. 8).

Применение тамерита в комплексной терапии при наличии ко-инфекции ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитов В, С и микст В+С заметно повлияло на содержание в плазме крови среднемолекулярных пептидов, тем самым уменьшив проявления эндотоксикоза. Снижение в плазме крови продуктов перекисного окисления липидов, в частности, малонового диальдегида, повышение антиоксидантной активности и иммунологических показателей указывало на усиление защиты клеток от мембранодеструктивного действия как самих вирусов, так и патологических биохимических и иммунологических процессов, которые они запускают.

Из вышеизложенного следует, что проведенные клинико-биохимические, иммунологические исследования, а также изменение параметров функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов, про- и антиоксидантной защиты организма свидетельствует о достаточно хорошей эффективности применения тамерита в комплексной терапии ВИЧ-инфекции, особенно в случаях, когда ВИЧ-инфекция протекает на фоне неблагоприятного преморбидного фона, таких как ко-инфекции с парентеральными вирусными гепатитами.

Таким образом, комплекс исследований использованных в работе дают обширную дополнительную информацию о развитии патологического процесса при ВИЧ-инфекции. Поражение иммунной системы при ВИЧ-инфекции носит системный характер, проявляясь глубокой супрессией, Т- и В – звеньев клеточного иммунитета. В ходе развития ВИЧ-инфекции происходят закономерные изменения гиперчувствительности немедленного и замедленного типа, гуморального иммунитета и факторов неспецифической защиты, функциональной активности лимфоцитов и моноцитов/макрофагов. Снижение естественной резистентности организма способствует развитию иммунодефицита и тяжелейших форм заболевания. Резко выраженные и стойкие изменения функционально-метаболической активности лейкоцитов в динамике ВИЧ-инфекции являются свидетельством глубоких изменений в организме, прогностически неблагоприятным признаком. При ВИЧ-инфекции происходит накопление токсических веществ, что является толчком к развитию синдрома интоксикации, обменных нарушений на уровне клетки, нарушением ферментативных и гуморальным изменениям. Уменьшение содержания антиоксидантов в плазме крови и тканях (уменьшение антиоксидантной защиты организма) приводит к тому, что продукты перекисного окисления липидов начинают производить вместо физиологического патологический эффект. При этом отклонения тесно связаны с перестройкой клеточных и гуморальных систем, в своей совокупности составляющих единый патофизиологический комплекс важных реакций организма на действие инфекционного агента.

Изучение в клинической медицине патологических состояний на клеточном уровне, в частности структурно-функциональными изменениями клеточных мембран, показателей функционально-метаболической активности лейкоцитов, перекисное окисление липидов и антиоксидантной системы дает возможность направленного регулирования свободнорадикального окисления, рациональной коррекции выявленных нарушений антиоксидантными препаратами (Ю.А. Владимиров, 1987).

Выводы:

1. Изменения функционально-метаболической активности лейкоцитов при ВИЧ-инфекции носят неспецифический характер, являясь объективным критерием состояния естественной резистентности организма.
2. У больных ВИЧ-инфекцией выявлены разнонаправленные сдвиги в содержании компонентов вирулоцидной системы нейтрофильных лейкоцитов: угнетение активности миелопероксидазы, снижение уровня катионного белка и липидов, при одновременном повышении активности щелочной, кислой фосфатаз и содержания гликогена. У больных ВИЧ-инфекцией выявлено закономерное и продолжительное повышение показателей НСТ-теста нейтрофильных лейкоцитов. Сдвиги показателей функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов зависят от стадии патологического процесса: они максимально выражены на высоте патологического процесса – в стадию вторичных заболеваний.
3. Комплекс проведенных цитохимических исследований у больных ВИЧ-инфекцией позволил установить достоверную зависимость глубины нарушений функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов от наличия наркомании, ко-инфекции и обострения сопутствующих хронических заболеваний: наиболее выраженные отклонения указанных показателей наблюдались в группе больных ВИЧ-инфекцией с наркоманией, при ко-инфекции ВИЧ и вирусного гепатита В, С и В+С и диссеминированных формах туберкулеза легких. По мере угасания клинических симптомов показатели этой активности не нормализуются даже, через 6 месяцев от начала комплексной терапии, что, вероятно, является показателем незавершенности патологического процесса при данных инфекциях
4. При ВИЧ-инфекции закономерные изменения среднемолекулярных пептидов плазмы крови носят однонаправленный и неспецифический характер. При этом наблюдается повышение уровня среднемолекулярных пептидов плазмы крови с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний. По мере угасания клинических симптомов, на фоне проводимой комплексной терапии происходит снижение уровня среднемолекулярных пептидов, однако без нормализации данного показателя даже через 6 месяцев от начала базис-терапии.
5. При ко-инфекции ВИЧ и вирусных гепатитов, а также при наличии сопутствующих заболеваний инфекционно-воспалительной природы наблюдалось значительное повышение уровня среднемолекулярных пептидов, что свидетельствовало о формировании дополнительного очага эндогенной интоксикации. У больных ВИЧ-инфекцией протекающей на фоне наркомании, отмечена волнообразная динамика изменений уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови, и нормализация показателя происходила медленнее.
6. У больных ВИЧ-инфекцией определение концентрации среднемолекулярных пептидов в плазме крови может служить дополнительным маркером интоксикационного синдрома, а также вспомогательным диагностическим и прогностическим тестом.
7. У больных ВИЧ-инфекцией выявлено закономерное повышение уровня малонового диальдегида в плазме крови, зависящее от стадии, клинического течения, наличия наркомании, обострения сопутствующей патологии, что свидетельствует о возрастании активности процессов перекисного окисления липидов при этих заболеваниях.
8. У больных ВИЧ-инфекцией обнаружено угнетение антиоксидантной защиты, с минимальным значением в стадию вторичных заболеваний, это происходит на фоне высокого уровня продуктов перекисного окисления липидов, что очевидно обусловлено истощением компенсаторных возможностей организма.
9. Закономерные изменения показателей прооксидантной системы и антиоксидантной защиты организма в динамике ВИЧ-инфекции можно использовать в качестве дополнительного критерия тяжести процесса, прогноза развития тяжелых форм заболевания, а также в качестве критерия полноты и эффективности проводимых методов лечения.
10. Включение иммуномодулирующего, антиоксидантного препарата тамерита в патогенетическую терапию при ВИЧ-инфекции, особенно в случаях ко-инфекции с парентеральными гепатитами вызывает положительную динамику интенсивности ПОЛ и АОЗ, улучшению показателей неспецифической резистентности организма и назначение его является целесообразным, что позволяет быстрее купировать клинические симптомы, вызванные эндогенной интоксикацией.

Практические рекомендации

1. Цитохимические исследования внутриклеточных компонентов нейтрофильных лейкоцитов: активности миелопероксидазы, кислой и щелочной фосфатаз, содержания катионного белка, липидов и гликогена, а также активности спонтанного НСТ-теста являются весьма информативными показателями функционального состояния нейтрофильных гранулоцитов у больных ВИЧ-инфекцией, в связи с чем могут быть использованы как один из тестов для оценки состояния неспецифической резистентности, стадии болезни, наличия ко-инфекций и обострения сопутствующих заболеваний, полноты проводимых лечебных мероприятий.
2. Определение среднемолекулярных пептидов в плазме крови у больных ВИЧ-инфекцией в качестве маркеров эндогенной интоксикации может быть использовано для оценки эндогенной интоксикации организма, стадии, степени тяжести заболевания и полноты лечения. Значительно выраженные изменения уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови свидетельствуют о тяжелом течении болезни, возможном присоединении осложнений или возникновении новых очагов воспаления.
3. У больных ВИЧ-инфекцией определение уровня малонового диальдегида, общей антиокислительной активности плазмы крови, церулоплазмина, супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов может служить показателем активности перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Сабанчиева Ж.Х. Клинико-эпидемиологические особенности ВИЧ-инфекции в Кабардино-Балкарской Республике//Успехи современного естествознания.-2004.-№4.-С. 36.
2. Сабанчиева Ж.Х. Состояние активности антиоксидантного фермента СОД эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. науч.-практ. конф. «Узловые вопросы борьбы с инфекцией», Санкт-Петербург, 2004.-С.210.
3. Сабанчиева Ж.Х. Активность церулоплазмина в сыворотке крови у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. науч. конф. «Успехи современного естествознания» //Фундаментальные исследования.-2004.-№5.-С.128.
4. Сабанчиева Ж.Х. Определение активности каталазы эритроцитов – как показатель антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией.//Успехи современного естествознания.-2004.-№8.-С.69.
5. Сабанчиева Ж.Х. Состояние внутриклеточных компонентов лейкоцитов при ВИЧ-инфекции. Сб. науч. трудов молодых ученых. Нальчик.-2005.-С.196.
6. Динамика показателей эндотоксикоза у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. VI Общероссийской науч. конф. с междун. участием «Гомеостаз и инфекционный процесс»//Успехи современного естествознания.-2005.-№7.-С45.
7. Сабанчиева Ж.Х. Оценка состояния антиоксидантной системы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. II науч. конф. студентов и молодых ученых «Научное студенческое сообщество и современность»//Успехи современного естествознания.-2005.-№8.-С.90.
8. Сабанчиева Ж.Х. Свободнорадикальное окисление липидов у больных ВИЧ-инфекцией с заболеваниями легких. Матер. науч. конф. «Молодых ученых, специалистов и студентов»//Фундаментальные исследования.-2005.-№5.-С.114.
9. Сабанчиева Ж.Х. Значение определения средних молекул в плазме крови у больных ВИЧ-инфекцией. II Выпуск серии сборников «Естествознание и гуманизм».Томск.-2005.-Том 2.-С.40.
10. Сабанчиева Ж.Х. Современные подходы к лабораторной диагностике свободнорадикальных процессов при ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитах В и С. Матер. науч. конф. «Диагностика, терапия, профилактика социальнозначимых заболеваний человека»//Фундаментальные исследования.-2005.-№8.-С.99-100.
11. Сабанчиева Ж.Х. Использование показателей оксидантного и антиоксидантного статуса для лабораторного мониторинга ВИЧ-инфекции. Матер. науч. конф. «Успехи современного естествознания»-Сочи-Дагомыс //Успехи современного естествознания.-2005.-№10.-С.76.
12. Сабанчиева Ж.Х. Диагностика и значение антиоксидантного статуса при ВИЧ-инфекции. Матер. науч. конф. «Проблемы морфологии. Теоретические и клинические аспекты»-Астрахань//Успехи современного естествознания.-2005.-№12.-С.90.
13. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Перекисное окисление липидов и состояние антиоксидантной активности при ВИЧ-инфекции на фоне вирусного гепатита В и С //Доклады АМАН.-2005.-№2.-С.118-122.
14. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Состояние системы перекисного окисления липидов у больных ВИЧ-инфекцией протекающей в сочетании с туберкулезом //Известие Кабардино-Балкарского центра РАН.-2005.-№2(14).-С.113-118.
15. Сабанчиева Ж.Х. Показатели свободнорадикального окисления у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. междун. конф.-Тенерифе //Современные наукоемкие технологии.-2005.-№10.-С.60.
16. Сабанчиева Ж.Х. Изменение показателей системы антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией. Сборник науч. трудов молодых ученых: «Достижение медицинской науки – практическому здравоохранению». Нальчик, 2005.-С.95.
17. Сабанчиева Ж.Х. Патогенетическая значимость свободнорадикальных процессов у больных ВИЧ-инфекцией. Там же. С.96.
18. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Состояние перекисного окисления липидов у больных ВИЧ-инфекцией//Эпидемиология инфекционных болезней.-2006.-№6.-С.54-56.
19. Сабанчиева Ж.Х. Состояние фагоцитарной системы крови в НСТ-тесте у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. Юбилейной конф. Российской академии естествознания «Современные проблемы науки и образования»//Успехи современного естествознания.-2006.-№3.-С.44-45.
20. Сабанчиева Ж.Х. Состояние активности супероксиддисмутазы, церулоплазмина, малонового диальдегида в плазме крови и каталазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. юбилейной науч.-практ. конф. «Инфекционные болезни: проблемы здравоохранения и военной медицины». Санкт-Петербург, 2006.-С.265-266.
21. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Характеристика перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности крови у больных ВИЧ-инфекцией.-Там же. С.225.
22. Сабанчиева Ж.Х. Изменение показателей антиоксидантной защиты и свободнорадикального окисления у больных ВИЧ-инфекцией с септическими состояниями. Матер. междун. науч.-прак. конф. «Сепсис проблемы диагностики и профилактики». Харьков, 2006.-С.203.-204.
23. Сабанчиева Ж.Х. Состояние антиоксидантной системы крови у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. VII Российского съезда инфекционистов. Нижний Новгород, 2006.-С.180.
24. Сабанчиева Ж.Х. Состояние системы «ПОЛ-антиоксиданты» у больных ВИЧ-инфекцией с различными вариантами течения и пути ее коррекции. Матер. Всероссийской науч. конф. аспирантов и молодых ученых «Перспектива-2006», Нальчик.-Т.3.-С.67-68.
25. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Активность перекисного окисления липидов и антиоксидантных ферментов у больных ВИЧ-инфекцией с заболеваниями кожи и слизистых оболочек.//Вестник КБГУ. Сер. Медицинские науки. Выпуск 9. Нальчик-КБГУ, 2006.-С.68-70.
26. Сабанчиева Ж.Х. Антиоксидантная система при критических состояниях у больных ВИЧ-инфекцией. Сб. трудов V-й междун. конф. «Обмен веществ при адаптации и повреждении».-Ростов- на- Дону.-2006.-С.174.
27. Сабанчиева Ж.Х. Состояние системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных ВИЧ-инфекцией//Известие Кабардино-Балкарского центра РАН».-2006.-№2(16).-С.107-111.
28. Сабанчиева Ж.Х. Варианты течения и пути коррекции бронхолегочной патологии у больных ВИЧ-инфекцией//Доклады АМАН.-2006.-Том 8.-№2.-С.151-155.
29. Сабанчиева Ж.Х. Особенности течения хронического гепатита С у ВИЧ-инфицированных. Матер. II-й Южнороссийской науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы инфекционной патологии Юга России». Ростов-на-Дону-Майкоп.-2006.-С.91-93.
30. Сабанчиева Ж.Х. Особенности клинического течения туберкулеза у ВИЧ-инфицированных//Успехи современного естествознания.-2006.-№8.-С.84.
31. Сабанчиева Ж.Х. Клиническое течение ВИЧ-инфекции. Матер. науч. конф. «Диагностика, терапия, профилактика социально-значимых заболеваний человека» -Турция //Успехи современного естествознания.-2006.-№8.-С.84.
32. Сабанчиева Ж.Х. Септические поражения легких у ВИЧ-инфицированных наркоманов. Матер. V науч. конф. «Практикующий врач»-Италия //Фундаментальные исследования.-2006.-№6.-С.44.
33. Сабанчиева Ж.Х. Лабораторные критерии тяжести эндотоксикоза у больных ВИЧ-инфекцией с гнойно-септическими осложнениями. Матер. науч. конф. «Современная медицина и проблемы экологии»-Болгария //Современные наукоемкие технологии.-2006.-№6.-С.41-42.
34. Нагоев Б.С. Сабанчиева Ж.Х. Прогностическое значение интегрального показателя перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. VI Съезда аллергологов и иммунологов СНГ. Российский нац. конгресс аллергологов и иммунологов. //Аллергология и иммунология.- Москва.-2006.-Т.7.-№3.-С.405-406.
35. Сабанчиева Ж.Х. Прогностическое значение интегрального показателя дисбаланса перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. II науч. конф. «Современные наукоемкие технологии»–Испания //Современные наукоемкие технологии.-2006.-№7.-С.60.
36. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. ВИЧ-инфекция: некоторые клинико-цитохимические и патогенетические аспекты, Нальчик.-2006.-151с.(Монография).
37. Нагоев Б.С. Сабанчиева Ж.Х. Перекисное окисление липидов и состояние системы антиоксидантной защиты у больных ВИЧ-инфекцией //Инфекционные болезни.-2007.-№1.-С.33-35.
38. Сабанчиева Ж.Х. Состояние системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты крови при использовании тамерита в комплексном лечении ВИЧ-инфекции. Матер. III конф. «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине»-Греция //Фундаментальные исследования.-2006.-№9.-С.57-58.
39. Сабанчиева Ж.Х. Изменение окислительного метаболизма и состояние антиоксидантной системы у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. науч. конф. «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии»-ОАО, Дубаи //Фундаментальные исследования. -2006.-№11.-С.63.
40. Нагоев.Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Антиоксидантные и пероксидантные параметры крови, их патогенетическое и диагностическое значение у больных ВИЧ-инфекцией //Эпидемиология и инфекционные болезни.-2007.-№2.-С.48-51.
41. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Эффективность применения тамерита в комплексной терапии ВИЧ-инфекции//Инфекционные болезни.-2007.-Т.5.-№2.-С.79-81.
42. Сабанчиева Ж.Х. Интенсивность перекисного окисления липидов у больных ВИЧ и вирусного гепатита С//Вестник новых медицинских технологий.-Тула.-№4.-С.73-75.
43. Нагоев Б.С. Сабанчиева Ж.Х. Содержание перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности ферментов у больных ВИЧ-инфекцией при различных путях заражения. Матер. V-го Всемирного конгресса по иммунопатологии аллергии//Аллергология и иммунология.- Москва -2007.-Т.8.-№1.-С.101.
44. Сабанчиева Ж.Х. Клинико-иммунологические критерии в диагностике оппортунистических заболеваний при ВИЧ-инфекции. Сбр. матер. юбил. всерос. науч. конф. с междун. участием посвященная 175-летию со дня рождения С.П. Боткина.-Санкт-Петербург.-2007.-С.275-276.
45. Сабанчиева Ж.Х. Ферментативная активность лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. III конф. «Современные наукоемкие технологии»-Доминиканская республика //Современные наукоемкие технологии.-2007.-№5.-С.37-38.
46. Сабанчиева Ж.Х. Состояние неспецифической резистентности у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. IV науч. конф. «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии»-Индия (Гоа)//Фундаментальные исследования.-2007-№7-С.33.
47. Сабанчиева Ж.Х. Состояние средних молекул для оценки эндогенной интоксикации у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. II науч. конф. «Актуальные проблемы науки и образования»-Куба //Фундаментальные исследования.-2007.-№4.-С.89-90.
48. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Определение уровня перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности в оценке эндогенной интоксикации у больных ВИЧ-инфекцией//Известие высших учебных заведений. Поволжский регион. Пенза, Медицинские науки.-2007.-№2.-С.71-76.
49. Сабанчиева Ж..Х. Цитохимический профиль нейтрофильных лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. V науч. конф. «Гомеостаз и эндоэкология»-Египет (Хургада)// Современные наукоёмкие технологии.-2007.-№7.-С.96.
50. Сабанчиева Ж.Х. Состояние внутриклеточных компонентов лейкоцитов при вирусных инфекциях. Матер. Всероссийской науч. конф. аспирантов и молодых ученых «Перспектива-2007», Нальчик. -Т.4.-С.137-138.
51. Сабанчиева Ж.Х. Состояние функционально-метаболической активности лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. В книге: «Естествознание и гуманизм. Актуальные вопросы молекулярных основ и биологических препаратов».- Томск.-2007.-С.35.
52. Сабанчиева Ж.Х. Общая антиокислительная активность у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. V науч. конф. «Гомеостаз и инфекционный процесс»-Москва //Успехи современного естествознания.-2007.-№7.-С.62-63.
53. Сабанчиева Ж.Х. Антиоксиданты при ко-инфекции ВИЧ-инфекции и герпеса. Матер. III конгресса «Практикующий врач»-Сочи //Успехи современного естествознания.-2007.-№6.-С.101.
54. Сабанчиева Ж.Х. Цитохимия катионного белка нейтрофилов у больных ВИЧ-инфекцией. Сборник науч. трудов молодых ученых: «Достижение медицинской науки – практическому здравоохранению». Нальчик: КБГУ- 2007.-С.111-112.
55. Нагоев Б.С., Сабанчиева Ж.Х. Изменение ферментативной активности лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Сборник науч. трудов молодых ученых: «Достижение медицинской науки – практическому здравоохранению». Нальчик: КБГУ- 2007.-С.92-93.
56. Сабанчиева Ж.Х. Показатели активности кислой и щелочной фосфатаз нейтрофильных лейкоцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Матер. VIII междун. конгресса молодых ученых «Науки о человеке», Томск.-2007.-С.61.