WWW.DISUS.RU

БЕСПЛАТНАЯ НАУЧНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 

Лечение огнестрельных ран мягких тканей с использованием микрокапсулированной формы серотонин адипината и nо-терапии (экспериментальное исследование)

На правах рукописи

ЧМУНЕВИЧ АРКАДИЙ АРКАДЬЕВИЧ

ЛЕЧЕНИЕ ОГНЕСТРЕЛЬНЫХ РАН МЯГКИХ ТКАНЕЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МИКРОКАПСУЛИРОВАННОЙ ФОРМЫ СЕРОТОНИН АДИПИНАТА И NО-ТЕРАПИИ

(экспериментальное исследование)

14.00.27-хирургия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва - 2008

Работа выполнена в Государственном научно-исследовательском испытательном институте военной медицины МО РФ.

Научные руководители: доктор медицинских наук

Шин Федор Евгеньевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Хрупкин Валерий Иванович

доктор медицинских наук, профессор

Афанасьев Александр Николаевич

Ведущая организация Государственный институт

усовершенствования врачей МО РФ

Защита диссертации состоится «____»________ 2009 г. в __часов на заседании диссертационного совета Д.208.040.03 при Московской Медицинской Академии имени И.М. Сеченова (119991, г. Москва ул. Трубецкая, д.8, стр.2).

С диссертацией можно ознакомиться ГНЦМБ ГОУ ВПО Московская медицинская Академия имени И.М. Сеченова (117998, г. Москва, Нахимовский проспект, д.49)

Автореферат разослан «_____» ________ 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Шулутко Александр Михайлович

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Изменившиеся военно-политические условия в мире, обусловили значительное снижение опасности возникновения крупномасштабных военных конфликтов. В то же время, локальные войны характеризуются тенденцией к большему расширению и углублению. Результаты оказания помощи раненым в Афганистане и Чечне подтвердили общую закономерность войн последних десятилетий – значительное возрастание в структуре боевой хирургической патологии числа множественных и сочетанных поражений. Согласно данным литературы, удельный вес раненых с упомянутыми повреждениями составляет от 25% до 62% [Брюсов П.Г., 1993; Ерюхин И.А. с соавт. 1992; Косачев И.Д., Кудрявцев Б.П., 1996], а самым серьёзным осложнением огнестрельных ран остается гнойная инфекция. Показано, что в 28% случаев огнестрельные ранения осложняются гнойно-инфекционными процессами. При этом существенная роль отводится эндогенной инфекции, что связано с мощным воздействием на организм снарядов с высокой кинетической энергией [Бурлакова Е.Б. с соавт., 1984; Дерябин И.И., Рожков А.С., 1984; Фенчин К.М., 1979].

Для лечения раневой инфекции и стимуляции репаративных процессов в огнестрельных ранах предложено значительное количество средств и методов. С этой целью применяются как биологически активные раневые покрытия, так и физические способы локального воздействия на рану (создание абактериальной среды, лазеротерапия, ФДТ и т.д.) [Толстых П.И., 2003; Дербенев В.А. и соавт. 2008; Шин Ф.Е. и соавт. 2008; и др.]. Однако, упомянутые методы на этапах оказания квалифицированной медицинской помощи, применяются крайне редко в связи с относительной дороговизной, малой эффективностью и технической сложностью выполнения.

Поэтому проведение научных исследований, направленных на улучшение результатов лечения огнестрельных ран на основе современных достижений науки является актуальной.

Новые возможности в повышении качества помощи раненым открываются в связи с появившимися сообщениями о патогенетической оправданности применения в лечении огнестрельных ран и профилактике раневых осложнений биологически активных веществ (БАВ) в форме микрокапсул, антиоксиданта серотонина и NO-терапии, как общего и местного фактора регуляции свободно-радикальных процессов, оказывающих противовоспалительное и прорегенераторные действия [Ширинский В.Г., 2007; Гаджиев А.И.О 2006].

Одной из причин незначительной эффективности биологически активных перевязочных средств является невозможность создания в течение длительного времени терапевтических концентраций лекарственных препаратов (ЛП) в глубине тканей стенок раневого канала. Устранить этот недостаток можно путем применения методов целенаправленной доставки фармакологических препаратов в ткани использованием транспортных микроконтейнеров на основе биосовместимых и биодеградируемых полимерных частиц, в частности гидроксиапатита кальция (ГАП). Технология микрокапсулирования позволяет изолировать БАВ от влияния окружающей среды, обеспечить запрограммированный выход фармакологических препаратов в раневую среду, сэкономить расход дорогостоящих ЛП и достичь высоких их концентраций в единице объема ткани [Беркутов А.Н., Дыскин Е.А., 1979; Чанг Т.М.С., 1979; Charteres A.C., 1976; Шин Ф.Е., 2004].

Препарат серотонин используется для лечения ран и профилактики нагноений [Будневский С.В., 2006; Гаджиев А.И., 2006; Лебедева М.Ю., 2007] вследствие своей антиоксидантной активности, уменьшающей выработку активных радикалов в клетках поврежденных тканей. Серотонин, являясь биогенным амином, принимает участие в осуществлении ряда важных физиологических функций: передачи нервных импульсов, регуляции моторики желудочно - кишечного тракта, гемостаза и сосудистых реакций. При этом он в разных условиях проявляет как вазоконстрикторное, так и вазодилятаторное действие, что само по себе может влиять на раневой процесс.

В последние годы развивается новое направление отечественной медицины – NO-терапия, основанное на использовании экзогенного оксида азота (NO), генерируемого из атмосферного воздуха плазматронным аппаратом «Плазон». Установлено, что эндогенный NO является универсальным регулятором многообразных физиологических реакций процессов воспаления и регенерации [Шехтер А.Б. с соавт. 1998, 2001; Shekhter A.B. at al., 2005].

В то же время почти нет сведений о влиянии серотонина на микроциркуляторные нарушения и возможности его использования в лечении огнестрельных ран в форме микрокапсул на основе ГАП. Имеющиеся единичные сообщения о положительном влиянии серотонина в форме раствора на процессы воспаления и регенерации не в полной мере раскрывающие механизм его действия. Отсутствуют исследования по применению NO-терапии в комплексном лечении раненых с боевой хирургической травмой. Нет работ, свидетельствующих о возможности сочетанного воздействия упомянутого метода и перевязочного средства на основе диальдегид целлюлозы (ДАЦ) и микрокапсулированной формы серотонина на процессы заживления.

В связи с чем, мы сформулировали цель исследования - улучшить результаты лечения экспериментальных огнестрельных ран путем применения микрокапсулированной форой серотонина, иммобилизованной на диальдегидцеллюлозе и NO-терапией.

Для достижения упомянутой цели определены следующие задачи исследования:

  1. По данным капиллярофотометрических исследований, лазерной допплеровской флоуметрии и прижизненной контактной люминисцентной микроскопии оценить эффективность влияния микрокапсулированной формы серотонина, иммобилизованной на диальдегидцеллюлозе и NO-терапии на состояние микроциркуляции в огнестрельных ранах.
  2. Использованием клинических наблюдений, планиметрических, бактериологических и цитологических исследований провести сравнительное изучение влияния микрокапсулированной формы серотонина и NO-терапии на течение процессов репарации огнестрельных ран у экспериментальных животных.
  3. С помощью гистологического и гистохимического исследований изучить репаративные процессы при заживлении огнестрельных ран под влиянием микрокапсулированной формы серотонина и NO-содержащих газовых потоков (NO-терапии).
  4. По результатам исследований разработать оптимальную методику лечения и профилактики гнойных осложнений огнестрельных ран в эксперименте.

Научная новизна

Впервые в эксперименте на основании анализа результатов капиллярофотометрии, лазерной допплеровской флоуметрии и прижизненной контактной люминисцентной микроскопии изучено влияние иммобилизованной на ДАЦ микрокапсулированной формы серотонина и NO-терапии на состояние микроциркуляции в тканях раневого канала огнестрельных ран у крыс.

Впервые по данным клинических, планиметрических, бактериологических и цитологических исследований доказано, что микрокапсулированная форма серотонина в сочетании с сеансами NO-терапии более эффективно влияет на процессы заживления огнестрельных ран по сравнению с их использованием в отдельности. При этом, уменьшаются микроциркуляторные нарушения, гипоксия тканей, активизируется фагоцитоз, ускоряются сроки очищения ран от некротических тканей, раневого детрита и микроорганизмов, усиливается макрофагальная реакция, активизируется пролиферация фибробластов и создаются оптимальные условия для перехода экссудативной фазы воспаления в пролиферативно-регенеративную.

Выявлено, что лечение огнестрельных ран комплексным использованием микрокапсулированной формы серотонина адипината и NO-терапии является высокоэффективным и патогенетически обоснованным.

Практическая значимость работы

С помощью комплексных морфологических (гистологических, гистохимических), цитологических, бактериологических и патофизиологических (капиллярофотометрия, лазерная доплеровская флоуметрия, прижизненная контактная люминисцентная микроскопия) методов исследований с учетом фаз раневого процесса доказано, что местное применение иммобилизованной на диальдегидцеллюлозе микрокапсулированной формы серотонина в сочетании с сеансами NO-терапии является высокоэффективным и патогенетически обоснованным методом лечения огнестрельных ран крыс. Полученные результаты явились основанием для разработки новых методов лечения раненых в полевых военно-медицинских учреждениях.

Апробация работы

Основные результаты исследования доложены на научно-методическом совете ГНИИИ ВМ МО РФ и ХХХVII научно-практической конференции "Актуальные вопросы авиационной медицины" и ХХХVII научно-практической конференции "Актуальные вопросы авиационной медицины" (г. Москва, 2007 г., 25 мая) и 7-й Всеармейской международной конференции "Актуальные вопросы профилактики, диагностики и терапии хирургической инфекции" (1-2 ноября 2007 г. ЦВДО "Подмосковье"). По результатам исследований опубликовано 8 научных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов. Библиографический указатель содержит 186 литературных источников, из которых 57 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 8 таблицами и 12 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований.

С целью улучшения результатов лечения экспериментальных огнестрельных ран перевязочными средствами на основе микрокапсулированных форм серотонина адипината и мексидола, а так же сеансов NO-терапии в отдельности и в сочетании друг с другом нами проведены экспериментальные исследования и выполнен сопоставимый анализ данных биофизических, цитологических, микробиологических и морфологических исследований.

Микрокапсулированные формы серотонина и мексидола, получали методом вакуумирования пористых микрочастиц на основе гидроксиапатита кальция. Иммобилизацией методом матричной печати упомянутых микрочастиц на перевязочный материал диальдегидцеллюлоза [Шин Ф.Е., 2004] созданы перевязочные средства ДАЦ- серотонин МК и ДАЦ-мексидол МК (на 1 см2 перевязочных материалов наносили по 2 мг серотонина и мексидола соответственно). NO-содержащий газовый поток получали посредством воздушно-плазменного аппарата «Плазон».

Экспериментальные исследования выполнены на белых беспородных крысах массой 250±20 г. в соответствии с требованиями Федерального закона от 01.01.1997 г. "О защите животных от жестокого обращения" и положениями Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 18.03.1986 г.) в Государственном научно- исследовательском испытательном институте ВМ МО РФ. Все животные содержались в одинаковых условиях виварного режима и прошли карантинный отбор.

Распределение экспериментальных животных по сериям опытов представлено в табл. 1.

Таблица 1

Распределение экспериментальных животных

по сериям исследования

Серии опытов Метод исследования Количество животных
1-я серия Исследование особенностей микроциркуляторных нарушений в огнестрельной ране под местным воздействием серотонина и NO-СГП 110
2-я серия Сочетанное применение перевязочных средств ДАЦ-мексидол МК и ДАЦ-серотонин МК в отдельности и в сочетании с NO-СГП в лечении огнестрельных ран 110


В первой серии исследований (110 животных) изучали особенности динамики микроциркуляторных нарушений в огнестрельных ранах под действием серотонина адипината в различных формах (раствор, микрокапсулы) и NO-СГП. Характер микроциркуляторных нарушений оценивали на первые, третьи и пятые сутки наблюдений. В контрольных и опытных группах было по 20 крыс. Интактную группу составили 10 животных без огнестрельных ран. Животные, леченные использованием традиционных методов (перевязочное средство ДАЦ, пропитанные растворами антисептиков и мазью Вишневского) составили контрольную группу. В первой опытной группе местное лечение ран, упомянутым методом, дополнялось внутри брюшинными инъекциями 1 мл 0,1% водного раствора серотонина адипината 1 раз в сутки. При лечении огнестрельных ран второй опытной группы использовали перевязочное средство ДАЦ с 0,1% раствором серотонина (ДАЦ-серотонин), а третьей - ДАЦ, иммобилизованной серотонином в форме микрокапсул (ДАЦ-серотонин МК). Крысы, леченные ДАЦ с растворами антисептиков и мазевыми повязками в сочетании с сеансами NO-СГП, составили третью опытную группу исследований.

Во второй серии экспериментальных исследований на моделях боевой травмы (инфицированные огнестрельные раны) проведены исследования, направленные на определение влияния микрокапсулированной формы серотонина на процессы воспаления в тканях раневого дефекта в отдельности и в сочетании с сеансами NO-СГП. Животные данной серии (110 крыс) были разделены на четыре группы. В опытных группах было по 30 крыс, а в контрольной 20 животных. Лечение огнестрельных ран контрольных животных проводили использованием традиционного метода. Крыс первой опытной группы лечили перевязочным средством ДАЦ-мексидол МК (мексидол в форме микрокапсул, иммобилизованный на перевязочный материал ДАЦ). В лечении животных второй опытной группы использовали перевязочное средство ДАЦ-серотонин МК. В третьей опытной группе местное лечение перевязочным средством ДАЦ-серотонин МК сочетали с обработкой ран теплыми NO-содержащими газовыми потоками.

В опытах использовали модели экспериментальной огнестрельной раны, которую получали следующим образом. Всем животным опытной и контрольной групп за пятнадцать минут до нанесения ранения проводился внутрибрюшинный калипсоловый наркоз, после чего их фиксировали на специальных планшетах. Мягкотканое стандартное огнестрельное ранение наносилось в область средней трети правого бедра крысы из пистолета Марголина (калибр 5,6 мм, начальная скорость полета пули 320 м/сек) с расстояния шесть метров. После нанесения огнестрельной раны производилось щадящее ПХО (рассечение тканей на всю глубину раневого канала без иссечения размозженных тканей) по оси конечности, что является по нашему мнению необходимым элементом в лечении экспериментальных ран.

Клиническая оценка течения раневого процесса у экспериментальных животных производилась с учетом выраженности и продолжительности воспалительных явлений в области раны (отек, гиперемия, инфильтрация параульнарных тканей, количество и характер гнойного отделяемого, сроки появления грануляции и эпителизации, состояние дна и стенок раны, сроки отторжения струпа и полного заживления).

Планиметрическое исследование выполнено с целью определения сроков заживления огнестрельной раны и включало измерение площади раневой поверхности по методу Л.Н. Поповой с определением индекса ускорения заживления.

Цитологическое изучение раневого экссудата выполняли методом мазков-отпечатков раневой поверхности, разработанный М.П. Покровской и М.С. Макаровой. В каждый срок исследования забирали по три мазка-отпечатка из одной и той же области раневой поверхности. Мазки-отпечатки брали при каждой перевязке после предварительного удаления гноя с поверхности ран (в первые, третьи и пятые сутки с момента начала лечения).

В работе изучение процессов регенерации, происходящих в тканях под влиянием применяемых методов лечения, проводили путем морфологического анализа участков раневой поверхности, взятых методом иссечения. Морфологические исследования тканей из области раневого канала огнестрельной раны крыс осуществляли на третьи, пятые и десятые сутки исследования. Биопсийный материал фиксировали в жидкости Корнуа в течение двух часов и заливали в парафин. Срезы толщиной пять-семь микрон окрашивали гематоксилин-эозином, микрофуксином по Ван-Гизону на коллагеновые волокна, фукселином на эластические волокна и импрегнировали серебром по Гомори для выявления аргирофильных структур. Для объективизации результатов гистологических исследований использовали гистохимические методы: окраска толуидиновым синим, выявление глюкозаминогликана и их комплексов с белками (протеингликаны), ПАС-реакция для выявления гликогена и гликопротеинов, реакция Браше для выявления РНК и реакция Фильгена для выявления ДНК в клетках. Гистологические и гистохимические исследования были выполнены под руководством доктора медицинских наук, профессора В.И. Елисеенко в ГНЦ лазерной медицины МЗ РФ.

Микробиологическое исследование выполнили с целью выявления влияния микрокапсулированной формы серотонина и сеансов NO-терапии на степень микробной обсемененности ран. Количественный бактериальный контроль обсеменения изучали методом Е.D. Rotheram на третьи, пятые и десятые сутки с момента начала лечения.

Изучение состояния микроциркуляции в огнестрельных ранах выполняли с помощью капиллярофотометрического исследования, компьютеризированной лазерной флоуметрии и прижизненной контактной люминисцентной микроскопии. Капиллярофотометрическое исследование осуществляли использованием специального устройства (капиллярофотометра) по методике, описанной А.А.Чернецовым. Лазерную доплеровскую флоуметрию проводили с помощью лазерного анализатора кровотока "ЛАКК-01" (НПП "ЛАЗМА", Москва) в комплексе с PC/AT 486. В качестве излучателя в приборе "ЛАКК-01" используется гелий-неоновый лазер типа ЛГИ-207Б с длиной волны 0,63 мкм. В работе применяли прикладную программу Lakk-25, разработанную на основе Фурье-преобразования. Наряду с компьютеризированной лазерной допплеровской флоуметрией для качественной оценки состояния микроциркуляции применен метод прижизненной контактной люминесцентной микроскопии с применением микроскопа МЛ-3 (ЛОМО, Санкт-Петербург). Для проведения исследования животное фиксировали на предметном столике микроскопа и в водной иммерсии, создаваемой постоянно подаваемым 0,9% раствором хлорида натрия, проводили капилляроскопию раны и прилегающих тканей. Суммарное увеличение составило х600. Изучение микроциркуляции в экспериментальных огнестрельных ранах осуществляли совместно с доктором медицинских наук Толстых М.П.

Цифровые данные, полученные в работе, подтверждали методом вариационной статистики. Средние величины показателей (М), их дисперсного (Д), среднеквадратичного отклонения (А), среднеквадратичной ошибки (m) и коэффициент вариации (С) рассчитывали по общепринятым формулам.

По результатам наших исследований проводимые лечебные мероприятия позволяют уменьшить развитие микроциркуляторных нарушений в огнестрельных ранах. Однако эффективность устранения нарушений микроциркуляции находиться в прямой зависимости от применяемых методов лечения. Анализ данных капиллярофотометрии показал, что при использовании традиционных методов значения ИКА к исходу первых суток исследования превышают изначальный на 18%, а на третьи на 29%. Только на пятые сутки наблюдений выявляется тенденция к снижению изучаемого показателя (148,5±0,9 условных единиц).

Применение в лечебных целях серотонина адипината в различных формах и NO-СГП более эффективно воздействовало на процессы развития микроциркуляторных нарушений (рис. 1). Через сутки после нанесения огнестрельных ран в опытных группах крыс ИКА был статистически достоверно меньше по сравнению с контролем (126±0,9 – 131,0,7±1,0 условных единиц, Р<0,05) и в последующем не увеличивался, находясь в пределах от 120±1,2-123±1,3 условных единиц на третьи и 110±1,5-120 ±1,2 условных единиц на пятые сутки наблюдений. Полученные результаты подтверждались данными лазерной доплеровской флоуметрии и прижизненной контактной люминесцентной микроскопии.

 Показатели ИКА в зависимости от сроков лечения и применяемых-0 Рисунок 1. Показатели ИКА в зависимости от сроков лечения и применяемых методов лечения

По нашим данным через трое суток после нанесения травмы в контрольной группе животных нарушения микроциркуляции продолжают сохраняться. Об этом свидетельствовали все изучаемые показатели (ПМ=18,0±0,3 пер. ед.; А=0,1±0,02 пер. ед. и F=11,1±1,5 мин-1).

В то же время, у крыс, лечение которых осуществляли путем применения внутри брюшинных инъекций серотонина (первая опытная группа), по сравнению с предыдущим сроком исследований, наблюдается уменьшение амплитуды (на 50%) и частоты вазомоции (на 11%). Во второй опытной группе (лечение ДАЦ, пропитанной раствором серотонина) изучаемые показатели не отличались от таковых предыдущего срока наблюдений. В большинстве случаев ПМ был 16,0±0,3 пер.ед. При этом, показатель А не превышал 0,30 пер.ед., а F находился в пределах 9,9 мин-1 (против 16,4 пер. ед., 0,3 пер.ед. и 9,8 мин-1 соответственно). У животных третьей опытной группы (лечение ДАЦ-серотонин МК отмечается значимое уменьшение показателя ПМ (до 13,3±1,1 пер.ед., Р0,05), при одновременном возрастании амплитуды и частоты вазомоции (до 0,7±0,06 пер.ед. и 8,1±1,7 мин-1 соответственно). Результаты исследования представлены в табл. 2.

Таблица 2.

Показатели микроциркуляции на третьи сутки исследований

Группы животных Исследуемые показатели
ПМ (в пер. ед.) А (в пер. ед.) F (в мин-1)
Интактная 6,4±0,3 1,6±0,04 4,3±0,1
Контрольная 18,0±0,3 0,1±0,08 11,1±1,5
1-я опытная 11,7±1,2 0,5±0,07 6,3±2,1
2-я опытная 16,0±0,3 0,3±0,02 9,9±1,5
3-я опытная 13,3±1,1 0,7±0,06 8,1±1,7
4-я опытная 12,2±1,2 0,9±0,04 7,3±1,2

Сеансы NO-терапии обуславливали нормализацию микроциркуляторных нарушений в мягких тканях огнестрельных ран в более короткие сроки. У крыс четвертой опытной группы на третьи сутки наблюдений показатель ПМ был в 1,2 раза меньше по сравнению с предыдущим сроком исследования (12,2±1,2 пер.ед.). При этом амплитуда А не превышала 0,9 пер.ед., а показатель частоты возрастал на 18%, что свидетельствовало об увеличении роли вазомоций в регуляции гемомикроциркуляции. Кроме того, практически во всех случаях увеличение ПМ сопровождалось активно протекающим процессом увеличения числа микрососудов и роста новообразованных капилляров. По данным люминесцентной микроскопии реваскуляризация раны осуществлялась путем постепенного замещения первичной капиллярной сети вторичной микрососудистой сетью. При этом часть капилляров подвергалась редукции и трансформации в артериолы и венулы.

По результатам работы установлено, что наиболее положительное действие на нормализацию микроциркуляции оказывают внутрибрюшинные инъекций 0,1% раствора серотонина по 1 мл один раз в сутки. В этой группе крыс быстрее, чем контрольных и первой опытной купировалась лейкоцитарная реакция, наступала более ранняя пролиферация сосудоформирующих клеток, происходил гораздо более быстрый рост капилляров. Уже на пятые сутки наблюдений восстанавливались структуры микроциркуляторного русла. Использование ДАЦ, пропитанного раствором серотонина, приводило к тем же результатам, но достигались они в значительно более поздние сроки. Лучшие результаты наблюдались в случае использования перевязочных средств на основе микрокапсулированной формы серотонина (ДАЦ-серотонин МК) и сеансов NO-СГП. Следует отметить, что если в основе механизма действия серотонина лежит непосредственное его участие в процессах нормализации микроциркуляторных нарушений (восстановление взаимодействия серотонина с серотониновыми рецепторами гладких мышц), то положительный эффект NO-терапии связан с его стимулирующим действием на репаративные процессы, а так же выраженными бактерицидным и антиоксидантным эффектами.

Клинические наблюдения показали, что микрокапсулированные формы лекарственных препаратов положительно влияет на процессы репарации огнестрельных ран. При этом перевязочное средство ДАЦ-серотонин МК более эффективно по сравнению с ДАЦ-мексидол МК. По результатам планиметрических исследований у животных второй опытной группы средние сроки очищения огнестрельных ран и появление очагов грануляционной ткани регистрируются к исходу шестых суток исследования, что на двое суток раньше по сравнению с крысами, пролеченными перевязочным средством ДАЦ-мексидол МК. Сокращение стадии воспаления закономерно уменьшало сроки заживления ран. В большинстве случаев полное заживление наступало к исходу 25 суток (для сравнения – в первой опытной группе 27,8±1,5 суток).

Эффективность лечения огнестрельных ран у крыс улучшается в случае комплексного применения перевязочного средства ДАЦ-серотонин МК и сеансов NO-СГП. Использование этого метода лечения обуславливает очищение раневой поверхности от девитализированных тканей и развитие полноценных грануляций уже к третьим суткам лечения. При этом заживление ран наступает на 23,6±1,7 сутки с момента нанесения огнестрельной травмы. Положительное действие перевязочного средства ДАЦ-серотонин МК и сеансов NO-терапии объясняется их потенцирующим антигипоксическим и антиоксидантным действием на процессы воспаления и регенерации. Об этом свидетельствуют выявленные отличия в динамике сроков заживления ран: индексы ускорения заживления в группе ДАЦ-серотонин МК - 25% и 33% при его сочетании с NO-СГП. Не в последнюю очередь это связано с бактерицидным влиянием экзогенного NO, подавляющим рост раневой микрофлоры.

Результаты микробиологических исследований показали, что у животных, леченных перевязочным средством ДАЦ-серотонин МК, уменьшение числа микробных тел в единице объема раневого отделяемого до критического уровня (1х105 КОЕ) выявлялось на пятые сутки исследований. В случае применения перевязочного средства ДАЦ-мексидол МК, к данному сроку наблюдений, микробная обсемененность была несколько выше (1х106 КОЕ). До безопасных границ оно снижалось только к десятым суткам лечения.По полученным данным наибольшая эффективность определяется в случае сочетанного использования перевязочного средства ДАЦ-серотонин МК и NO-терапии. Об этом свидетельствовало уменьшение числа микробных тел до критического уровня к исходу третьих суток лечения.

Анализ мазков-отпечатков ран так же свидетельствовал о наличии выраженного положительного действия перевязочных средств на основе микрокапсулированных форм лекарственных препаратов на процессы заживления огнестрельных ран у крыс. По действием ДАЦ-мексидол МК и ДАЦ-серотонин МК уже на пятые сутки наблюдений в раневом экссудате в значительно меньших количествах, по сравнению с контрольными животными, обнаруживались свободнолежащие микроорганизмы, фибрин и дегенеративно измененные клетки (8,9±0,1, Р<0,05). Одновременно с этим, более высоким был уровень содержания незрелых мононуклеарных элементов и макрофагов (3,6±1,2% и 4,6±0,3% соответственно, Р<0,05). В тоже время, комплексное применение перевязочного средства на основе микрокапсулированной формы серотонина и сеансов NО-СГП характеризуется большей биологической активностью. Это доказывается наличием в цитологических препаратах крыс третьей опытной группы на пятые сутки наблюдений не только юных (2,5±0,2%), но и зрелых фибробластов (0,7±0,3%).

По результатам морфологических исследований при лечении огнестрельных ран крыс перевязочными средствами на основе микрокапсулированных форм мексидола и серотонина к пятым суткам лечения в зоне первичного раневого канала выявляется активизация очищения огнестрельной раны от некротизированных тканей, масс фибрина и колоний микроорганизмов. При этом, ДАЦ-серотонин МК характеризуется более выраженным положительным действием на заживление по сравнению с ДАЦ-мексидол МК. В зоне сотрясения слабее выражены признаки расстройства системы микроциркуляторного русла, дистрофические и некротические процессы.

По нашим данным наибольшая эффективность определяется при комплексном применении перевязочного средства ДАЦ-серотонин МК и сеансов NO-СГП. В группе животных, пролеченных данным методом признаки репарации, в виде образования и созревания грануляционной ткани в области вторично некроза зоны сотрясения, развиваются более активно и в более ранние сроки. Можно предположить, что серотонин в форме микрокапсул и местное действие NO-СГП способствуют ослаблению нарушений микроциркуляторного русла, дистрофических и некротических изменений в области повреждения. При этом происходит ограничение развития вторичного некротизирования и восстановление жизнеспособности поврежденных тканей в зоне сотрясения по периферии от первичного раневого канала.

Таким образом, под влиянием микрокапсулированной формы серотонина и, в еще большей степени, при его сочетании с NO-терапией раневой процесс в огнестрельных ранах значительно ускоряется. Это происходит за счет прямого влияния серотонина на нормализацию микроциркуляторных нарушений посредством восстановления автоматизма сократительной способности гладкой мускулатуры стенок микрососудов и положительного эффекта NO-терапии, в основе которого лежат стимуляция репаративных процессов, бактерицидное и антиоксидантное действия.

Выявленные в ходе выполнения работы биофизические, клинические, планиметрические, микробиологические, цитологические и морфологические закономерности заживления огнестрельных ран позволяют говорить о перспективности применения изученных методов лечения, особенно местного применения микрокапсулированой формы серотонина адипината, иммобилизованного на диальдегидцеллюлозе в сочетании с NO-терапией и рекомендовать их для дальнейшего клинического изучения.

Выводы

1. Разработанный в эксперименте и патогенетически обоснованный метод лечения огнестрельных ран мягких тканей путем их обработки NO-содержащими газовыми потоками в сочетании с внутрибрющинными введениями серотонин адипината и местным воздействием на рану микрокапсулированной формой серотонин адипината и мексидола, иммобилизованных на диальдегидцеллюлозе высоко эффективно и может быть рекомендовано к клиническому применению.

2. В эксперименте на крысах с использованием модели огнестрельной раны мягких тканей на основании объективного статистического анализа, морфологических, цитологических и микробиологических данных выявлены выраженные противовоспалительное и прорегенеративное действия серотонина адипината при внутрибоющинном введении и местном использовании в микрокапсулированной форме. Местное применение микрокапсулированной формы мексидола, иммобилизованной на диальдегидцеллюлозе, ускоряет заживление огнестрельных ран мягких тканей на трое суток, а инкапсулированный серотонин адипинат на 6 суток по сравнению с контролем.

3. Ранозаживляющая активность внутрибрющинных введений серотонина адипината усиливается при его сочетании с местным применением в форме микрокапсул, иммобилизованных на диальдегидцеллюлозе. И заметно возрастает при сочетании с экзогенным оксидом азота [NO-терапия огнестрельных ран].

4. Капиллярофотометрия, лазерная доплеровская флоуметрия, прижизненная контактная микроскопия и морфологические исследования показали нормализацию микроциркуляции при комбинированном [серотонин и NO-СГП] лечении огнестрельных ран, а микробиологические исследования выявили снижение количества микрофлоы в раневом отделяемом в процессе заживления ран.

5. В стимуляции заживления и профилактике раневых осложнений большое значение имеет медикаментозное [серотонин внутрибрющинно и местно в форме микрокапсул, иммобилизованных на диальдегидцеллюлозе] лечение и физические факторы [NO-терапия] воздействия на рану.

Список опубликованных работ

1. Медушева Е.О., Будневский С.В., Чудинов К.В., Чмуневич А.А. Некоторые аспекты регуляции воспаления и регенерации при участии биогенного амина серотонина // Сборник научных трудов Научно-исслеледовательского института текстильных материалов – г. Москва, 2006год. – Стр.42-50.

2. Филатов В.Н., Медушева Е.О., Чудинов К.В., Чмуневич А.А. Новые раневые покрытия с антиоксидантной и протеолитической активностью в лечении гнойных ран серотонина // Сборник научных трудов Научно –исследовательского института текстильных материалов –г.Москва, 2006год. –Стр.50-61.

3. Соболенко А.К., Шин Ф.Е., Соболенко Д.А., Васягин С.Н., Чмуневич А.А. Совершенствование перевязочных средств для лечения огнестрельных ран // Материалы ХХХVII научно-практической конференции "Актуальные вопросы авиационной медицины", г.Красногорск, 2007год – Стр.175.

4. Соболенко А.К., Шин Ф.Е., Соболенко Д.А., Васягин С.Н., Чмуневич А.А. Пути совершенствования табельных медицинских комплектов для оказания помощи на доврачебном этапе // Материалы ХХХVII научно-практической конференции "Актуальные вопросы авиационной медицины", г.Красногорск, 2007год - Стр.173.

5. Шин Ф.Е., Васягин С.Н., Чмуневич А.А. Влияние экзогенного антиоксиданта -токоферол в форме микрокапсул на регуляцию среднерадикальных реакций в тканях огнестрельных ран // 7-я Всеармейская международная конференция "Актуальные вопросы профилактики, диагностики и терапии хирургической инфекции": Сборник материалов – г.Москва, 2007год – Стр.20

6. Шин Ф.Е., Васягин С.Н., Чмуневич А.А. Новые формы серотонина в лечении огнестрельных ран // 7-я Всеармейская международная конференция "Актуальные вопросы профилактики, диагностики и терапии хирургической инфекции": Сборник материалов – г.Москва, 2007год –Стр.73.

7. Шин Ф.E, Васягин С.Н., Чмуневич А.А., Морозова Т.В. Фотодитазин в форме наночастиц в лечении огнестрельных ран // 7-я Всеармейская международная конференция "Актуальные вопросы профилактики, диагностики и терапии хирургической инфекции": Сборник материалов – г.Москва, 2007год – Стр.134

8. Шин Ф.Е., Ширинский В.Г., Чмуневич А.А., Кулешов И.Ю. Новое в стимуляции заживления асептических послеоперационных ран и профилактике его нарушения // Военно – медицинский журнал, 2007год - №12. - Стр.49



 



<
 
2013 www.disus.ru - «Бесплатная научная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.