WWW.DISUS.RU

БЕСПЛАТНАЯ НАУЧНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 

На правах рукописи

Хребтовский Алексей Михайлович

АНАТОМО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕЧЕНОЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ И СПИРТОМ

(экспериментально-морфологическое исследование)

      1. - анатомия человека

А В Т О Р Е Ф Е Р А Т

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва 2007

Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И.М. Сеченова.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Моталов Владимир Григорьевич

Официальные оппоненты:

Лысов Павел Константинович, доктор медицинских наук, профессор

Овченков Виктор Степанович, доктор медицинских наук, профессор

Ведущая организация:

Российский Университет Дружбы Народов им П.Лумумбы.

Защита состоится « » ___________ 2008 г. в часов

на заседании диссертационного совета Д.208.040.01 в ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова по адресу: 119991, Москва, ул.Трубецкая дом 8, строение 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (117131, г. Москва, Нахимовский проспект, д. 49).

Автореферат разослан « » ______________2007 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

д.м.н., проф. Варшавский Владимир Анатольевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Известно, что состояние иммунной системы человека зависит от многочисленных экзогенных (социальных, экологических, медицинских) и эндогенных (соматических и инфекционных болезней, эндокринных нарушений) факторов (Бородин Ю.П., 1989; 2006; Михайленко С. И., 1996; Хаитов Р. М., Пинегин Б. В., 1997, 1999; Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000; Воробьев А.А. и др., 2001).

Воздействие на организм тех или иных факторов внешней среды способно приводить к быстрому истощению физиологических резервов интегративных систем: нервной, эндокринной и иммунной (Горизонтов П.Д.с соавт., 1983; Меерсон Ф.З., 1986; Новиков В.С., 2000). Иммунная система первой вовлекается во все патологические процессы, поэтому нарушение ее функций влияет на возникновение, развитие и исход заболеваний. Как результат – формируются изменения функциональной активности системы, выражающиеся либо в активации всей иммунной системы, или отдельных ее звеньев, либо ее супрессией, которые могут приводить к развитию аутоиммунных болезней, аллергий,  иммунодефицитов (Петров Р.В., 1987; Земсков А.М. и др., 1999).

Значительный интерес к исследованиям иммунных функций на тканевом уровне связан с тем, что иммунокомпетентные клетки образуются и проходят все этапы созревания, дифференцировки и подвергаются апаптозу под влиянием тканевого микроокружения (Бородин Ю.П., 1989; Труфакин В.А., Шмаков А.Н., 1991) При действии дестабилизирующих факторов регионарные лимфатические узлы способны представлять объективную информацию о структурно-функциональных основах процессов адаптации, дезадаптации и реабилитации органов и систем (Бородин Ю.И., 1986; Сапин М.Р., 1989; Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000).

За последние годы возрастает частота заболеваемости гепатитом и циррозом печени различной этиологии (вирусный гепатит, алкогольное повреждение печени и др.). Несмотря на обилие работ, посвященных механизмам влияния пораженной печени на иммуногенную реактивность организма (Прокопенко Л.Г., Конопля А.И., Кедровская Н.Н., 1983; Ялукова С.Л., Иванов Л.Н., 2000; Евченко Е.В., Брюхин Г.В., Михайлова Г.И., 2004; Обернихин С.С., 2005), в литературе недостаточно полно освещен вопрос состояния печеночных лимфатических узлов, непосредственно принимающих лимфу от печени. Поэтому большой интерес представляют изменения, происходящие в печеночных лимфатических узлах, которые можно считать индикатором функционального состояния печени и иммунной системы организма.

Одним из наиболее используемых химических веществ в экспериментальной практике является четыреххлористый углерод (СС1/4), который обладает избирательным свойством повреждать паренхиматозные органы и обладает сильным гепатотропным действием (Меркурьева Р.В., Бонашевская Т.И., Шатерникова И.С. и др., 1979; Оксенгендлер Г.И., 1982; Меркурьева Р.В., Судаков К.В. и др., 1986; Демченко Г.А., Булекбаева Л.Э. и др., 2006). В литературе представлены сведения о влиянии СС1/4 на состояние печени, а также на некоторые лимфатические узлы (Демченко Г.А., Булекбаева Л.Э. и др., 2006). Сведений о влиянии СС1/4 непосредственно на печеночные лимфатические узлы и особенно, об отдаленных последствиях воздействия на них – не выявлено.

Важное биосоциальное значение имеет проблема воздействия алкогольной интоксикации на организм. Достаточно хорошо изучено действие алкогольной интоксикации на нейрофизиологические процессы в организме (Оксенгендлер Г.И., 1982; Буров В.В.и др., 1982). Физиологические тесты показали изменение поведенческих реакций при алкогольной интоксикации: отношение животных к пище, изменение активности и координации движений (Бонашевская Т.И., 1978; Судаков К.В, Котов А.В., Келешева Л.Ф., 1979; Сытинский И.А., Флерова Н.И, 1982). Результаты биохимических исследований у опытных животных также показали, что этанол оказывает «физический эффект» на клеточные мембраны, нарушает медиаторный обмен в мозге, вызывает деструктивные изменения в клеточных мембранах печени (Романова Л.А., 1980; Боброва Н.П. и др.,1982; Сытинский И.А., Флерова Н.И., 1982; Меркурьева Р.В., Судаков К.В., Бонашевская Т.И., Журков В.С..1986). Наряду с этим морфологическое изучение органов иммунной системы при действии этанола остается одной из важнейших биомедицинских проблем, позволяющей прояснить картину иммунологического состояния организма при острых и хронических нарушениях функций печени.

В связи с вышеизложенным, представляется актуальным проведение исследования морфо-функционального состояния регионарных печеночных лимфатических узлов в условиях хронического воздействия на организм СС1/4 на фоне длительного употребления 5% спиртового раствора.

Цель и задачи исследования

Цель работы - изучить изменения структуры и клеточного состава регионарных печеночных лимфатических узлов крыс Вистар в отдаленные периоды после длительного воздействия на организм четыреххлористого углерода и спиртового раствора.

Задачи исследования:

  1. Исследовать морфологию и цитоархитектонику различных структурных компонентов (лимфоидных узелков с центрами и без центров размножения, паракортикальной зоны, мякотных тяжей, краевых и мозговых синусов) печеночных лимфатических узлов интактных крыс (в норме).
  2. Изучить динамику изменений состояния различных функциональных зон регионарных печеночных лимфатических узлов крыс через 1,2,4 и 7 недель после длительного употребления 5% раствора спирта.
  3. Изучить динамику клеточного состава всех структурных компонентов регионарных печеночных лимфатических узлов крыс, спустя 1,2,4 и 7 недель после длительного воздействия четыреххлористого углерода в концентрациях 0,1мл/кг и 0,2мл/кг на фоне употребления 5% спиртового раствора.
  4. Провести сравнительный анализ воздействия различных доз четыреххлористого углерода на структурную организацию печеночных лимфатических узлов крыс.

Научная новизна

Впервые установлена динамика изменений структуры и цитоархитектоники регионарных печеночных лимфатических узлов в отдаленные периоды (через 1-7недель) после длительных воздействий различных доз четыреххлористого углерода и 5% спиртового раствора.

Выявлен различный характер реакции печеночных лимфатических узлов в зависимости от концентрации четыреххлористого углерода. Установлены два основных периода структурных преобразований в лимфатических узлах: первый период – компенсаторный и второй период – деструктивный. После действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг компенсаторные процессы в лимфатическом узле отмечаются, начиная от 1-й недели до 4-й недели. Спустя 7 недель в органе нарастают деструктивные процессы. После воздействия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг компенсаторный период отмечается только на 1-й неделе, а период деструкции охватывает все последующие сроки, начиная с 2-ой до 7 недель.

Впервые выявлена различная роль структурных компонентов в динамике морфофункционального состояния лимфатических узлов при действии СС1/4 при обоих используемых дозах. На первом этапе (через1-4 недели) в печеночных лимфатических узлах наиболее устойчивыми структурами являются лимфоидные узелки с центрами размножения и паракортикальная зона. Так, на протяжении всего эксперимента в лимфоидных узелках (в центрах размножения) присутствуют молодые и митотически делящиеся клетки, что связано с поддержанием лимфоцитопоэза. В паракортикальной зоне с 1-й по 4-ю неделю содержание лимфоцитов сохраняется на уровне контроля. Уменьшение числа молодых клеток и увеличение содержания плазматических клеток свидетельствуют об активности компенсаторных процессов в паракортикальной зоне. Наиболее лабильной морфологической структурой в лимфатических узлах являются мякотные тяжи, где под влиянием СС1/4 резко уменьшается число молодых клеток, лимфоцитов, снижается доля плазматических клеток и увеличивается содержание деструктивно измененных клеток.

Установлено, что длительное (в течение 4-х недель) употребление 5% спиртового раствора оказывает повреждающее действие на структурную организацию печеночных лимфатических узлов крыс. От 1-й к 7-й неделе после окончания употребления 5% спиртового раствора в лимфатических узлах усиливается деструкция клеток, активизируется макрофагальная реакция. Процессы подавления лимфоцитопоэза и уменьшение содержания антителпродуцирующих клеток (плазмоцитов) наиболее четко проявляются к 7-й неделе опыта.

Практическая значимость

Результаты исследований имеют не только общебиологическое, но и прикладное медицинское, значение, так как знание морфофункциональных изменений, происходящих в печеночных лимфатических узлах при воздействии на организм четыреххлористого углерода, расширяет представление о роли различных структурных элементов в развитии адаптационных процессов и реактивности конкретного органа и организма, в целом, на токсическое воздействие. Кроме того, полученные в работе данные могут найти практическое применение, так как выявленные закономерности и этапы повреждения печеночных лимфатических узлов при действии гепатотропного токсического вещества - четыреххлористого углерода и спиртового раствора непосредственно связаны с процессами развития цирроза печени.

Полученные в работе данные могут быть рекомендованы для включения в учебники и руководства по морфологии, иммунологии, а также в курс лекций для студентов и слушателей ФПК по соответствующим дисциплинам.

Основные положения, выносимые на защиту

1.При моделировании экспериментального цирроза печени с помощью четыреххлористого углерода и 5% спиртового раствора в морфологии и цитоархитектонике печеночных лимфатических узлов происходят качественные и количественные нарушения структурной организации органа, степень выраженности которых зависит от вида действующего агента, его концентрации, сроков использования и времени изучения органа после окончания их действия.

2. Воздействие 5% спиртового раствора на организм животных на первых этапах эксперимента (от 1-й по 4-ю неделю) приводит к компенсаторныму усилению лимфоцитопоэза в структурных зонах печеночных лимфатических узлов. Отдаленный период (7 недель) после окончания употребления 5% раствора спирта характеризуется снижением функциональной активности лимфоидных структур органа, что объясняется снижением лимфоцитотопоэза (исчезают клетки с картинами митозов и бласты), иммуноцитопоэза (резко уменьшается число плазматических клеток), что является выражением пролонгированного действия спиртового раствора на печеночные лимфатические узлы крыс.

3. Воздействие четыреххлористого углерода в дозе 0,1мл/кг на фоне употребления 5% спиртового раствора приводит к выраженным изменениям цитоархитектоники структурных зон печеночных лимфатических узлов. В печеночных лимфатических узлах наиболее устойчивыми к действию СС1/4 являются лимфоидные узелки с центрами размножения и паракортикальная зона, тогда как более всего лабильны и подвержены изменению - мякотные тяжи. В динамике клеточного состава, в течение от 1 до 7 недели, отмечается постепенное уменьшение функциональной активности структурных зон лимфатического узла. Отдаленный период (7 недель) после воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг характеризуется как период депрессии, когда усиливается деструкция клеток, подавляется митотическая активность клеток, а также созревание бластов и антителпродуцирующих плазматических клеток.

4. Повреждающее воздействие четыреххлористого углерода в дозе 0,2мл/кг на структурную организацию печеночного лимфатического узла проявляется спустя 2 недели после воздействия: отмечается исчезновение функционально активных лимфоидных узелков с центрами размножения и значительные изменения в сосудистом русле. Токсическое действие СС1/4 в дозе 0,2мл/кг приводит к повреждению во всех структурных зонах органа клеток, способных к делению (бластов и больших лимфоцитов), подавлению митотической активности клеток, плазматических клеток, усилению деструкции клеток, увеличению содержания клеток гранулоцитарного ряда.

Апробация материалов диссертации.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: научной конференции кафедры нормальной анатомии в Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова (г. Москва, 2004); УП Всероссийской конференции по патологии клетки (Москва, 2005); конференции «Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии (Москва, 2006); 7-м Конгрессе ассоциации морфологов (Орел, 2006); межлабораторной конференции НИИ морфологии человека РАМН (Москва, 2007).

Публикации

Основное содержание диссертации отражено в 6 опубликованных работах

Объем и структура работы

Работа изложена на 240 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, посвященных обзору литературы, материалу и методам исследования, результатам собственных исследований и их обсуждению, заключения, выводов и указателей литературы, включающей источников (218 отечественных и 80 зарубежных авторов). Диссертация иллюстрирована 23 таблицами, 22 графиками и рисунками, в том числе 41 микрофотографий.

Настоящая работа является частью комплексных исследований, проводимых на кафедре анатомии человека Московской медицинской академии имени И.М. Сеченова.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Материалом для исследования послужили печеночные лимфатические узлы крыс самцов Вистар. Согласно возрастной периодизации Западнюка И.А. /1971/, для исследования взяты крысы 2,5-3-х месячного возраста массой тела 150-200 г со сложившимся гормональным статусом, в лимфоидных органах которых нет инволютивных изменений. Эксперимент проведен на базе Научно-исследовательского института иммунологии РАМН. Следуя стандартной методике, принятой в исследовательской практике, мы проводили эксперимент с 2-х разовым введением в неделю токсичного вещества четыреххлористого углерода в организм животных (Венгеровский А.И.. Марков И.В., Саратиков А.С., 2000). Использование высокотоксичного вещества - четыреххлористого углерода связано с избирательным действием его на паренхиматозные органы (печень, почки и др. органы и системы), обладающим также иммунодепрессивными свойствами на органы иммунной системы. Изучение периферических органов иммунной системы (регионарных печеночных лимфатических узлов) проведено на фоне экспериментального хронического гепатита, создаваемого длительным введением малых доз (0,1мл/кг и 0,2мл/кг) четыреххлористого углерода (СС1/4). Для усиления действия четыреххлористого углерода (СС1/4) одновременно применяли этанол, оказывающим сходное воздействие на состояние печени (Грацианский Л.Н., Ковшило В.Е., 1981; Batey R.G. et.al.,2002, Lasarte J. et.al., 2003).

Используемый в эксперименте в качестве токсического химического препарата четыреххлористый углерод (CCl/4), относится к органическим химическим соединениям, представляющим легко летучие жидкости. Это вещество широко применяется в народном хозяйстве - в химической промышленности, в органическом синтезе, при применении пестицидов. CCl/4 относится к ярко выраженным гепатотропным ядам, обладающим особым сродством к ткани печени и оказывающим специфический гепатотропный эффект, поступая в организм даже в небольших дозах. Повреждение печени может многократно усиливаться при комбинированном действии ядов, например, при действии этанола (алкоголя), приводя к резкому усилению развития цирроза печени.

Исходя из этого, нами в опыте использован метод длительного введения четыреххлористого углерода в 2-х концентрациях: в дозе 0,1 мл/кг и 0,2 мл/кг, наряду с параллельным хроническим 4-х недельным употреблением 5% спиртового раствора.

Исследование реакции регионарных печеночных лимфатических узлов при экспериментальном циррозе печени выполнено в 4 группах животных:

1 группа – контрольная; животные, употреблявшие 4 недели в качестве питья 5% раствор этанола (спирта);

2 группа – животные, которым дважды в неделю в течение 4-х недель вводили в желудок масляный раствор четыреххлористого углерода в концентрации 0,1мл/кг на фоне употребления 5% раствора спирта;

3 группа – животные, получавшие дважды в неделю в течение 4-х недель в желудок масляный раствор четыреххлористого углерода в концентрации 0,2мл/кг на фоне употребления 5% раствора спирта;

4 группа - интактные крысы (норма).

Экспериментальные и контрольные животные помещались в клетки, имели свободный доступ к питью в виде 5% спиртового раствора и питались сухим кормом. Крысы интактной группы содержались в аналогичных условиях со свободным доступом к чистой воде. По окончании эксперимента через 1, 2, 4 и 7 недель животные были забиты путем декапитации с помощью гильотины. При проведении эксперимента полностью соблюдались «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденные МЗ РФ № 755 от 12.08. 1977г. В эксперименте участвовало 91 животное, в каждый срок эксперимента (через 1,2,4 и 7 недель) изучено по 7крыс.

Материалом для исследования послужил регионарный для печени периферический орган иммунной системы – печеночный лимфатический узел. Для гистологического исследования лимфатические узлы фиксированы в 10% нейтральном формалине с последующей стандартной спиртовой проводкой (по спиртам восходящей концентрации) и заливкой в парафин (Меркулов Г.А., 1961). Из парафиновых блоков изготовлены гистологические срезы толщиной 4-5 мкм. Для морфологической оценки препарата органа (состояния соединительной ткани и соотношения коркового и мозгового вещества) гистологические срезы окрашивали гематоксилином-эозином и пикрофуксином по Ван Гизон. Для дифференцировки лимфоидных клеток использовали окраску срезов азурП-эозином. Для выявления малодифференцированных клеток (бластов и больших лимфоцитов) и плазматических клеток применили окраску метиловым зеленым – пиронином по Браше.

При изучении морфо-функциональных зон печеночного лимфатического узла использовали микроскоп МБИ-3 при увеличении объектива – 90 под масляной иммерсией и с 25-узловой сеткой в окуляре (х10). Оценка структурной организации органа проведена под микроскопом МБИ-3 при увеличении объектива х10 и х40 и окуляра х10.

В каждой морфологической структуре печеночного лимфатического узла подсчет клеток проводили на условной единице площади гистологического среза (880 мкм/2) в 10 полях зрения. На единице площади гистологического среза методом точечного счета, по 25-узловой сетке, разработанной Стефановым С.Б. (1974), определяли абсолютное и относительное количество различных клеточных элементов. Общее количество клеток на единице площади гистологического среза (880 мкм/2) в каждом структурном компоненте печеночного лимфатического узла характеризует плотность распределения лимфоидных клеток на каждом этапе эксперимента.

Изучение цитоархитектоники морфологических зон печеночного лимфатического узла проводили в следующих структурных компонентах органа: в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, в лимфоидных узелках без центров размножения, в паракортикальной зоне, мякотных тяжах, краевом (подкапсульном) и мозговом синусах.

На гистологических срезах в каждой функциональной зоне печеночного лимфатического узла крыс проведен количественный и качественный анализ клеточного состава. Проанализировано 15 видов клеток: бласты, большие, средние и малые лимфоциты, клетки с картинами митоза, незрелые и зрелые плазматические клетки, зрелые и незрелые формы нейтрофилов и эозинофилов, тучные клетки, ретикулярные клетки, макрофаги и деструктивно измененные и разрушенные клетки. Анализ содержания клеточных элементов проводили в относительных величинах, что, по мнению Сапина М.Р. (1988), позволяет лучше понять клеточное строение иммунных структур, сравнивать их между собой, оценивать их в динамике и сопоставлять с литературными сведениями.

Полученный цифровой материал подвергался статистической обработке на компьютере. Получены показатели среднеарифметических значений абсолютных и относительных величин (X) и их ошибки (Sx). Достоверность полученных результатов определяли по Стьюденту. Демонстрационный материал (таблицы, фотографии, графики) изготовлены с помощью компъютера.

Проведенное исследование позволит выявить динамику перестройки структурной организации печеночных лимфатических узлов на разных этапах эксперимента (через 1,2, 4 и 7 недель) как при употреблении этанола (5% спиртового раствора), так и в комплексе при одновременном действии четыреххлористого углерода и спиртового раствора, а также выявить отдаленный эффект воздействия СС1/4 (через 7 недель) на морфофункциональное состояние органа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение различных аспектов повреждений печени позволило многим исследователям прийти к заключению, что одно из сопутствующих заболеваний печени связано с иммунотропными эффектами этанола, поэтому одним из показателей иммунного статуса в организме является функциональное состояния печеночных лимфатических узлов. Принимая во внимание социальную и биомедицинскую значимость влияния алкоголя на организм, мы провели экспериментальное исследование морфо-функционального состояния регионарных печеночных лимфатических узлов крыс Вистар в отдаленный период (через 1,2,4 и 7 недель) после длительного 4-х недельного употребления этанола (5% раствора спирта). Эта группа животных использована в работе как контрольная группа.

Результаты исследования показали, что на разных этапах эксперимента (от 1 до 7 недель) после длительного употребления 5% спиртового раствора отмечаются различные по характеру изменения структуры и цитоархитектоники разных зон печеночных лимфатических узлов крыс.

Установлено, что спустя 1 неделю после 4-х недельного употребления 5% раствора спирта, по сравнению с интактной группой крыс, на гистологических срезах печеночного лимфатического узла происходит уменьшение площади коркового вещества и, особенно, паракортикальной зоны. При этом сохраняются функционально активные лимфоидные узелки с центрами размножения, расположенные в органе в 1-2 ряда. Через 1-у неделю, по сравнению с исходными значениями, происходит заметное уплотнение лимфоидных структур, которое связано с резким увеличением плотности распределения лимфоидных клеток (на 7,6-35,9 клетки). Максимальное увеличение плотности распределения клеток в паракортикальной зоне (на 35,9 клетки) связано, по нашему мнению, с нарушением миграции лимфоцитов из Т-зависимой зоны лимфатического узла, что подтверждается увеличением содержания малых и средних лимфоцитов в ней, соответственно в 1,4 раза и в 1,9 раза. В других структурных зонах лимфатического узла (в центрах размножения, мозговых синусах) общее число лимфоцитов, напротив, снижено (на 5,46-14,31%) или остается на уровне интактных значений. Неравномерные изменения в содержании лимфоцитов в структурных зонах лимфатических узлов связаны с различным уровнем деструкции клеток на 1-й неделе опыта. Так, по сравнению с исходными показателями, в центрах размножения, мантии и в паракортикальной зоне содержание деструктивно измененных и разрушенных клеток уменьшается в 1,4-2,1 раза, тогда как в синусах (краевом и мозговом) число этих клеток увеличивается в 2,7-2,9 раза. Подобные изменения могут быть связаны с усилением притока деструктивных клеток по лимфатическим сосудам в орган от печени и накоплением этих клеток в мозговом синусе (Бородин Ю.И, Машак А.Н., Голубева И.А., 2005; Жаксылыкова А.К., Нурмухамбетова Б.Н.. 2006). С той же закономерностью, что и деструкция клеток, в структурных компонентах меняется макрофагальная активность клеток. В корковых зонах органа – их число уменьшается. При этом резко возрастает количество макрофагов в мякотных тяжах, в мозговом и краевом синусах (в 1,7 - 3,8 раза). Исходя из полученных данных, можно предположить, что в лимфатическом узле процессы разрушения и реутилизации клеток на 1-й неделе после употребления 5% спиртового раствора более всего выражены в мозговом веществе, тогда как более устойчивой структурной зоной в органе является корковое вещество. Подтверждением подобного наблюдения является резкое увеличение содержания молодых форм клеток в лимфоидных зонах коркового вещества (в 3,3 раза в центрах размножения - в 1,2 раза в паракортикальной зоне), особенно, за счет резкого увеличения содержания больших лимфоцитов. Одновременно в центрах размножения отмечено усиление митотической активности клеток (в 9,3 раза), а также, в отличие от интактной группы, эти клетки появляются в паракортикальной зоне и в мякотных тяжах. Высокое содержание молодых форм клеток, особенно, в центрах размножения лимфоидных узелков, и максимальное содержание в них клеток с картинами митозов на 1-й неделе в контроле свидетельствует, по мнению Lennert K., Stein H., (1982), об активных антигензависимых процессах клеточной пролиферации и дифференцировки. Отмеченное нами увеличение содержания макрофагов в лимфатических узлах также связано с их участием в межклеточных кооперациях при формировании иммунного ответа и при поглощении собственных деструктивно измененных клеток (Петров Р.В., 1987; Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981). При этом в мозговом веществе содержание клеток с картинами митозов, относительно интактных значений, снижено в 1,7-2,4 раза. Описанный комплекс клеточных изменений в корковом веществе печеночных лимфатических узлов (увеличение числа молодых форм клеток и клеток с картинами митозов) может рассматриваться как усиление лимфоцитопоэза, наступающее через 1 неделю после алкогольной интоксикации. Вместе с тем, во всех структурных зонах органа исчезают или уменьшается (в мякотных тяжах и в мозговых синусах) число плазматических клеток. При этом через 1 неделю в мякотных тяжах (зоне накопления и созревания плазматических клеток) сохраняется наибольшее число плазматических клеток, среди которых преобладают зрелые антителпродуцирующие клетки (18,34%),но их содержание в 1,3 раза меньше, чем в интактной группе животных. В мозговом синусе встречаются только единичные формы плазматических клеток. Отмеченное резкое уменьшение содержания плазматических клеток в органе, по нашему мнению, связано с снижением созревания этих клеток из лимфоцитов в активные антителпродуцирующие клетки в лимфатическом узле и с задержкой миграции их в синусную (лимфатическую) систему.

Спустя 2 недели в группе контрольных животных, после употребления 5% спиртового раствора, в печеночных лимфатических узлах отмечаются заметные морфологические изменения. В отличие от 1-й недели, в органе, наряду с лимфоидными узелками с центрами размножения появляются лимфоидные узелки без центров размножения, резко расширяется паракортикальная зона и сокращается зона мозгового вещества. Центры размножения лимфоидных узелков инфильтрированы многочисленными крупными сливными макрофагами, образующих картину «звездного неба». По наблюдениям многих авторов подобные макрофаги появляются в лимфатических узлах, селезенке, в тимусе в результате воздействия острых факторов внешней среды (токсических химических веществ, облучения, гипергравитации), а также при воспалительных процессах, что является проявлением неспецифической реакции в органах иммунной системы (Ковалевский Г.В., 1976; Вылков И., 1980; Ерофеева Л.М., 1993; 2002; Григоренко Д.Е. и др., 2000; 2005).

По сравнению с 1-й неделей, через 2 недели после употребления 5% спиртового раствора выявлено резкое снижение плотности распределения клеток во всех зонах органа - на 14,4 - 27,8 клеток. При этом частота распределения клеток во всех зонах органа приближается к показателям интактной группы, за исключением паракортикальной зоны, где плотность клеток остается выше контрольных показателей на 11,5 клеток. Однако в просвете краевых синусов, в притекающей в орган лимфе, отмечена минимальная в органе плотность распределения клеток (18,0 клеток), которая на 10,6 клеток меньше, чем в интактной группе, что связано, видимо, с торможением притока клеток по приносящим сосудам в орган в эксперименте (Бородин Ю.И, Машак А.Н, Голубева И.А. и др., 2005).

Спустя 2 недели после употребления 5% спиртового раствора, выявляется неравномерная перестройка в содержании лимфоцитов (малых и средних лимфоцитов) в структурных компонентах печеночного лимфатического узла. По сравнению с 1-й неделей опыта в паракортикальной зоне и в краевых синусах отмечено уменьшение числа лимфоцитов, за счет снижения числа малых лимфоцитов, соответственно, на 10,58% и 15,43%, тогда как в остальных зонах органа не происходит достоверного изменения в содержании этих клеток. Однако по сравнению с интактной группой, в контроле через 2 недели количество лимфоцитов (как и плотность клеток) увеличивается только в паракортикальной зоне (за счет средних лимфоцитов - в 2 раза), тогда как в мантии, лимфоидных узелках без центров размножения и в краевом синусе их число заметно уменьшается (на 7,79% –16,63%).

В контрольной группе животных через 2 недели, по сравнению с 1-й неделей, во всех зонах печеночных лимфатических узлов исчезают клетки с картинами митозов, за исключением центров размножения, где сохраняется 1,25% этих клеток. Однако малодифференцированные клетки в виде бластов и больших лимфоцитов в широком диапазоне представлены во всех структурных компонентах лимфатических узлов (от 1,11 % в краевых синусах до 13,57% в центрах размножения узелков). Выявлено, что от 1-й к 2-й неделе опыта их число достоверно увеличивается во всех структурных зонах, превышая интактные показатели в 1,4-6,5 раза. Исключение составляют только центры размножения лимфоидных узелков, где содержание молодых клеток снижено на 10,25%, по сравнению с 1-й неделей опыта. В изучаемых зонах органа, в отличие от 1 недели опыта, появляются плазматические клетки, в том числе зрелые антителпродуцирующие клетки (плазмоциты), преобладающая часть которых отмечена в мякотных тяжах (14,64%).

Через 2 недели в контроле в максимальном количестве деструктивно измененные и разрушенные клетки выявляются в просвете краевого и мозгового синусов (17-18%), где их число превышает интактные значения в 2,5-3,5 раза. В мантии и в паракортикальной зоне лимфатических узлов деструкция клеток менее выражена - число деструктивных клеток на 2 неделе увеличивается в 1,5-2,2 раза. При этом макрофагальная активность клеток, как и деструкция, в большей степени проявляется в мозговых и краевых синусах, где число макрофагов максимально (по 8%) и менее всего этих клеток - в паракортикальной зоне и в мантии узелков (1,5-2,2%).

Спустя 4 недели после окончания приема 5% спиртового раствора, в печеночных лимфатических узлах отмечается усиление функциональной активности органа. Это подтверждается появлением большого числа лимфоидных узелков только с центрами размножения, расположенных в органе в 2 ряда. Увеличение количества лимфоидных узелков с широкими центрами размножения в лимфатических узлах, по мнению многих авторов, объясняется антигенным воздействием, погибших при различных воздействиях клеток и свидетельствует о высокой функциональной активности лимфоидных узелков (Петров Р.В., 1978; Сапин М.Р., Юрина Н.А., Этинген Л.Е.,1978; Аминова Г.Г., 1979; Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000; Growley M.K,1990). Паракортикальная зона с многочисленными расширенными сосудами различного диаметра, как и на 2-й неделе контроля, значительно расширяется. Мозговое вещество в органе резко сужается. Артериальные сосуды, вокруг которых сформированы широкие мякотные тяжи, расширены, заполнены клетками. На 4-й неделе опыта, по сравнению с 2-й неделей, отмечается увеличение плотности расположения клеток (на 12-26 клеток) во всех зонах лимфатического узла.

На 4-й неделе после употребления 5% спиртового раствора, по сравнению с интактной группой животных, в лимфоидных узелках с центрами размножения и в паракортикальной зоне лимфатических узлов увеличивается содержание молодых форм клеток (в том числе бластов) в 1.3-3,3 раза. В центрах размножения узелков установлено в 4 раза больше пролиферирующих клеток, чем в интактной группе, и эти клетки появляются в паракортикальной зоне (соответственно, 1,09% и 0,57%). Появление на 4-й неделе в контроле клеток с картинами митозов и бластов в центрах размножения и в паракортикальной зоне, свидетельствует об активизации лимфоцитопоэза в В-зависимой зоне (центрах размножения) и в Т-зависимой паракортикальной зоне (Сапин М.Р., Этинген Л.Е., 1987). Однако, в отличие от предыдущего срока опыта (2 недели), через 4 недели в корковом веществе органа отсутствуют плазматические клетки. В этот период основным местом их локализации в органе является мозговое вещество - мякотные тяжи и синусы (мозговой и краевой). Отмеченное интенсивное накопление плазматических клеток в мякотных тяжах (до 42,3%) связано, видимо, с компенсаторным усилением плазматической реакции и активным созреванием антителпродуцирующих плазматических клеток (плазмоцитов - 27,88%). Через 4 недели в краевом синусе насчитывается всего 2,66% плазматических клеток, тогда как в мозговых синусах их число увеличивается в 3 раза и достигает 8,32%. Отмечается также активная утилизирующая функция лимфатических узлов через 4 недели после воздействия 5% раствора спирта. В краевых синусах обнаруживается всего 4,0% макрофагов и 16,0% деструктивных клеток, тогда как в мозговых синусах их содержание резко увеличивается: макрофагов – в 3,8 раза (15,15%) и в 2 раза – деструктивно измененных и разрушенных клеток (33,33%).

В отдаленный период через 7 недель после употребления 5% раствора спирта, по сравнению с предыдущими сроками, в печеночных лимфатических узлах еще более увеличивается количество лимфоидных узелков с центрами размножения, которые в разных участках органа расположены в 2-3 слоя. При этом заметно сужается (уменьшается) площадь паракортикальной зоны.

Анализ цитоархитектоники показал, что через 7 недель после употребления 5% спирта, по сравнению с интактной группой, в лимфатическом узле исчезают клетки с картинами митозов. В центрах размножения лимфоидных узелков выявлены только единичные бластные клетки (0,31%), что меньше, чем в интактной группе в 4,6 раза. В мозговом веществе число молодых клеток снижено в 1,5-3,5 раза, при этом исчезают бласты. Через 7 недель после употребления 5% спиртового раствора содержание малых лимфоцитов восстанавливается, достигая интактных значений в мякотных тяжах, в мозговых и в краевых синусах. В структурах коркового вещества – в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, а также в паракортикальной зоне – количество малых лимфоцитов остается меньше интактных значений (на 11-15%). Через 7 недель в контроле резко (в 1,7-22,9 раза) снижается плазматическая реакция в структурных зонах лимфатического узла, по сравнению с интактной группой. В мантии, паракортикальной зоне и в мозговых синусах отсутствуют плазмоциты. При этом в мякотных тяжах в равном количестве сохраняются как зрелые, так и незрелые формы плазматических клеток (по 10%), что связано с созреванием антителпродуцирующих клеток только в этой зоне органа. Отсутствие в мозговых синусах антителпродуцирующих клеток (плазмоцитов) связано, видимо, с ограничением миграции этих клеток из мякотных тяжей и свидетельствует о снижении антителогенеза в органе. На 7-й неделе после употребления 5% спиртового раствора во всех структурных компонентах лимфатического узла резко усиливается деструкция клеток (в 1,4-4,2 раза). Более всего деструктивных клеток появляется в краевом и мозговом синусах (в 4,2-3,9 раза). В такой же последовательности отмечается увеличение содержания макрофагов в лимфатическом узле. Более значительное накопление макрофагов в мозговом синусе, по сравнению с краевым синусом (10,20% и 4,48%, соответственно), свидетельствуют об усилении утилизирующей функции мозговых синусов.

Таким образом, исследование показало, что в результате длительного употребления 5% спиртового раствора в процессе эксперимента митотическая активность клеток сохраняется только в центрах размножения узелков (от 1 до 4 недели опыта), что является проявлением компенсаторных процессов в лимфатическом узле. При этом наиболее стабильной клеточной формой в эксперименте во всех зонах органа являются малые лимфоциты, содержание которых колеблется в пределах 10%. Однако в отдаленный период опыта, через 7 недель, клетки с картинами митозов в структурных зонах органа исчезают, что связано с подавлением лимфоцитопоэза. Содержание плазматических клеток, в их традиционных зонах накопления и созревания в мякотных тяжах и мозговых синусах, на всех этапах эксперимента (от 1 до 7 недель) неравномерно снижается. Выявленное резкое ослабление созревания антителпродуцирующих клеток (плазмоцитов) в структурных зонах печеночного лимфатического узла свидетельствует о снижении выработки иммуноглобулинов в органе и ослаблении гуморального иммунитета в организме животных после употребления 5% спиртового раствора. Полученные результаты свидетельствуют о четких изменениях в соотношении популяции лимфоидных клеток в печеночном лимфатическом узле, которые характеризуют выраженное снижение функциональной активности органа спустя 7 недель после длительного употребления (в течение 4-х недель) 5% спиртового раствора.

Изучена реакция регионарных к печени печеночных лимфатических узлов в отдаленный период (через 1, 2,4 и 7 недель) после введения различных доз токсического для печени масляного раствора четыреххлористого углерода (СС1/4 в дозе 0,1мл/кг и 0,2мл/кг веса) на фоне длительного употребления 5% спиртового раствора.

На основании полученных результатов установлено, что в разные сроки после воздействия четыреххлористого углерода (СС1/4) происходят различные по характеру изменения как микротопографии, так и цитоархитектоники структурных зон печеночного лимфатического узла.

Через 1 неделю после введения СС1/4 в дозе 0,1мл/кг заметно уменьшается объем лимфатических узлов. В печеночных лимфатических узлах, в отличие от лимфатических узлов в контрольной группе крыс в этот же период, заметно расширяется паракортикальная зона, резко сужается площадь мозгового вещества. Паренхима лимфатического узла инфильтрирована крупными сливными макрофагами, образуя картину «звездного неба». В органе присутствуют только лимфоидные узелки с центрами размножения. В печеночных лимфатических узлах видны многочисленные расширенные сосуды, многие из которых заполнены эритроцитами, что является проявлением застойных процессов. В представленных в литературе сведениях также отмечается, что при экспериментальном циррозе печени происходят четкие изменения в морфологии органов иммунной системы (лимфатических узлах, тимусе, селезенке). Так, по данным Башкирова Ю.В., Колпакова М.А. и др., (2006) в первые сутки после инъекций СС1/4 (внутрибрюшинно в дозе 0,3мл/100г) уменьшаются в размерах брыжеечные лимфатические узлы. При моделировании цирроза через 1 сутки после введения конканавалина А в тимусе, по данным Обернихина С.С. (2005), отмечается акцидентальная инволюция, корковый слой которого характеризуется картиной «звездного неба» вследствие инфильтрации макрофагами, при этом в селезенке автор отмечает опустошение белой пульпы с редуцированием Т-зоны (периартериальных лимфоидных муфт).

При анализе цитоархитектоники печеночных лимфатических узлов крыс через 1 неделю после действия СС1/4 (0,1мл/кг), в центрах размножения лимфоидных узелков и в паракортикальной зоне узлов число молодых форм клеток сохраняется на уровне контрольных значений, тогда как в мякотных тяжах их содержание уменьшается за счет резкого снижения бластов (в 2,6 раза). В мантии – бласты исчезают. После действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг в структурных зонах печеночного лимфатического узла клетки с картинами митозов не выявлены. Исключение составляют центры размножения лимфоидных узелков, где число митотически делящихся клеток остается на уровне контрольных значений (2,52% и 2,73%-различия не достоверны).

В печеночном лимфатическом узле, спустя 1 неделю после введения СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, усиливается плазматическая реакция. Более всего, относительно контроля, содержание плазматических клеток увеличивается в мозговых синусах (в 6,9 раза – плазмобластов, в 1,9 раза – плазмоцитов). Единичные плазматические клетки также отмечаются в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, в паракортикальной зоне и в краевом синусе (от 0,39% до 1,28%). Увеличение числа плазматических клеток в структурных зонах печеночного лимфатического узла, по сравнению с контролем, связано, видимо, с компенсаторным усилением антителогенеза в условиях снижения митотической активности клеток в органе после воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг.

Воздействие четыреххлористого углерода в концентрации 0,1мл/кг через 1 неделю приводит к усилению деструкции клеток во всех зонах органа. По сравнению с контролем, в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, в паракортикальной зоне и в мякотных тяжах содержание деструктивных клеток увеличивается в 1,4-1,7 раза и только в мозговых синусах - остается на уровне контрольных значений. Одновременно во всех зонах лимфатического узла (за исключением краевого синуса) резко возрастает содержание макрофагов: более всего - в мантии и в паракортикальной зоне (в 3,5 раза и в 2,5 раза, соответственно), тогда как в других зонах органа - всего в 1,2-1,4 раза. С учетом данных литературы (Жалсылыковой А.К. с соавторами, 2006) результаты наших исследований позволяют предположить, что описанные структурные изменения в лимфатических узлах (расширение паракортикальной зоны, усиление плазматической реакции на фоне усиления деструкции клеток) носят неспецифический характер и свидетельствуют о снижении иммунной функции органа.

Во всех зонах печеночных лимфатических узлов, спустя 1 неделю после воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, в отличие от интактной группы, появляются зернистые лейкоциты (от 0,19% до 3,47%), среди которых преобладают нейтрофилы. Наибольшее содержание нейтрофилов выявлено в мозговых синусах (2,48%)и в мякотных тяжах (1,60%). Основная доля эозинофилов представлена в мякотных тяжах (0,40%). По нашему мнению, появление зернистых лейкоцитов, в частности, нейтрофилов, в печеночном лимфатическом узле связано с их миграцией из печени по лимфатическим путям. По сведениям литературы, ключевую роль в развитии патологических изменений печени играют нейтрофилы, т.к. благодаря своей ферментативной активности они оказывают цитотоксическое действие на печеночные клетки и лимфоциты, приводя их к повреждению (Воробьев А.А., Киселевский М.В., Халтурина Е.Щ., 2001; Bonder C., Ajuebor M., Zbytnuik L. et.al., 2004). Также по мнению Петрова Р.В. (1976), Хэм А. и Кормака Д.(1983), появление сегментоядерных лейкоцитов в структурных зонах лимфатического узла является следствием развития аллергической и воспалительной реакций, что выявлено нами через 1 неделю после токсического действия СС1/4 в концентрации 0,1мл/кг.

Спустя 2 недели после введения четыреххлористого углерода (0,1мл/кг) на гистологических срезах печеночных лимфатических узлов крыс, просматривается рыхлая капсула, обильно пропитанная клетками гранулоцитарного ряда. В корковом веществе узлов присутствуют только лимфоидные узелки с широкими центрами размножения. Площадь паракортикальной зоны значительно превышает контрольную. Мозговое вещество резко оттеснено к воротам узла. Во всех зонах лимфатических узлов, по сравнению с 2-х недельным контролем, увеличивается плотность распределения лимфоидных клеток (на 7,6-24,0 клеток). В печеночном лимфатическом узле отмечается перестройка в соотношении содержания малых и средних лимфоцитов. Во всех зонах органа увеличивается число малых лимфоцитов на 5,84%-12,82% и уменьшается содержание средних лимфоцитов в 1,4-2,2 раза. Значительное изменение в соотношении лимфоидных клеток в структурных зонах лимфатического узла на 2-й неделе после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг связано с выраженным усилением деструкции клеток. По сравнению с контролем, в паракортикальной зоне, мякотных тяжах и мозговых синусах содержание деструктивных клеток увеличивается в 1,2-1,4 раза. При этом в функционально активных лимфоидных узелках (в мантии и в центрах размножения лимфоидных узелков) уровень деструкции клеток не отличается от контрольных показателей. В этот же период (спустя 2 недели) в паракортикальной зоне и в мозговых синусах число макрофагов увеличивается в 3,9 и 1,4 раза, соответственно, тогда как в лимфоидных узелках с центрами размножения, в мякотных тяжах и в краевом синусе активность макрофагальной реакции не изменяется.

После воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг через 2 недели в структурных компонентах лимфатических узлов неравномерно изменяется содержание плазматических клеток, определяющих состояние гуморального иммунитета в органе (Петров Р.В., 1978; Сапин М.Р., Этинген Л.Е., 1996). Так, по сравнению с предыдущим сроком опыта (1 неделя), спустя 2 недели содержание плазматических клеток (плазмобластов) снижается в паракортикальной зоне и в мозговых синусах в 3,6-4,4 раза, тогда как в мантии и в краевом синусе эти клетки исчезают. В печеночном лимфатическом узле максимальное накопление плазматических клеток через 2 недели после действия СС1/4 в дозе 0.1мл/кг отмечено в мякотных тяжах (36,95%), в том числе антителпродуцирующих плазматических клеток (плазмоцитов-22,17%), содержание которых в 1,5 раза превышает контрольные значения. В мозговых синусах, по сравнению с контролем, число плазмоцитов резко снижено (в 3,6 раза). В других зонах лимфатического узла (в центре размножения, в паракортикальной зоне), где выявлены единичные плазматические клетки (0,27% - 1,16%), зрелые плазматические клетки отсутствуют.

Морфологическая картина печеночных лимфатических узлов крыс через 4 недели после введения СС1/4 (0,1мл/кг) не отличается от предыдущего срока (на 2 неделе). В органе сохраняются лимфоидные узелки с центрами размножения, отмечается широкая паракортикальная зона. Паренхима лимфатических узлов более рыхлая, чем на 2-й неделе опыта, что связано с снижением плотности распределения клеток во всех зонах органа на 7-27,6 клеток, которая на 4-й неделе после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг приближается к показателям интактной группы. При этом в печеночных лимфатических узлах отмечается резкое расширение сосудов, переполнение их кровью. В мозговых синусах видны обширные опустошенные зоны. По мнению некоторых авторов (Ахметбаева Н.А., Демченко Г.А., 2006), резкие изменения в морфологии и цитоконструкции лимфатических узлов при токсических воздействиях на организм животных связаны с нарушением иннервации сосудистого русла. Можно предположить, что в результате нарушения иннервации сосудов, изменяется их двигательная активность и проницаемость, что приводит к выраженным застойным процессам в сосудистом русле изучаемого органа при действии токсического вещества СС1/4 в дозе 0,1мл/кг.

В отличие от предыдущих сроков опыта (1, 2-я недели), через 4 недели в печеночных лимфатических узлах крыс деструкция клеток сохраняется на уровне контрольных значений. При этом содержание макрофагов увеличивается в структурных зонах органа в 1,2-2,7 раза. Усиление макрофагальной активности клеток является проявлением компенсаторных возможностей лимфатического узла в условиях действия токсического вещества (Богданов М.Е., 2004; Коненков В.И..2006). При равном уровне деструктивных процессов, выявленном нами через 4 недели в экспериментальной и контрольной группах животных, общее содержание лимфоцитов (малых и средних лимфоцитов) в структурных зонах лимфатического узла достоверно не изменяется.

К 4-й неделе после введения СС1/4 в дозе 0,1мл/кг в структурных зонах печеночного лимфатического узла, по сравнению с контролем, резко снижается содержание бластов (в 1,3-3,6 раза) и исчезают клетки с картинами митозов, что характеризует снижение лимфоцитопоэтической функции органа. Исключение составляют только центры размножения лимфоидных узелков, где выявлены клетки с картинами митозов (1,05%) и содержание бластов, относительно контроля, увеличивается в 1,9 раза. Сохранение процессов лимфоцитопоэза в центрах размножения лимфоидных узелков обеспечивает созревание иммуннокомпетентных клеток и поддержание В-клеточного иммунитета в органе (Петров Р.В., 1980). Подтверждением этого является появление в центрах размножения лимфоидных узелков единичных форм зрелых плазматических клеток (0,53%). В этот период (4 недели) наиболее выраженные процессы созревания плазматических клеток отмечаются только в мякотных тяжах, где сохраняется максимальное содержание плазматических клеток (39,72%), среди которых плазмобласты и плазмоциты выявлены на уровне контрольных значений. При этом в просвете мозговых синусов содержание плазматических клеток резко снижается (в 2,2 раза), что связано с торможением миграции этих клеток в сосудистое русло лимфатических узлов.

В отдаленный период, через 7 недель после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг уменьшаются размеры печеночных лимфатических узлов. В соединительной ткани капсулы и в паренхиме органа видны многочисленные нейтрофилы и эозинофилы. Краевой синус расширен, с участками опустошения. В органе сохраняются лимфоидные узелки, центры размножения которых слабо выражены. Паракортикальная зона резко расширена. Все зоны лимфатического узла инфильтрированы крупными макрофагами.

Реакция печеночного лимфатического узла через 7 недель после воздействия четыреххлористого углерода (0,1мл/кг) характеризуется усилением деструкции клеток (в 1,2-1,5 раза) в структурных зонах органа, по сравнению с контролем. В большей степени деструкция клеток усиливается в паракортикальной зоне и в краевых синусах (в 1,5 раза). При этом отмечается усиление макрофагальной реакции в паракортикальной зоне, в мякотных тяжах и в мозговых синусах (в 1,3-2,3 раза). В структурных компонентах печеночного лимфатического узла, через 7 недель после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, отмечается изменение в содержании малых и средних лимфоцитов. В центрах размножения и в мантии лимфатических узлов, в паракортикальной зоне доля малых лимфоцитов увеличивается в 1,3-2,4 раза. В этих же зонах лимфатического узла в 1,3-1,9 раз уменьшается содержание средних лимфоцитов. В мозговом веществе, по сравнению с контролем, содержание малых лимфоцитов не изменяется. Выявленное нами через 7 недель после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг увеличение количества малых лимфоцитов в центрах размножения, в мантии лимфоидных узелков и в паракортикальной зоне, связано с перестройкой клеточного состава этих зон. Резкое торможение созревания молодых форм клеток из лимфоцитов и подавление пролиферации, по мнению многих исследователей (Харлова Г.В., 1975; Бабаева А.Г., Зотиков Е.А., 1987; Бабаева А.Г. 1989; Труфакин В.А., Трунова Л.А., 1994; Lui Y..J., Johnson G.D., Gordon J., Maclennan I.C., 1992), является типичной картиной снижения процессов лимфоцитопоэза в лимфоидной ткани. Результаты наших исследований подтверждают данные авторов. Во всех структурных зонах печеночного лимфатического узла уменьшается содержание молодых форм клеток (во всех зонах в 2,1-5,5 раза), при полном исчезновении бластных форм клеток и подавлении митотической активности клеток. При этом в результате действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг в отдаленный период (спустя 7 недель) в структурных зонах органа происходит резкое снижение плазматической реакции. Во всех структурных зонах лимфатического узла (за исключением мякотных тяжей) исчезают антителпродуцирующие плазматические клетки (плазмоциты). В мякотных тяжах количество плазматических клеток (плазмобластов и плазмоцитов) сохраняется на контрольном уровне, но их в 2-7 раз меньше, чем в интактной группе. В мозговом и краевом синусах плазматические клетки не выявлены, что связано, видимо, с резким ограничением их миграции в сосудистое русло лимфатического узла.

Таким образом, анализ полученных результатов показал, что в динамике реакции печеночного лимфатического узла при действии четыреххлористого углерода в дозе 0,1мл/кг можно выделить 2 временных периода. На первом этапе (от 1-й до 4-й недели) в лимфатическом узле наиболее устойчивыми морфологическими структурами являются лимфоидные узелки с центрами размножения и паракортикальная зона. Установлено, что на протяжении всего эксперимента в органе присутствуют функционально активные лимфоидные узелки с центрами размножения, в которых на 1-4 неделе опыта присутствуют молодые и митотически делящиеся клетки, содержание которых превосходит контрольные показатели. Содержание этих клеток в центрах размножения лимфоидных узелков свидетельствует о поддержании лимфоцитопоэза в условиях воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг. В паракортикальной зоне с 1-й по 4-ю недели сохраняется то же содержание лимфоцитов, что и в контроле, при этом отмечена перестройка в соотношении молодых и плазматических клеток - при уменьшении содержания молодых форм клеток увеличивается число плазматических клеток, что является типичной картиной развития компенсаторных процессов в этой зоне органа. Наиболее лабильной структурой в печеночном лимфатическом узле после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг являются мякотные тяжи, где в процессе эксперимента нарастает доля плазматических клеток.

На основании литературных данных (Казначеев В.П., Субботин М.Я., 1981; Бородин Ю.И., Дергачева Т.И., Шурлыгина А.В., и др., 2006) можно считать, что выявленные закономерности в реакции лимфатических узлов на 1-4 неделе эксперимента являются проявлением компенсаторных механизмов в печеночных лимфатических узлах, которые развиваются в процессе токсического воздействия на организм животных. Установленный нами 2-й этап в реакции печеночных лимфатических узлов, который отмечается через 7 недель после воздействия четыреххлористого углерода в концентрации 0,1мл/кг, можно характеризовать как период депрессии. В отличии от предыдущих сроков опыта, 2-й этап проявляется в резком усилении деструкции клеток, в угнетении лимфоцитопоэза и подавлении созревания антителпродуцирующих клеток во всех структурных зонах органа, что является характерным признаком подавления гуморального иммунитета в организме (Петров Р.В.. 1987; Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000; Бородин Ю.И., Дергачева Т.И., Шурлыгина А.В. и др., 2006).

Нами изучены морфологические и цитологические изменения в печеночных лимфатических узлах с целью выявления возможностей развития компенсаторных процессов после воздействия четыреххлористого углерода в дозе 0,2 мл/кг, вдвое превышающей исходную концентрацию.

После воздействия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг через 1 неделю, в отличие от действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, в печеночных лимфатических узлах наблюдается расширение паракортикальной зоны. Тем не менее площадь коркового вещества уменьшается и лимфоидные узелки оказываются плотно прижатыми к краевому синусу. В органе, наряду с лимфоидными узелками с слабо выраженными центрами размножения, отмечаются лимфоидные узелки без центров размножения. Мозговое вещество резко сдвинуто к воротам лимфатического узла. Узкие синусы пронизывают весь орган, в том числе и паракортикальную зону. В паракортикальной зоне и в мякотных тяжах отмечается полнокровие сосудов, кровоизлияния в синусах. Подобные картины были отмечены при действии СС1/4 в дозе 0,1мл/кг в более поздние сроки (4 и 7 недели), что свидетельствует о более ранних проявлениях нарушения микроциркуляторного русла, приводящей к застойным процессам в органе при действии СС1/4 в дозе 0,2мл/кг. Паренхима лимфатического узла инфильтрирована крупными, сливными макрофагами, создающих картину «звездного неба». В органе обнажаются крупные трабекулы.

Лимфоидные структуры печеночных лимфатических узлов становятся более рыхлыми, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, в связи с уменьшением плотности распределения лимфоидных клеток. В большей степени плотность клеток уменьшается в паракортикальной зоне (на 36,4 клеток) и менее всего - в краевых синусах (на 5,6 клеток). В этих же зонах уменьшается содержание лимфоцитов (малых и средних лимфоцитов) - в паракортикальной зоне от 67,43% при действии концентрации 0,1мл/кг до 38,86% в дозе 0,2мл/кг и в краевых синусах - от 66,66% до 36,13%, соответственно. В других зонах органа достоверного различия в содержании лимфоцитов – не выявлено. Воздействие высокой концентрации СС1/4 (0,2мл/кг) приводит в лимфатических узлах к увеличению деструктивно измененных и разрушенных клеток в паракортикальной зоне (в 2,5 раза) и в краевых синусах (в 3,5 раза). В других структурных зонах органа деструкция клеток остается на уровне действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг. При равном уровне деструктивных процессов в одноименных структурах лимфатического узла, в отличие от действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, в мантии и в паракортикальной зоне выявлены только единичные макрофагальные клетки (0,87% и 1,88%, соответственно), что свидетельствует о преобладании деструктивных процессов в этих зонах при действии более высокой дозы СС1/4 (0,2мл/кг). На 1-й неделе после действия СС1/4 в высокой дозе в структурных компонентах лимфатического узла резко увеличивается содержание зернистых лейкоцитов. В краевом синусе присутствует 6,72% нейтрофилов и эозинофилов, в мозговом синусе и в паракортикальной зоне - 2,48% и 2,37%,соответственно, содержание которых в 2-5 раз больше, чем при действии СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, что является четким проявлением аллергической и воспалительной реакций при токсическом действии СС1/4 в дозе 0,2 мл/кг.

Введение СС1/4 в дозе 0,2мл/кг, спустя 1 неделю, приводит к полному подавлению митотической активности клеток во всех зонах лимфатического узла и резкому снижению содержания молодых форм клеток, в том числе бластов в центрах размножения лимфоидных узелков. Уменьшение содержания этих клеток (бластов) и подавление пролиферации клеток в структурных зонах печеночного лимфатического узла через 1 неделю после действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг, свидетельствует о резком подавлении лимфоцитопоэза (Петров Р.В., 1987; Сапин М.Р., Никитюк Д.Б., 2000). Исключение составляют мякотные тяжи и мозговые синусы, где число молодых форм клеток увеличивается (в 2,3 раза и в 2,1 раза, соответственно).

В этот же период во всех зонах печеночного лимфатического узла сохраняются плазматические клетки. В отличие от действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, отмечено усиление притока плазматических клеток в краевые синусы (в 3,6 раза), увеличение их содержания в центрах размножения (в 3,8 раза) и в паракортикальной зоне (в 9,0 раз). В мякотных тяжах содержание плазматических клеток (плазмобластов и плазмоцитов) при действии обеих доз СС1/4 не изменяется (26%-27%). Однако при действии СС1/4 в дозе 0,2мл/кг в мозговых синусах количество плазматических клеток оказывается в 12,6 раза меньше, чем в мякотных тяжах и, в отличие от действия низкой дозы, здесь не выявлены плазмоциты.

Более яркие морфологические изменения в печеночных лимфатических узлах отмечаются на 2-й неделе после введения СС1/4 в дозе 0,2 мл/кг. В отличие от действия низкой дозы СС1/4, в органе выявлены только лимфоидные узелки без центров размножения, тогда как лимфоидные узелки с центрами размножения исчезают, что свидетельствует о резком снижении функциональной активности органа (Veerman A.G.P., Ewik W., 1975; Gray D., 1981; Liu Y.J., Johnson G.D., Gordon J.., Maclennan I.C., 1992). В этот период (на 2-й неделе опыта), в лимфатическом узле снижается площадь коркового вещества и паракортикальной зоны и резко расширяется мозговое вещество. Во всех зонах лимфатического узла отмечается изменение сосудистого русла: полнокровие сосудов и обширные кровоизлияния в паренхиму лимфатического узла.

Спустя 2 недели, структура функциональных зон печеночного лимфатического узла, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, становится еще более рыхлой из-за многочисленных сосудов и сливных макрофагов, что приводит к уменьшению плотности клеток в печеночном лимфатическом узле: в паракортикальной зоне – на 27,2 клетки, в мякотных тяжах – на 14,6 клеток, в мозговых синусах – на 16,8 клеток. При этом в краевых синусах плотность клеток увеличивается на 14,4 клетки, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1 мл/кг, что связано, видимо, с усилением притока клеток, в основном, деструктивно измененных клеток, от печени по афферентным лимфатическим сосудам в печеночный лимфатический узел.

В одноименных структурных компонентах печеночного лимфатического узла через 2 недели после действия СС1/4 в дозе 0,2 мл/кг и в дозе 0,1 мл/кг отмечается практически равный уровень деструкции клеток (различия недостоверны). Макрофагальная реакция в мякотных тяжах и в мозговых синусах также не меняется, за исключением паракортикальной зоны и краевых синусов, где содержание макрофагов снижается, соответственно, в 1,8 и в 9,2 раза, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1мл/кг. На 2-й неделе эксперимента в мозговых и краевых синусах увеличивается число зернистых лейкоцитов в 1,6 раза и в 1,3 раза, соответственно.

Спустя 2 недели после введения СС1/4 в дозе 0,2 мл/кг, в структурных зонах печеночных лимфатических узлов не выявлены клетки с картинами митозов. Во всех зонах органа увеличивается число молодых форм клеток, в том числе появляются бласты в мякотных тяжах, в мозговом и краевом синусе (0,47%-3,18%). В этот же период (через 2 недели) в структурных компонентах печеночного лимфатического узла после действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг, в отличие от дозы 0,1мл/кг, появляются единичные плазматические клетки (0,49%-4,44%). Однако в мякотных тяжах содержание плазматических клеток оказывается на 14% меньше, чем при действии дозы 0,1мл/кг.

Исследование показало, что 2-х недельный срок после введения СС1/4 в дозе 0,2мл/кг является, видимо, критическим периодом, когда в органе исчезают функционально активные лимфоидные узелки с центрами размножения, что приводит практически к полному подавлению лимфоцитопоэза.. Отмеченная нами реакция печеночных лимфатических узлов является, видимо, проявлением стресса, при котором реагируют наиболее уязвимые клеточные популяции лимфоидных клеток, какими являются молодые и пролиферирующие клетки (Селье Г., 1960; Петров Р.В., 1987; Новиков В.С., 2000; 2001). Согласно представлениям Горизонтова П.Д. (1976) и Меерсона Ф.З. (1981), выявленная нами перестройка в цитоархитектонике структурных зон печеночного лимфатического узла на 2-й неделе после токсического действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг, является, видимо, отражением «тревожного» адаптационного синдрома, при котором в органе на фоне резкого снижения лимфоцитопоэза, не меняется деструкция клеток и практически не меняется содержание лимфоцитов. Отмеченный комплекс изменений в печеночном лимфатическом узле свидетельствует, возможно, о сопротивляемости организма в условиях токсического действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг.

В последующие сроки эксперимента, спустя 4 и 7 недель после введения крысам СС1/4 в дозе 0,2 мл/кг морфологическая картина печеночных лимфатических узлов практически одинакова. Однако, в отличие от предыдущего срока опыта (через 2 недели после введения СС1/4 в дозе 0,2мл/кг), в органе появляются функционально активные лимфоидные узелки с широкими центрами размножения, как и при введении СС1/4 в дозе 0,1мл/кг. Паренхима печеночных лимфатических узлов инфильтрирована крупными макрофагами с клеточным детритом. Площадь паракортикальной зоны в них резко расширена. В мозговых синусах видны обширные опустошенные зоны, лишенные клеточных элементов, а также кровоизлияния. В органе усиливается разрастание волокон соединительной ткани.

Исследование показало, что спустя 4 и 7 недель после введения СС1/4 в дозе 0,2мл/кг, резко снижается функциональная активность печеночных лимфатических узлов, по сравнению с действием дозы 0,1мл/кг. Во всех структурных зонах лимфатического узла, отсутствуют клетки с картинами митозов и исчезают бласты. Исключение составляют центры размножения лимфоидных узелков, где спустя 4 недели число бластов уменьшается в 2,7 раза, и в 2,4 раза - через 7 недель, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1мл/кг. Подавление процессов лимфоцитопоэза (исчезновение бластов и митозов) на 4 и 7 неделе опыта является четким проявлением токсического действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг.

По мнению многих авторов (Бабаева А.Г., 1989; Бабаева А.Г., Зотиков Е.А., 1987; Труфакин В.А., Шмаков А.Н. 1991; Growley M.K., 1991; Lennert K., Stein H., 1982; Phipps R.P., Roper R.L., Stein S.H., 1990), снижение функциональной активности центров размножения в лимфоидных узелках, в морфологической зоне созревания В-лимфоцитов, приводит к подавлению созревания как молодых, так и плазматических клеток. Результаты наших исследований полностью подтверждают подобные взгляды, т.к. установлено, что спустя 4 и 7 недель, действие СС1/4 в дозе 0,2мл/кг приводит к подавлению реакции плазматических клеток в печеночных лимфатических узлах. В структурных компонентах лимфатического узла плазматические клетки (плазмобласты и плазмоциты) полностью исчезают или их количество уменьшается. В мякотных тяжах после действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг число плазмоцитов через 4 недели снижается в 1,4 раза, а через 7 недель - в 2,4 раза.

Плотность распределения лимфоидных клеток в печеночных лимфатических узлах, спустя 4 и 7 недель после воздействия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг и в дозе 0,1мл/кг, сохраняется практически на одном уровне. Отмечено только, что в сравнении с низкой дозой СС1/4 (0,1мл/кг), после действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг на 4-й неделе опыта плотность клеток в 1,6-2,5 раза снижается в синусах (мозговых и краевых) и на 7-й неделе опыта - уменьшается в мякотных тяжах и в мозговых синусах (на 19,0 клеток). После воздействия СС1/4 в малой и высокой концентрациях в мантии, паракортикальной зоне и мякотных тяжах содержание лимфоцитов и процессы деструкции клеток сохраняются на одном уровне. Однако, в динамике, по сравнению с предыдущими сроками (1 и 2 недели), в структурных компонентах лимфатического узла к 4-й и к 7-й неделе, после введения СС1/4 в дозе 0,2мл/кг отмечен более высокий уровень деструктивных процессов (в 1,2-2,2 раза). В этих же зонах снижается количество макрофагов (в 1,4-2,3 раза).

Учитывая высокую токсичность СС1/4, можно предположить, что морфофункциональные перестройки печеночного лимфатического узла в отдаленные сроки от момента воздействия вызваны аллергическими реакциями. Многие авторы указывают на опасность развития аллергических реакций при угнетении иммунокомпетентных клеток в органах иммунной системы, которые отмечались при воздействии на организм животных антигенов различной природы (Васильев Н.В., Гербек Г.В., 1972; Волошин Н.А., Яхница А.Г., 1982; Дуева Л.А. и соавт., 1982; Сапин М.Р. и соавт., 1977; Четверных В.А., Федотов Л.Я., 1981). В нашем исследовании после воздействии СС1/4 в дозе 0,2мл/кг установлено резкое увеличение числа зернистых лейкоцитов (до 8,3%) к 7-й неделе опыта в мозговом, краевом синусах и в мякотных тяжах, что характеризует развитие аллергической и воспалительной реакций в организме, тогда как при действии СС1/4 в дозе 0,1мл/кг эти единичные клетки выявлены только в мякотных тяжах.

На основании литературных данных и полученных нами результатов исследования, можно заключить, что степень выраженности реактивных изменений в структурной организации различных органов иммунной системы, возможность их реабилитации прямым образом зависит от времени и вида действующего агента, от характера поражения, а также от продолжительности последующих сроков восстановления. В заключение следует отметить, что нами выявлена высокая степень перестройки клеточного состава печеночных лимфатических узлов в отдаленные периоды после действия четыреххлористого углерода, характеризующая подавление функциональной активности органа. Установлено, что от 1 до 7 недель после введения токсического вещества СС1/4 в органе, помимо резко выраженных клеточных изменений (подавление митотической активности клеток, лимфоцитопоэза, иммуноцитопоэза, усиления деструкции), отмечены такие структурные изменения (резкое расширение паракортикальной зоны и сохранение лимфоидных узелков с центрами размножения), которые в морфологии, по мнению Бородина Ю.П. (2006), являются проявлением гиперактивации лимфоидных структур, что создает условия для развития аутоиммунных процессов и в дальнейшем способствует развитию иммуннодефицитных состояний в организме. С учетом наших и литературных данных можно предположить, что при токсическом поражении печени отмечаются резкие нарушения в морфофункциональном состоянии регионарных лимфатических узлов, которые можно характеризовать как иммуннодефицитные, что является отражением общей реакции иммунной системы в организме.

ВЫВОДЫ

1. Печеночные лимфатические узлы крыс обладают высокой чувствительностью к воздействию 5% спиртового раствора и четыреххлористого углерода (СС1/4) в различных его концентрациях (0,1мл/кг и 0,2мл/кг). В отдаленный период, спустя 1,2,4 и 7 недель после окончания эксперимента, продолжается глубокое токсическое воздействие СС1/4 и 5% спиртового раствора на структурную организацию печеночных лимфатических узлов, приводящее к стойким нарушениям морфофункционального состояния органов.

2. У контрольных животных, употреблявших 5% спиртовой раствор, в печеночных лимфатических узлах, начиная с 2-й недели опыта, по сравнению с показателями интактных животных, резко расширяется паракортикальная зона и снижается площадь мозгового вещества. Спустя 4 и 7 недель после действия спиртового раствора, содержание лимфоидных узелков с центрами размножения в органе увеличивается в 2-3 раза. Во всех зонах печеночных лимфатических узлов после действия 5% спиртового раствора с 1-й по 7-ю недели плотность распределения лимфоидных клеток на единице площади гистологического среза в 880мкм/2 увеличивается на 17-27 клеток, по сравнению с интактными значениями.

3. В динамике эксперимента (от 1 к 7 неделе) употребление 5% спиртового раствора во всех структурных компонентах печеночных лимфатических узлов приводит к увеличению числа деструктивно измененных и разрушенных клеток (в 1,4 - 4,2 раза) и макрофагов (в 1,3 - 5,6 раза).

4. В контроле, после употребления 5% спиртового раствора, число малых лимфоцитов с 1 по 4 недели опыта во всех зонах печеночных лимфатических узлов достоверно не изменяется и только к 7-й неделе опыта их содержание уменьшается относительно интактных показателей в мантии и паракортикальной зоне (на 11,39% и на 15,19%).

У контрольных животных с 1-й до 4-й недели эксперимента в печеночных лимфатических узлах клетки с картинами митозов сохраняются только в центрах размножения лимфоидных узелков (1,09%-2,52%) и исчезают на 7-й неделе опыта. От 1-й к 7-й неделе опыта количество молодых форм клеток, по сравнению с интактной группой, увеличивается в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, в паракортикальной зоне (в 1,4-3,2 раза) и резко снижается в мякотных тяжах и в мозговых синусах (в 1,5-2 раза). Содержание плазматических клеток в структурных зонах печеночных лимфатических узлов уменьшается от 1-й к 7-й неделе. На 7-й неделе опыта плазмоциты выявлены только в паракортикальной зоне и в мякотных тяжах, где их число в 2,3 раза меньше, чем в лимфатических узлах интактной группы животных.

5. Введение четыреххлористого углерода (СС1/4) в дозе 0,1мл/кг приводит к увеличению площади паракортикальной зоны, уменьшению площади мозгового вещества и сохранению лимфоидных узелков с центрами размножения в печеночных лимфатических узлах крыс. Спустя 4 и 7 недель после действия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, в лимфатических узлах отмечается полнокровие в сосудах, опустошенные участки и кровоизлияния в мозговых синусах. На протяжении эксперимента, во всех зонах лимфатического узла, по сравнению с контролем, увеличивается плотность распределения лимфоидных клеток, особенно через 2 недели после действия СС1/4 в дозе 0,1 мл/кг (на 7,6-24,0 клеток).

6. Через 1 неделю после окончания введения СС1/4 в дозе 0,1 мл/кг в мантии лимфоидных узелков и в мякотных тяжах печеночных лимфатических узлов уменьшается содержание молодых форм клеток. Клетки с картинами митозов отмечаются только в центрах размножения лимфоидных узелков, где их число и молодые формы клеток сохраняются на уровне интактных показателей.

В мозговых синусах печеночных лимфатических узлов через 1 неделю после действия СС1/4 в дозе 0,1 мл/кг увеличивается содержание плазматических клеток (плазмобластов – в 6,9 раза, плазмоцитов – 1,9 раза). Эти клетки появляются в центрах размножения, мантии и паракортикальной зоне (0,39%-1,28%). Содержание лимфоцитов (малых и средних) и деструктивно измененных и разрушенных клеток остается на уровне контрольных значений.

7. Спустя 2 недели после окончания введения СС1/4 в дозе 0,1 мл/кг, по сравнению с контролем, в печеночных лимфатических узлах увеличивается содержание малых лимфоцитов в лимфоидных узелках с центрами и без центров размножения на 5,84%-12,82%. Содержание деструктивно измененных клеток увеличивается в паракортикальной зоне, мякотных тяжах и мозговых синусах в 1,2-1,4 раза. В этих же зонах увеличивается число макрофагов в 1,4-3,9 раза. В лимфатических узлах, за исключением центров размножения, не выявлены клетки с картинами митозов и бласты. В этот срок опыта неравномерно изменяется содержание плазматических клеток: в паракортикальной зоне и в мозговых синусах число этих клеток уменьшается в 3,7-4,4 раза, в мякотных тяжах, напротив, увеличивается, за счет увеличения числа плазмоцитов в 1,5 раза, по сравнению с контролем.

8. Через 4 недели после окончания воздействия СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, по сравнению с контролем, в мозговых синусах лимфатических узлах в 2,2 раза уменьшается содержание плазматических клеток, во всех зонах органа снижается содержание бластов в 1,3-3,6 раза и увеличивается число макрофагов в 1,2-2,7 раза.

9. Спустя 7 недель, действие СС1/4 в дозе 0,1мл/кг в структурных зонах печеночных лимфатических узлов проявляется в увеличении числа деструктивно измененных клеток в 1,2-1,5 раза (особенно в паракортикальной зоне) и подавлении процессов лимфоцитопоэза, о чем свидетельствует полное исчезновение бластов и клеток с картинами митозов. В структурных зонах лимфатического узла исчезают плазмоциты, за исключением мякотных тяжей, где число этих клеток уменьшается в 2,2 раза, по сравнению с интактной группой.

10. Воздействие СС1/4 в концентрации 0,2мл/кг, по сравнению с действием СС1/4 в дозе 0,1мл/кг, вызывает более ранние и качественно наиболее выраженные изменения в печеночных лимфатических узлах крыс. Это выражается в подавлении митотической активности клеток во всех зонах органа и увеличении содержания деструктивных клеток, начиная с 1-й недели опыта. С 4 по 7 неделю эксперимента после действия СС1/4 в дозе 0,2мл/кг в печеночных лимфатических узлах уменьшается число бластов в центрах размножения лимфоидных узелков (в 2,5 раза), в других зонах они исчезают. К 7-й неделе опыта в структурных зонах лимфатического узла уменьшается число малых лимфоцитов, исчезают плазматические клетки. В мякотных тяжах зрелых антитепродуцирующих клеток (плазмоцитов) содержится в 2,6 раза меньше, чем при действии СС1/4 в дозе 0,1мл/кг.

СПИСОК

работ, опубликованных по материалам диссертации

  1. Хребтовский А.М. Анатомо-функциональные изменения печеночных лимфатических узлов при экспериментальной патологии печени и в условиях применения полиоксидония. Морфология, 2004, т. 126, №4, с. 131.
  2. Григоренко Д.Е., Хребтовский А.М. Морфогенез печеночных лимфатических узлов при экспериментальном циррозе печени. Материалы УП Всероссийской конференции по патологии клетки. М., изд. НИИ морфологии человека РАМН, 2005, с. 43-44.
  3. Григоренко Д.Е., Хребтовский А.М., Сапин М.Р. Морфофункциональное состояние печеночных лимфатических узлов крыс при экспериментальном гепатите. Вестник новых медицинских технологий, 2006, №1, с. 30-33.
  4. Григоренко Д.Е., Хребтовский А.М. Перестройка микроструктуры печеночных лимфатических узлов при моделировании хронического гепатита. Успехи современного естествознания, М., изд. «Академия Естествознания», 2006, № 3, с. 81-82.
  5. Хребтовский А.М, Григоренко Д.Е., Моталов В.Г. Структурно-функциональная организация печеночных лимфатических узлов крыс при хроническом гепатите. Сборник науч. трудов «Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии», изд. ГУ НИИ ИМЧ РАМН, 2006, с. 89-91.
  6. Григоренко Д.Е., Хребтовский А.М. Печеночные лимфатические узлы крыс после действия СС1/4. Морфология, 2006, т. 129, №4, с. 40-41.



 




<
 
2013 www.disus.ru - «Бесплатная научная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.